【正文】 級(jí)種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)。種子培養(yǎng)基的成分基 本與發(fā)酵培養(yǎng)基近似，培養(yǎng) 30℃ 、 30 小時(shí)左右培養(yǎng)液趨于濃厚并轉(zhuǎn)為黃色。生產(chǎn)用的孢子需經(jīng)過(guò)純種和生產(chǎn)能力的檢驗(yàn)，符合規(guī)定的才能用來(lái)制備種子。在此環(huán)境中，微生物的生長(zhǎng)和代謝都暫時(shí)停止，不易發(fā)生變異，故可長(zhǎng)時(shí)間保存，一般為 5～ 10 年，最多可達(dá) 15 年之久。該法既可防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā)，又能使菌種與空氣隔絕。若把砂土管放在低溫或抽氣后密封，效果更佳。 斜面菌 種低溫保藏法：利用低溫對(duì)微生物生命活動(dòng)有抑制作用的原理進(jìn)行保藏。 土霉素的生產(chǎn) 土霉素通常由龜裂鏈絲菌 (streptomyces rimosus)發(fā)酵得到，目前國(guó)內(nèi)提取工藝一般以草酸 (或部分鹽酸替代草酸 )作酸化劑調(diào)節(jié)發(fā)酵液 pH 值，利用黃血鹽鈉和硫酸鋅作凈化劑生成普魯士藍(lán)沉淀協(xié)同去除 Fe3+及高分子雜質(zhì)，再 經(jīng) 1222 樹(shù)脂脫色，調(diào)節(jié) pH 至 晶得干燥到土霉素成品 [1]。臨床上主要用于肺炎、敗血癥、斑疹、傷寒了、淋巴肉芽腫、砂巖及其他細(xì)菌性感染等，對(duì)傷 寒有效，也可用于阿米巴痢疾和陰道滴蟲(chóng)病患者。 土霉素為四環(huán)類(lèi)抗生素，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單、生產(chǎn)成本較低，可作為生產(chǎn)其它新型抗生素的原料?？墒箘?dòng)物腸壁變薄，更有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)設(shè)計(jì)說(shuō)明書(shū) 2 吸收和利用，從而提高腸道吸收效率。土霉素的鹽酸鹽為黃色結(jié)晶，味苦，熔點(diǎn) 190～ 194℃ ，有吸濕性，但水分和光線不影響其效價(jià)，在室溫下長(zhǎng)期保存不變質(zhì)，不失效。內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)設(shè)計(jì)說(shuō)明書(shū) 1 第一章 緒 論 引言 目前，全世界的醫(yī)藥產(chǎn)品生產(chǎn)已有一半以上由生物技術(shù)合成，其中，抗生素、維生素、激素這三大類(lèi)藥物主要由微生物發(fā)酵生產(chǎn)?；瘜W(xué)式如下： 本品為灰白色至黃色的結(jié)晶粉末，無(wú)臭，味苦，熔點(diǎn)是 180℃ ，在空氣中性質(zhì)穩(wěn)定，在日光下顏色變暗在堿性溶液中易破壞失效。 作用機(jī)理 本品為廣譜抑菌劑，能特異性地與細(xì)菌核糖體 30S 亞基的 A 位置結(jié)合，抑制肽鏈的增長(zhǎng)和影響細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，能抑制動(dòng)物腸道內(nèi)的有害微生物，激活大腸中有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)合成的微生物。其他如放線菌屬、炭疽桿菌、單核細(xì)胞增多性李斯特菌、梭狀芽孢桿菌、奴卡菌屬、弧菌、布魯菌屬、彎曲桿菌、耶爾森菌等對(duì)本品敏感。 土霉素對(duì)多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌 (如肺炎球菌，溶血性鏈球菌，草綠色鏈球菌以及部分葡萄糖球菌，炭疽桿菌 )和革蘭氏陰性菌 (如大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌，破傷風(fēng)，肺炎桿菌，流感桿菌，百日咳桿菌等 )均有抗菌作用。目前，土霉素已經(jīng)極少用于臨床了。 第二章 工藝流程設(shè)計(jì) 土霉素發(fā)酵工藝流程 菌種的保藏 菌種的保藏方法有：斜面菌種低溫保藏法、砂土管保藏法、甘油封藏法、真空冷凍干燥法。 砂土管保藏法：將干燥砂粒與細(xì)土混合后滅菌制成砂土管，然后接種保藏。 甘油封藏法：向培養(yǎng)好的菌種斜面上，加入滅菌甘油，高出斜面 1cm，然后蠟封管口，放入冰箱。在低于 15℃ 下，快速將細(xì)胞凍結(jié)，并保持細(xì)胞完整，然后在真空中使水分升華致干?？股禺a(chǎn)量和成品質(zhì)量同菌種性能以及同孢子和種子的情況有密切關(guān)系。 種子制備 種子制備是指孢子接入種子罐后，在罐中繁殖成大量菌絲的過(guò)程，其目的是使孢子發(fā)芽、繁殖和獲得足夠數(shù)量的菌絲，以便接種到發(fā)酵罐當(dāng)中去。種子罐級(jí)數(shù)是在指制備種子需逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)的次數(shù)，一般根據(jù)種子的生長(zhǎng)特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度，以及發(fā)酵罐的容積而定。土霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基由碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及金屬離子、添加前體、消泡劑五部分組成。采用植物油消沫仍舊是個(gè)好方法，一方面作為消沫劑，另一方面還可以起到碳源作用，但現(xiàn)在已普遍采用泡敵代替豆油。 在土霉素的生產(chǎn)中，對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵罐主要采用的是濕熱蒸汽滅菌和空氣過(guò)濾除菌的方法。發(fā)酵周期一般為 194 小時(shí) 。在整個(gè)過(guò)程中，需要不斷通氣和攪拌，維持一定的罐溫和罐壓，并隔一段時(shí)間取樣進(jìn)行生化分析和無(wú)菌試驗(yàn)，觀察代謝變化、抗生素產(chǎn)生情況和有無(wú)雜菌污染。通常在考慮土霉素穩(wěn)定性和 成品質(zhì)量及成本的前提下， pH 控制在 ?，F(xiàn)多采用板框式過(guò)濾機(jī)。目前通常采用連續(xù)結(jié)晶法。土霉素生產(chǎn)車(chē)間發(fā)酵工段是土霉素生產(chǎn)的第一個(gè)環(huán)節(jié)，也是最重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。 根據(jù)結(jié)晶分離工段中總的質(zhì)量守恒，有公式 濕品損失離心離心堿化劑堿化劑脫后脫后 mmVVV ??????? ??? （ 34） 脫后? —— 脫色后液體的密度， Lkg ； 10 堿化劑V —— 堿化劑的體積， 3m ； 離心?—— 離心母液的密度， Lkg 。 根據(jù)土霉素效價(jià)平衡 凈化液凈化液酸化液酸化液 UVUV ??? （ 312） 已知數(shù)據(jù)： ?凈 稀 液 L ， ?凈 稀 液 mLg? ， 36000U ?酸 化 液 mLg? 將已知數(shù)據(jù)分別代上兩式，得： 31 29 5. 39VL?酸 化 液 43 10 3. 34?草 酸 水 酸化工段損失量 加入的草酸固體，可忽略體積。所以發(fā)酵罐選擇標(biāo)準(zhǔn)機(jī)械發(fā)酵罐，六彎葉渦輪式攪拌。 ④ 考慮其他專(zhuān)業(yè)對(duì)本車(chē)間布置的要求。 ⑨ 人流物流不能交錯(cuò)。 本車(chē)間屬于戊類(lèi)廠房，其中更衣室、變電間的局 部為丙類(lèi)，衛(wèi)生的等級(jí)屬 4 級(jí)。對(duì)發(fā)酵設(shè)備 進(jìn)行選型和計(jì)算，包括發(fā)酵設(shè)備的壁厚罐體的高度以及攪拌器的選擇，以此來(lái)繪制土霉素設(shè)備布置的平面和立面圖。 A boxer that only has front legs refuses to let his disability hold him back as he charges across a beach with his fourlegged ，他同其他四條腿的伙伴們一同在海灘上盡情狂奔。 He was born with deformed back legs, which were later removed to make the dog more fortable. Duncan 出生時(shí)，它的后肢就是畸形的，此后為了讓他舒服些 ,只能進(jìn)行截肢。We let him be free and just walk on his two legs. There is some slow motion in this video, but none of the video has been sped up, this gives you an idea of how fast Duncan really it,39。 The thrill of running through the surf was clear to see, as Duncan raced people and dogs across the sand, with his tail wagging excitedly. Duncan踏著浪花，在沙灘上同其他人及狗賽跑，還興奮地?fù)u著尾巴，他的喜悅之情顯而易見(jiàn)。, adding on charity39。主人們用 “騎兵 ”一詞來(lái)形容 Duncan，他們?cè)诮M織的 Facebook 中寫(xiě)道： “他很快樂(lè)，也很健康；而且在他自己看來(lái)，他是條正常的狗。s OK. He and we have just adapted.39。m fortunate to have realised those this day, one of my proudest achievements is captaining my country. I knew every time I wore the Three Lions shirt, I was not only following in a long line of great players, I was also representing every fan that cared passionately about their country. I am honoured to represent England both on and off the wouldn39。m starting a new adventure and I3