分子生物學(xué)簡(jiǎn)介-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 要研究領(lǐng)域包括蛋白質(zhì)體系、蛋白質(zhì)核酸體系和蛋白質(zhì)脂質(zhì)體系。結(jié)構(gòu)分析的中心內(nèi)容是通過(guò)闡明生物分子的三維結(jié)構(gòu)來(lái)解釋細(xì)胞的生理功能。20世紀(jì)50年代是分子生物學(xué)作為一門獨(dú)立的分支學(xué)科脫穎而出并迅速發(fā)展的年代。1965年中國(guó)科學(xué)家合成了有生物活性的胰島素，首先實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)的人工合成。但在當(dāng)時(shí)基因的本質(zhì)并不清楚。遺傳密碼的闡明則揭示了生物體內(nèi)遺傳信息的貯存方式。進(jìn)入70年代，由于重組DNA研究的突破，基因工程已經(jīng)在實(shí)際應(yīng)用中開(kāi)花結(jié)果，根據(jù)人的意愿改造蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)工程也已經(jīng)成為現(xiàn)實(shí)。蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的組織形式可分為四個(gè)主要的層次。二級(jí)結(jié)構(gòu)在空間的各種盤繞和卷曲為三級(jí)結(jié)構(gòu)。隨著結(jié)構(gòu)分析技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在已有幾千個(gè)蛋白質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)和幾百個(gè)蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)得到了闡明。生物體的遺傳特征主要由核酸決定。遺傳信息要在子代的生命活動(dòng)中表現(xiàn)出來(lái)，需要通過(guò)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯?；蛟诒磉_(dá)其性狀的過(guò)程中貫串著核酸與核酸、核酸與蛋白質(zhì)的相互作用。它包括細(xì)胞外周膜和細(xì)胞內(nèi)具有各種特定功能的細(xì)胞器膜。生物體取得能量的方式，或是像植物那樣利用太陽(yáng)能在葉綠體膜上進(jìn)行光合磷酸化反應(yīng)；或是像動(dòng)物那樣利用食物在線粒體膜上進(jìn)行氧化磷酸化反應(yīng)。生物膜的另一重要功能是細(xì)胞或細(xì)胞膜內(nèi)外的信息傳遞。細(xì)胞膜的表面性質(zhì)還對(duì)細(xì)胞分裂繁殖有重要的調(diào)節(jié)作用。分子生物學(xué)的成就說(shuō)明：生命活動(dòng)的根本規(guī)律在形形色色的生物體中都是統(tǒng)一的。分子生物學(xué)則在分子水平上揭示了生命世界的基本結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)的根本規(guī)律的高度一致，揭示了生命現(xiàn)象的本質(zhì)。由此得出的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，與用經(jīng)典方法得到的是基本符合的。第三，對(duì)于形態(tài)結(jié)構(gòu)非常簡(jiǎn)單的微生物的進(jìn)化，則只有用這種方法才能得到可靠結(jié)果。分子生物學(xué)將為人類最終征服癌癥做出重要的貢獻(xiàn)。目前，常用的分子生物學(xué)技術(shù)有如下幾種[1]?： PCR單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析 PCR 單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(PCR single strand conformation analysis, PCR SSCP) 是近年來(lái)在基因突變檢測(cè)中運(yùn)用最廣泛的方法之一。PCR SSCP 突變檢測(cè)敏感性隨PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度的增加而降低,一般用于檢測(cè)較小外顯子的突變。該綜合手段可以單鏈構(gòu)型多態(tài)性和異源雙鏈構(gòu)型分析兩個(gè)不同的層次檢出突變, 是一種經(jīng)濟(jì)、迅速的突變檢測(cè)手段, 但無(wú)法提供突變位置的信息。PCR REF 法將RFLP 和SSCP 技術(shù)優(yōu)勢(shì)組合, 將PCR 擴(kuò)增的待測(cè)片段用5~ 6 種限制酶依次消化, 混合并進(jìn)行末端標(biāo)記, 最后經(jīng)變性處理并在非變性凝膠上電泳分離, 從而獲得來(lái)自片段長(zhǎng)度和片段構(gòu)象的雙重突變信息。因此, 正常DNA雙鏈和異源雙鏈在梯度變性膠中電泳時(shí), 異源雙鏈總是先解鏈。 DGGE 的成功有賴于雙鏈DNA內(nèi)部低溫解鏈部分變性后遷移率的改變。 DGGE 方法需要設(shè)計(jì)特定片段最佳的PCR引物以及最佳變性條件, 這一過(guò)程比較復(fù)雜, 梯度變性膠的制備需要的設(shè)備較昂貴, 所以在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室不易實(shí)施。只有與帶熒光標(biāo)記的FLR 分子正鏈匹配的DNA雙鏈, 經(jīng)過(guò)電泳后方可被DNA測(cè)序儀的激光檢測(cè)系統(tǒng)所檢測(cè)。DSCA技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)還在于它依據(jù)樣品經(jīng)過(guò)固定檢測(cè)儀的時(shí)間差, 而非相同電泳時(shí)間遷移的距離差來(lái)判斷突變的有無(wú), 這樣就避免了諸如SSCP 等技術(shù)分析中因遷移速率差異而降低的泳動(dòng)速度慢的條帶檢測(cè)率。Ntilde。在部分變性條件下, 高壓液相色譜分析可以有效地區(qū)分由變異堿基與正常堿基形成的異源DNA雙鏈和正常DNA雙鏈。 端或中間設(shè)計(jì)一錯(cuò)配堿基, 使之僅能與突變型或野生型基因互補(bǔ)而只擴(kuò)增突變型或野生型基因。 化學(xué)裂解錯(cuò)配堿基法 化學(xué)裂解錯(cuò)配堿基法( chemical cleavage mismatch, CCM) 通過(guò)化學(xué)修飾并切割異源DNA雙鏈中錯(cuò)配堿基, 達(dá)到檢測(cè)點(diǎn)突變的目的。該手段通常首先對(duì)目標(biāo)DNA和野生型DNA進(jìn)行PCR 擴(kuò)增, 然后對(duì)野生型DNA擴(kuò)增片段進(jìn)行末端標(biāo)記, 標(biāo)記片段作為探針與目標(biāo)序列復(fù)性形成異源雙鏈, 用四氧化鋨( OsO4) 或羥胺(hydroxylamine) 修飾并用哌啶( piperidine) 切割, 聚丙烯酰胺電泳分離不同長(zhǎng)度的片段。 編輯本段分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用 分子生物學(xué)技術(shù)：可應(yīng)用于遺傳性疾病的研究和病原體的檢測(cè)及腫瘤的病因?qū)W、發(fā)病學(xué)、診斷和治療等方面的研究提高到了基因分子水平。是狼就要練好牙，是羊就要練好腿。拼一個(gè)春夏秋冬！贏一個(gè)無(wú)悔人生！早安！—————獻(xiàn)給所有努力的人.學(xué)習(xí)
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