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生化分離工程2 萃取分離-預覽頁

2024-11-09 15:00 上一頁面

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【正文】 ②在疏水性環(huán)境中具有使親水性大分子如蛋白質(zhì)等保持活性的功能。是一種自我組織和排列而成的,并具熱力學穩(wěn)定的有序構造。 2021328 4 反膠團的形成 ? 反膠團的構造 ? 當向水溶劑中加入表面活性劑時,如表面活性劑的濃度超過一定的數(shù)值時,形成 正膠團( normal micelle) 。 2021328 5 ? 常用的表面活性劑 ? AOT( Aerosol OT),其化學名稱是琥珀酸二( 2乙基己基)酯磺酸鈉( Sodium di2ethylhexylsulfosuccinate),結(jié)構式下 ? CTAB(溴代十六烷基三甲銨)、 TOMAC(氯化三辛基甲銨)、 PTEA(磷脂酰乙醇胺)。 ? 反膠團“水池”中的水與普通水差異大。因為這一部分水被牢固地束縛著,所以粘度很大,流動性很差。這種方法的過程較快并可控制反膠團的平均直徑和含水量。 2021328 9 圖 215 蛋白質(zhì)溶解方式示意圖 2021328 10 反膠團萃取蛋白質(zhì)的基本原理 ? 反膠團萃取是有機相 水相間的分配萃取。 圖 216 反膠團萃取蛋白質(zhì)的示意圖 2021328 11 “ 水殼 ” 模型 ( watershell mode)) ? 蛋白質(zhì)向非極性溶劑中反膠團的納米級水池中的溶解,有圖 217所示的四種可能。因而包括立體性相互作用在內(nèi),表 511中所有的相互作用關系雖都很重要,但在多數(shù)場合下,是它們之間的復合作用占主導地位。當 pH< pI時,即在蛋白質(zhì)帶正電荷的 pH范圍內(nèi),它們幾乎完全溶入膠團內(nèi)。 ④降低 pH, 正電荷量增加,似乎有利于萃取率的提高。 2021328 17 ⑤ 添加 KCl等無機鹽,萃取率下降(圖 219)。與蛋白質(zhì)溶入與否沒有關系。 2021328 20 ? 疏水性相互作用對蛋白質(zhì)分配特性的影響不大 2021328 21 反膠團萃取過程 ? 多步間歇混合/澄清萃取過程 ? 圖 221是在 pH 9時,核糖核酸酶的溶解率很小,保留在水相而與其他兩種蛋白質(zhì)分離;相分離得到的反膠團相(含細胞色素 C和溶菌酶)與 mol/L的 KCl水溶液接觸后,細胞色素 C被反萃到水相,而溶菌酶的保留在反膠團相。 它是利用 超臨界流體( supercritical fluid, SCF),即其溫度和壓力略超過或靠近臨界溫度( Tc)和臨界壓力( pc),介于氣體和液體之間的流體作為萃取劑,從固體或液體中萃取出某種高沸點或熱敏性成分,以達到分離和提純的目的。超臨界流體萃取的操作需在高壓下運行,但因萃取溶劑是“氣體”,操作中可以方便地改變其壓力和溫度,還可改變超臨界流體的組成,因此能自由地改變它對物質(zhì)的溶解能力。它無毒,無腐蝕性,不可燃燒,純度高且價格低。 2021328 29 ? 將 1≤Tr≤, 1< pr< 5的區(qū) 域作為 SCCO2 的工作區(qū)。因此,對動物或植物組織中有效成分進行萃取時,具有相當高的質(zhì)量傳遞速率。這使得 SCCO2萃取有可能在相對較短的時間內(nèi)完成。 2021328 34 SCCO2萃取流程 ? SCCO2萃取基本工藝流程 ? 超臨界萃取工藝過程主要由萃取釜和分離釜二部分組成,并適當配合壓縮裝置和熱交換設備所構成。 圖 227 萘在超臨界 CO2 中溶解度等壓線圖 2021328 37 ? 對比等溫、等壓和吸附 3種基本流程的能耗可見,吸附法理論上不需壓縮能耗和熱交換能耗,應是最省能的過程。 ? 通常超臨界 CO2萃取過程大多采用改變壓力的等溫法流程。為此,人們開發(fā)了 SFE與其他分離手段的聯(lián)用工藝技術。 ? 通過這種聯(lián)用技術,可大大提高分離效率,如在魚油精制中,采用該技術可得二十碳五烯酸( EPA)和二十二碳六烯酸( DHA)純度達到 90%以上的產(chǎn)品。 ③ 超臨界萃取與色譜分離聯(lián)用 ? 如從向日葵種子中提取維生素 E時同硅膠吸附柱聯(lián)用; ? 從美麗豬屎豆種子中萃取單豬屎豆堿時同離子交換柱聯(lián)用。 ①萃取過程可以連續(xù)操作 ②實現(xiàn)萃取過程和精餾過程一體化,可以連續(xù)獲得高純度和高附加值的產(chǎn)品。 ? 自 1978年德國 HAG公司第一套超臨界 CO2萃取咖啡因工業(yè)化裝置問世以來,世界各國紛紛推出各具特色的實用化裝置,萃取釜規(guī)模從 200L到 7m3不等,主要以食品工業(yè)的應用為主。液體 CO2和 SCCO2抽提的酒花萃取物顏色為微欖綠,在 20~ 25MPa, 40℃ 萃取 4h, 浸膏得率可 14%, α酸提取率近 99%,硬樹脂萃取率僅為 %,而且不萃取農(nóng)藥,芳香成分不氧化。根據(jù)目前的工作, SCCO2作為酶催化反應的介質(zhì)有以下優(yōu)點: 2021328 54 ①脂溶性底物和產(chǎn)物可溶于 SCCO2中,酶蛋白不溶解,有利于三者的分離。 ? 目前研究的有酯化反應、酯水解反應等。 SCCO2的以下一些性質(zhì)有利于細胞破碎: ①在近臨界點, SCCO2的微小壓力變化導致其體積變化很大,其能量變化很大,所以 SCCO2可破壞較厚的細胞壁,如常見的酵母等。
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