【正文】 細(xì)胞 調(diào)節(jié)的抗腫瘤殺傷作用的發(fā)生 ， 還影響 溶酶體 的發(fā)生過程 ，導(dǎo)致溶酶體膜缺損 ， 使有關(guān)細(xì)胞中的溶酶體增大 ，溶酶體功能缺陷 。 該系小鼠對判別生命早期 免疫功能缺陷 和某種 自身免疫性疾病 發(fā)生都是有用的模型 。 顯性半肢畸形小鼠 dominant hemimelia mice 3 SAM小鼠 2 日本京都大學(xué)胸部疾患研究所老化生物研究室，在美國引進(jìn)的 AKR/J小鼠 (胸腺腫瘤模型小鼠 )中發(fā)現(xiàn)突變小鼠，用 20年時間精心培育成功快速老化模型小鼠 (senescence accelerated mouse， SAM)。 ? 該小鼠是研究老年病的理想動物模型，也是研究老化腎虛的自發(fā)性動物模型。 dydy小鼠出生后２周可見后肢拖地。 ?臨床癥狀：肥胖、高血壓、蛋白尿、多尿，最后可因酮尿而死亡。 ?與人類肥胖很相似。 ? C57BL/6JWv/+ WB/ReJW/+ ↓ ? WWv ， Wv/+， W/+ ， +/+ 這些突變體均無生育能力 ? W/WV： 骨髓衰竭性貧血，可以遺傳，不育，顯性白班。 ? WV/WV ,WV/+： 可存活到成年，有白班，黑眼，不育， RBC數(shù)目減半。 RBC數(shù)目正常。 二、自發(fā)性腫瘤動物模型 二、自發(fā)性腫瘤動物模型 3．自發(fā)性 肝臟 腫瘤 （ 1） C3H系： C3H/Hc達(dá) 14月齡雄鼠為 85%； （ 2） CBA系： CBA/J雄鼠 65%； 二、自發(fā)性腫瘤動物模型 4．自發(fā)性淋巴性白血病 （ 1） AKR系： 76～ 90%； （ 2） C58系： 12月齡內(nèi) 95～ 97%。 二、自發(fā)性腫瘤動物模型 8．自發(fā)性胃腸道腫瘤 （ 1） Ⅰ 系：胃腫瘤自發(fā)率達(dá) 100%。 一般應(yīng)當(dāng)選用 高發(fā)病率 的實驗動物腫瘤模型作為 研究對象 。 Comparison of Heart sizes Dog Rat Mouse Cast of Coronary Arteries What happens to coronary flow? Histology Surgical technique 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 一、心肌梗死 動物模型 研究及治療心肌梗死需要有的動物模型。 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 一、心肌梗死動物模型 結(jié)扎冠狀動脈法 缺點： （ 1） 手術(shù)復(fù)雜，創(chuàng)傷大，對動物影響大； （ 2）沒有血脂升高，冠狀動脈粥硬化病變； 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 一、心肌梗死動物模型 介入法 1948年， Roos等過頸動脈穿刺向主動脈根部注射淀粉混懸液來復(fù)制心肌梗死模型，此方法對動脈無選擇性，而且死亡率較高，未得到廣泛應(yīng)用。 缺點：技術(shù)要求高，動物容易死。 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 一、心肌梗死動物模型 人工培育的自發(fā)性冠狀動脈硬化模型 日本神戶大學(xué) Watanabe研制能夠產(chǎn)生高的冠狀動脈硬化傾向的 WHHL兔子。是全球范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問題。 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 二、高血壓動物模型 為更好地研究高血壓的發(fā)病機制及治療方法，動物實驗已成為其研究的重要手段。但是需要先進(jìn)的設(shè)備和技術(shù)。 