酵母rna的提取及組份鑒定與核酸的定量測定-預(yù)覽頁
【正文】 目的要求 ?（１）了解并掌握稀堿法提取 RNA的原理和方法。 實驗原理 ? 由于 RNA的來源和種類很多，因而提取制備方法也很各異。向水層加入乙醇后， RNA即以白色絮狀沉淀析出，此法能較好的除去 DNA和蛋白質(zhì)。稀堿法使用稀堿使酵母細(xì)胞裂解，然后用酸中和，除去蛋白質(zhì)和菌體后的上清液用乙醇沉淀 RNA或調(diào) 。 實驗原理 ? 核酸及其衍生物，核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收 UV的性質(zhì)，其吸收高峰在 260nm波長處。該法操作簡便，迅速，并對被測樣品無損，用量也少。若樣品內(nèi)混在有大量的蛋白質(zhì)和核苷酸等吸收紫外光的物質(zhì)，應(yīng)設(shè)法先除去。 ? 鉬酸銨－過氯酸沉淀劑：取 70%過氯酸和 ，即成 %鉬酸銨－ %過氯酸溶液。 操作方法 ? 一、酵母 RNA提取 ? 稱 5g干酵母粉懸浮于 30mL NaOH溶液中并在研缽中研磨均勻。棄去上清液。 ? 1．嘌呤堿：取水解液 1mL 加入過量濃氨水。注意觀察核糖是否變成綠色。 ? 2．取兩支離心管，甲管加入 2mL樣品溶液和 2mL蒸餾水，乙管加入 2mL樣品溶液和 2mL沉淀劑。選擇厚度為 1cm的石英比色杯，在 260nm波長處測定 A值
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