沉淀反應(yīng)與凝集反應(yīng)-預(yù)覽頁
【正文】 的沉淀反應(yīng) 免疫學及免疫學檢驗 第一節(jié) 液體內(nèi)沉淀試驗 根據(jù)沉淀現(xiàn)象的不同，液體內(nèi)沉淀又可分為三類： 絮狀沉淀 環(huán)狀沉淀 免疫濁度沉淀 免疫學及免疫學檢驗 一、絮狀沉淀試驗 絮狀沉淀試驗是一項經(jīng)典實驗技術(shù) 。 免疫學及免疫學檢驗 (二 ) 操作步驟 1. 抗原稀釋法 (1) 將可溶性抗原作一系列倍比稀釋 。 免疫學及免疫學檢驗 2. 抗體稀釋法 本法采用抗原量恒定與不同倍比稀釋度的抗體反應(yīng) ， 出現(xiàn)沉淀物最多的管為抗體最適比例管 。 用非常簡便的技術(shù)了解待測血清內(nèi)是否存在某種抗原或抗體 。 2. 將抗原溶液沿管壁緩緩疊加于抗血清液面上，形成清晰的交界面。故用于鑒定血跡和診斷炭疽 (Ascoli試驗 )。 70年代以來 ， 根據(jù)抗原和抗體所在液相內(nèi)快速結(jié)合并產(chǎn)生濁度的原理 ， 建立了免疫比濁法 。 用抗原標準品建立標準曲線 ， 可測出待檢抗原含量 。 從標準曲線可得待檢抗原量 。 又可分為速率散射比濁法 (rate nephelometry)和終點散射比濁法 (endpoint nephelometry)。峰值的高低在抗體過量情況下與抗原的量成正比 。 2) 將稀釋待檢抗原和不同濃度抗原標準品加至試管內(nèi) ， 再加入一定量抗體 ， 立即比濁 ， 記錄速率單位 (RU)。 免疫學及免疫學檢驗 2. 終點散射比濁法 (1) 原理： 讓抗原抗體作用一定時間 ， 使其反應(yīng)達到平衡后 ， 測定其復(fù)合物的量 。 3) 以抗原標準品量為橫坐標 ， 濁度值為縱坐標 ，繪制標準曲線 。 免疫學及免疫學檢驗 2. 操作步驟 1) 用稀釋液將待測抗原和抗原標準品稀釋 。 免疫學及免疫學檢驗 第二節(jié) 凝膠內(nèi)沉淀試驗 凝膠內(nèi)沉淀試驗 (gel phase precipitation)主要是指瓊脂糖擴散或稱凝膠擴散 (gel diffusion)。 免疫學及免疫學檢驗 一、單相瓊脂擴散試驗 (一 ) 原理 將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中 ， 使待測的抗原物質(zhì)在凝膠中自由擴散 ， 與抗體結(jié)合形成沉淀環(huán) ， 沉淀環(huán)的大小與抗原濃度呈正相關(guān) 。 免疫學及免疫學檢驗 單向免疫擴散試驗示意圖 免疫學及免疫學檢驗 沉淀環(huán)的直徑與待檢標本內(nèi)含量不是直線關(guān)系 ， 有兩種計算方法： (1) Mancini曲線：適用于大分子抗原 ， 擴散時間 48h， 使用普通坐標紙作圖 ， 擴散環(huán)直徑平方和濃度呈線性關(guān)系 。 免疫學及免疫學檢驗 雙向免疫擴散試驗示意圖 免疫學及免疫學檢驗 第三節(jié) 免疫電泳技術(shù) 免疫電泳技術(shù)是電泳分析與沉淀反應(yīng)的結(jié)合產(chǎn)物。然后在適當?shù)奈恢蒙涎仉娪痉较蛲谝恢本€形槽，于槽內(nèi)加入含有針對各種抗原混合抗體液，讓各抗原成分與相應(yīng)抗體進行雙向免疫擴散，可形成多條弧形沉淀線。只需 1小時左右即可觀察結(jié)果。隨著泳動抗原的減少，沉淀逐漸減少，形成峰狀的沉淀區(qū)，狀似火箭。 1900年， Landsteriner在特異性血凝現(xiàn)象的 基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了人 ABO血型，并于1930年獲得了諾貝爾獎。 免疫學及免疫學檢驗 玻片法： ABO血型的鑒定 試管法： 肥達試驗（ Widal test） 傷寒 外斐試驗（ WeilFelix test） 立克次體 免疫學及免疫學檢驗 二）間接凝集反應(yīng) 將可溶性抗原（或抗體）先吸附于適當大小的顆粒性載體的表面，然后與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜的電解質(zhì)存在的條 件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象，稱間接凝集反應(yīng)（ indirectagglutination）或被動凝集反應(yīng)（ passiveagglutination）。 免疫學及免疫學檢驗 在間接凝集反應(yīng)中，可用作載體的顆粒種類 很多，常用的有動物或人紅細胞、細菌和多 種惰性顆粒如聚苯乙烯
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