【正文】 真核生物的 RNA腫瘤病毒中都有逆轉(zhuǎn)錄酶。 40 修復(fù) 1 光復(fù)活 光 （ 400nm)激活光復(fù)活酶 ， 切除 dimer上的 C－ C鍵 ， 使 堿基復(fù)原 …… 紫外照射形成的產(chǎn)物 。 重組修復(fù)酶 形成一條新的模板鏈 42 4 誘導(dǎo)修復(fù) ① SOS反應(yīng)：許多導(dǎo)致 DNA損傷或抑制 復(fù)制 的處理均能引起一系列復(fù)雜的誘導(dǎo)效應(yīng) ， 這就是 SOS反應(yīng) ② SOS反應(yīng) ：修復(fù) +變異 ? 可以誘導(dǎo)切除修復(fù)和重組修復(fù)的酶 ， 加強(qiáng)修復(fù) ? SOS反應(yīng)能誘導(dǎo)產(chǎn)生缺乏 校正功能的DNA聚合酶 ， 保證在損傷部位的復(fù)制避免死亡 ， 但是帶來了高變異率 ① SOS修復(fù)是導(dǎo)致突變的修復(fù) 。 52 啟動子結(jié)構(gòu) － 35序列（ TTGACA保守序列）提供RNA聚合酶 全酶識別信號 － 10序列（ TATAAT保守序列， Pribnow框）是酶的緊密結(jié)合位點(diǎn) RNA合成的起始點(diǎn) 53 RNA核心酶 + ?因子 ① 非專一性復(fù)合物（不穩(wěn)定） ：酶 + ?因子 結(jié)合并接觸 DNA分子 ② 較松弛的封閉型啟動子復(fù)合物 ：識別 — 35位點(diǎn)并結(jié)合 ③ 開放型啟動子復(fù)合物 ： 酶和 DNA在緊密結(jié)合位點(diǎn)緊密結(jié)合，在－ 10處打開雙鏈，識別其中模板鏈 ④ 開放型復(fù)合物一形成， DNA就繼續(xù)解鏈， 酶 移動到起始位點(diǎn) 。 55 （三）延伸 ?因子脫離全酶 ， 核心酶和 DNA結(jié)合松弛 ， 可沿模板移動 ， 并按模板序列選擇下一個核苷酸摻入到生長的RNA鏈的 3’ 端 。 ② 終止子功能：使 RNA聚合酶停止 RNA合成 ， 并釋放合成的 RNA。 含剪接 、 剪切和化學(xué)修飾 。 ① 剪切 ② 剪接 ③ 在 3’－ OH加入 CCAOH ④ 核苷酸修飾 ⑤ 稀有堿基獲得 堿基修飾酶、脫氨、甲基化、羥基化等 63 3 rRNA加工 原核生物先合成 30SrRNA， 經(jīng)核糖核酸酶作用形成： 16S 23S 5S 真核生物為 35～ 45S前體 rRNA 形成： 28S， 18S和 rRNA 5SrRNA 單獨(dú)轉(zhuǎn)錄來 甲基化修飾 甲基化 64 Something SPECIAL 1981年 Cech research group 研究 RNA剪接 、 剪切機(jī)制發(fā)現(xiàn)了 RNA分子本身有催化功能 將這類具有剪接功能的 RNA催化劑命名為核酶（ ribozyme） 具有催化活性的 RNA稱為核酶 。 mRNA：有起始密碼子 AUG和終止密碼子 UAA, UAG， UGA， mRNA 68 遺傳密碼 ? 4種核苷酸編碼 20種氨基酸 ， 如何排列 ？ ? 如果 3個核苷酸編碼 1氨基酸有 64（ 43）種排列 ? 實(shí)驗(yàn) 證明 ， mRNA鏈上相鄰的三個堿基為一組稱為密碼或三聯(lián)體密碼 ， 編碼一種氨基酸 ? 1961年 Codon概念 ? 1966年全部查清了 20中氨基酸對應(yīng)的 61個密碼子 ， 其余 3個為終止密碼子 。密碼子的擺動性 182。 正確閱讀需要從 mRNA上 一個正確的起點(diǎn)開始 ，插入和缺失一個 ， 就會造成該點(diǎn)以后的讀碼錯誤 移碼 移碼突變 。 同義密碼子：同一個氨基酸的一組密碼子 182。 AUG為起止密碼子＝ Met的密碼子 182。稀有堿基如 I， 可以和 U、 C、A配對，閱讀能力很強(qiáng)。如 tRNA gene etc. UAUUAG TyrtRNA 82 tRNA基因多拷貝，結(jié)構(gòu)不同 ? 產(chǎn)物多（多數(shù) tRNA） ? 產(chǎn)物少（少數(shù) tRNA）是校對 tRNA ? 已知 UAG有 3個抑制基因（分別解讀為絲氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸）：原因是抑制基因編碼生成不正常的 tRNA，使攜帶這些氨基酸的 tRNA的反密碼子改變，如 tRNATyr基因突變將反密碼子由 AUG變成 AUC，就使得攜帶 Tyr的 tRNA可以識別 UAG（ UAC—— UAG無義突變），使蛋白合成繼續(xù)。 A和 P相鄰。 E位點(diǎn)：無負(fù)載 tRNA的出口 174。 ① 酶參與 …… 二硫鍵異構(gòu)酶 、 順反異構(gòu)酶等 （ 肽鏈間二硫鍵形成非常重要 ） ② 分子伴侶 （ 監(jiān)護(hù)分子 ） ：是由若干在結(jié)構(gòu)上不相關(guān)的蛋白質(zhì)家族組成 ， 能和其他蛋白結(jié)合并使其穩(wěn)定的處于非天然狀態(tài) ， 然后通過有控制的釋放而促進(jìn)這些蛋白的正確折疊 ， 但是自身不成為被折疊蛋白質(zhì)的一部分 。 蛋白質(zhì)的分選信號和靶細(xì)胞器上的分選信號受體 一、蛋白質(zhì)的分選信號 信號肽 ：為多肽鏈上的 15～ 60個氨基酸殘基序列。 2. 轉(zhuǎn)譯后運(yùn)送：蛋白質(zhì)在核糖體上合成后被釋放到胞質(zhì)中，然后跨膜運(yùn)送。 100 代謝調(diào)節(jié)： 細(xì)胞內(nèi)代謝速度按生物的需要而改變的一種生理作用。 ? 三個關(guān)鍵的中間產(chǎn)物： 6— 磷酸葡萄糖、丙酮酸、乙酰 CoA。 106 （二）脂類代謝和 PRO代謝的相互關(guān)系 脂肪 ：蛋白 脂類 ： 甘油 三磷酸甘油 DHAP 丙酮酸 草酰乙酸 酮戊二酸 脂肪酸 氧化為乙酰輔酶 A經(jīng)乙醛酸循環(huán) 琥珀酸 蘋果酸 草酰乙酸 蛋白質(zhì)：脂肪 蛋白質(zhì)水解 AA ： 酮酸 磷酸甘油 乙酰輔酶 A 107 （三）糖代謝與脂類代謝的相互關(guān)系 糖：脂肪 糖（ EMP）： 磷酸二羥丙酮 DHAP α— 磷酸甘油 丙酮酸 乙酰 CoA 脂酰 CoA 糖 HMP提供 NADPH 脂肪：糖 脂肪：甘油 DHAP 糖 脂肪酸： 乙酰 CoA（乙醛酸循環(huán)）琥珀酸 草酰乙酸 PEP（糖異生） 糖 脂肪 108 （四）核酸與其他物質(zhì)的代謝關(guān)系 核酸不是主要的 C源、 N源和能源，但通過主宰 PRO合成來影響細(xì)胞的組成和代謝類型。 四大物質(zhì)在代謝中不是孤立的，而是彼此影響，相互轉(zhuǎn)化和密切相關(guān)的。 EMP和糖異生過程： 己糖激酶： G G－ 6－ P 6－ 磷酸果糖激酶： F－ 6－ P F－ 1， 6－ P 丙酮酸激酶： PEP 丙酮酸 111 丙酮酸羧化酶 蘋果酸脫氫酶 延胡索酸酶 丙酮酸羧激酶 果糖 己糖激酶 磷酸葡萄糖異構(gòu)酶 磷酸果糖激酶 醛縮酶 磷酸甘油醛脫氫酶 磷酸甘油酸變位酶 丙酮酸激酶 烯醇酶 葡萄糖 6磷酸酶 112 多酶體系 生物體內(nèi)常常是為了催化一系列連鎖反應(yīng)而聯(lián)系成多酶體系。 通過與膜的結(jié)合與解離迅速調(diào)節(jié)其活性 ， 應(yīng)答迅速 、 靈敏 。 原核生物的基因組和染色體簡單 ， 其基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯可以在同時(shí)和同位置進(jìn)行 ， 基因調(diào)節(jié)主要在 轉(zhuǎn)錄水平 進(jìn)行 。 酶合成的阻遏（阻遏作用）： 由于某種代謝途徑的 產(chǎn)物 過多，導(dǎo)致該途徑中與該產(chǎn)物合成有關(guān)的某個或某些酶停止合成的現(xiàn)象。輔阻遏物 trpE D C B A Trp E D C B A 121 分解代謝物 阻遏 (依賴調(diào)節(jié)基因 ) 大腸桿菌在葡萄糖和乳糖共存的培養(yǎng)基中，葡萄糖用完前，乳糖不能被利用 葡萄糖降解產(chǎn)物抑制腺苷酸環(huán)化酶活性、活化磷酸二酯酶活性 乳糖、半乳糖、阿拉伯糖、麥芽糖等操縱子 122 衰減作用（區(qū)別調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物對轉(zhuǎn)錄的調(diào)控） 衰減子： 是位于結(jié)構(gòu)基因上游前導(dǎo)區(qū)的終止子。 ② 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 由 核到胞質(zhì)運(yùn)輸 :ATP提供能量穿過核孔復(fù)合體到胞漿 ③ mRNA在胞質(zhì)中的定位 ：形成 RNP運(yùn)輸復(fù)合體 ， 運(yùn)輸?shù)侥康牡胤g （ 空間調(diào)節(jié) ） 125 （三）翻譯水平的調(diào)控 1. 原核生物的 mRNA上游的 SD序列 :有控制部位的結(jié)構(gòu)特征的 mRNA翻譯起始頻率高。 級聯(lián)系統(tǒng) ：連鎖代謝反應(yīng)中的一個酶被激活后，連續(xù)的發(fā)生其他酶被激活，導(dǎo)致信號的放大。如代謝底物過量情況下，避免代謝途徑過分擁擠。 ④ 逐步反饋調(diào)節(jié)： 132 同功酶在代謝調(diào)控中的作用 在分枝代謝中起重要的調(diào)節(jié)作