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 二、高血壓動物模型 腎性高血壓動物模型 方法 ： 兩腎一夾法用絲線或銀夾狹窄左側(cè)腎動脈，狹窄程度在 50％一 80％之間，此方法復(fù)制率高，術(shù)后 2周血壓開始升高，至 4—5周可形成穩(wěn)定高血壓，并長期維持下去。 腎外包扎法高血壓模型 。 自發(fā)性高血壓大鼠 (突變系的遺傳病 ) (spontaneously hypertensive rat, SHR Rat) ? SHR Rat – 141/203 mmHg – Heart rate 390 ? Normal Rat – 84/121 mmHg – Heart rate 380 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 三、高脂血癥模型 由于體內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂、使血液中一種或幾種脂質(zhì)含量高于正常的癥狀成為高脂血癥，可表現(xiàn)為 高膽固醇血癥 和 高甘油三酯血癥 或兩者 兼有（混合型高脂血癥）。 ? 化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)應(yīng)用 最為廣泛 ，它主要包括 2類，一類是利用 化學(xué)試劑通過靜脈或腹腔注射 一次形成的模型；另一類是利用 高脂食餌飼喂或灌胃 一段時間后形成的。 ? 內(nèi)源性的高脂模型通過在食物中加入能 促進(jìn)肝臟合成膽固醇或甘油三酯的物質(zhì)而產(chǎn)生高脂表現(xiàn) 。 三、高脂血癥模型 ? 高脂飼料主要由基礎(chǔ)飼料、膽固醇、蛋黃粉、豬油按一定比例配制而成。 評價 ： （ 1） 家兔對高脂飼料敏感 ， 能 在 短期 內(nèi)便能出現(xiàn)高脂血癥 ， 模型穩(wěn)定 ， 采血方便 ， 較為理想 的高脂血癥模型； （ 2） 成本高； （ 3） 兔為草食動物 ，其脂代謝與人類差異較大 。 評價： 容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點 ， 但是取血不便 。 （ 2） 金黃地鼠血少 、 性情不大溫順 。 三、高脂血癥模型 非飼喂 高脂飼料誘發(fā) 高血脂癥的動物模型 高血脂模型動物的選用： 猴 、 豬 、 兔 、 雞 、 大鼠 、 小鼠 、 地鼠 藥物篩選為例 。 ? 造模方法 : ： 選用 Gottigen系小型豬較為理想 ， 用 1％ ～ 2％ 高脂食物飼喂 6個月即可形成動脈粥樣硬化病變 。 血清膽固醇較正常時升高 ～ 。 評價： 對喂飼膽固醇非常敏感 ， 在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變 。 評價： 雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑塊。長時間飼喂在主動脈內(nèi)膜可形成早期粥樣硬化病變。 四、動脈硬化動物模型 （ 2） 兒茶酚胺法： 給兔靜脈滴注去甲腎上腺素 l mg/天 ， 時間為 30 min。 四、動脈硬化動物模型 (3)半胱氨酸法： 給兔皮下注射 同型半胱氨酸硫代內(nèi)酯 ， 每天 20～ 25 mg/kg(以 5％ 葡萄糖溶液配成 lmg/ml的濃度 )， 連續(xù)20～ 25天 。 四、動脈硬化動物模型 體型較大的動物實驗期要求較長，難以用于高脂血癥與動脈粥樣硬化的快速研究。 五、心力衰竭動物模型 心率失常 是指心臟激動的起源、頻率、節(jié)律、傳導(dǎo)速度和傳導(dǎo)順序的異常。經(jīng) 舌下靜脈 一次注入烏頭堿 30μg/kg。 六、心率失常動物模型 六、心率失常動物模型 ? P wave Atrial Depolarisation ? QRS ? PR interval ? ST segment ? T wave PR Interval Q R S ST Segment P T 六、心率失常動物模型 造模方法： 竇性心律不齊 模型 方法：成年雄兔，用 10%水合氯醛 500mg/kg耳緣靜脈注射麻醉，仰臥，安裝心電導(dǎo)聯(lián)，記錄正常心電圖。 六、心率失常動物模型 造模方法： 房室傳導(dǎo)阻滯模型 機制：在犬 心臟房室結(jié)部位 注射一定量的無水乙醇可損害心臟傳導(dǎo)組織，從而造成傳導(dǎo)阻滯。 六、心率失常動物模型 第三章 循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型 七、休克動物模型 休克是一組復(fù)雜的、危及生命的癥候群，以血壓降低和微循環(huán)障礙和器官功能障礙為特征。股動脈放血造急性出血性休克。 七、休克動物模型 感染性休克 注射內(nèi)毒素（細(xì)菌脂多糖）或內(nèi)毒素合并半乳糖胺（肝毒性藥物）后，動物發(fā)生類似人細(xì)菌感染性休克。 七、休克動物模型 過敏性休克 用抗原物質(zhì)致敏動物， 2周后再次注入相通抗原，可發(fā)生急性 I性變態(tài)反應(yīng)，出現(xiàn)過敏性休克。 重點 ：造模機制；了解先進(jìn)的技術(shù)及儀器設(shè)備的使用原理和方法。 3. 移植性腫瘤（ transplant tumor）動物模型： 指將動物或人體腫瘤移植同種或異種動物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。 第四章 腫瘤疾病動物模型 造模方法 （ 1） 二乙基亞硝胺 (DEN)誘發(fā) 大鼠肝癌 選用體重 250 g左右的 SD大鼠，飼喂普通飼料，隨意飲水，給予 % DEN水溶液 mL灌胃，半年可誘發(fā)腫瘤 70%。 （一）誘發(fā)性肝癌動物模型 （二）誘發(fā)性 肺癌動物模型 造模機制 誘發(fā)肺癌的致癌物很多，常用 亞硝胺 。 一、 誘發(fā)性腫瘤動物模型 （四）誘發(fā)性 結(jié)腸癌動物模型 造模機制 動物結(jié)腸癌自然發(fā)生率很低，目前常用的致癌物以二甲基芐肼較好，即可口服又可注射。 一、 誘發(fā)性腫瘤動物模型 ? 誘發(fā)性腫瘤動物模型的注意問題： 1. 必須適當(dāng)選擇： 致瘤方法 、 動物種系 、 致癌物種類與溶劑 、 給藥劑量與途徑 及 觀察時間 等盡量簡便可行，有較好的重復(fù)性，并有利于與人腫瘤比較 。 2. 誘發(fā)性腫瘤動物模型最大的缺點是誘癌時間長，動物之間的個體差異大。 原代培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)首次傳代成功后即為 細(xì)胞系 。 二、移植性動物模型 移植方法 ： (1)一般要求 整個過程應(yīng)在 無菌條件下 進(jìn)行；對實體瘤應(yīng)用滅菌的手術(shù)器械切取，對腹水瘤應(yīng)用注射器抽吸； 常接種的部位：實體瘤可接種腋窩皮下，肌肉接種用大腿??；腹水瘤接種于腹腔。 二、移植性動物模型 B、腹水瘤 （ 1）抽取腹水 選擇接種后 57d的瘤源動物，脫臼致死，腹部消毒，打開腹腔，用注射器抽吸腹水，抽出的腹水。確認(rèn)止血后回納肝臟，逐層關(guān)腹。 （一）兔 VX2肝癌模型 造模方法 （ 2）超聲穿刺接種 采用 B超掃查待接種兔肝臟，明確兔肝位置并確定待接種部位，選定穿刺點、角度、深度。 （一）兔 VX2肝癌模型 造模方法 （ 2）超聲穿刺接種 模型評價：采用直接穿刺法復(fù)制出的 VX2兔肝癌模型具有方法簡單、成功率高，模型性質(zhì)穩(wěn)定的特點。避免懸液外滲引起腹腔內(nèi)種植。 （一）兔 VX2肝癌模型 應(yīng)用 建立局限于肝內(nèi)的獨立腫瘤模型，對臨床評價各種介入治療方案的療效及抗癌藥物的篩選等具有重要意義。 術(shù)后自由飲食 ， 術(shù)后 3 d肌注氨芐西林 50 mg/d,以預(yù)防感染 。 也可用免疫抑制劑或放射線降低動物的免疫功能 (免疫抑制動物 )，在進(jìn)行移植。術(shù)后預(yù)防感染。 （ 1）皮下接種法操作簡單，易于觀察，但腫瘤生長受局限，幾乎不轉(zhuǎn)移； （ 2）腹腔移植法由于位置深，難以觀察，潛伏期長，可出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶和癌性腹水。 3. 對宿主影