【正文】 外，視網(wǎng)膜等部位也有分布。 鋅劑的毒性較小，但體內(nèi)鋅量過大也可引起惡心、嘔吐、胃部不適、急性腹痛、腹瀉等消化道刺激癥狀，甚至脫水和電解質(zhì)紊亂。分光光度法由于操作簡便、快速且儀器價格較低，是測定微量鋅的常用方法。鋅與雙硫腙的反應(yīng)較為靈敏，最大吸收波長為535nm，摩爾吸光系數(shù)為 104L/mol何斌利用鋅 —雙硫 腙 十六烷基三甲 溴 化 銨 體系，也對雙硫腙水相直接光度法進行了探討，并成功地用于水中鋅的測定。 cm。應(yīng)用于人發(fā)和小麥中微 量鋅的測定，結(jié)果與原子吸收光譜法相符。蔣華江等合成了 1(2，3， 5三氮唑偶氮 )2萘酚 ，并研究了在存在 TritoX100 的條件下與鋅的顯色反應(yīng)。 （ 4）三氮烯類顯色劑 三氮烯類試劑是測定金屬元素的靈敏顯色劑。用于直接測定食品包裝材料中的鋅，并與原子吸收光譜法對照，結(jié)果滿意。 cm，是目前光度法測定鋅的最靈敏方法之一。 總之，近幾年來關(guān)于鋅的測定方法很多，而且不同的分析方法有各自不同的優(yōu)點。 3 方案論證 萃取技術(shù)在分離領(lǐng)域有著悠久的歷史和豐富的內(nèi)涵，液 液萃取更以其操作簡便、處理量大、設(shè)備簡單、投資小的優(yōu)點在精細化學(xué)品、生物、制藥、食品、稀有金屬分析等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。投資小、以水為溶劑、無有機溶劑殘留、過程易于放大等優(yōu)點 [2]在基因工程 [3]、天然藥物化學(xué)成分的萃取 [4]、生物制藥 [4]、食品生產(chǎn) [5]等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。 雙水相體系的形成 雙水相萃取技術(shù)是隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展而發(fā)展起來的新型分離技術(shù)。 1896 年，荷蘭微生物學(xué)家 Beijerinck[6]發(fā)現(xiàn)當(dāng)明膠與瓊脂在一定濃度范圍內(nèi)相混合時，得到一個不透明的溶液，隨即分成兩相，上相含有大部分的明膠，下相含有大部分的瓊脂。 此外，某些聚合物溶液與一些無機鹽等低相對分 子量化合物的溶液相混合時，只要濃度達到一定值，體系也會形成兩相。兩種物質(zhì)混合時熵的增加與分子數(shù)有關(guān)，根據(jù)熱力學(xué)第二定律可知，組分間混合是熵增加的過程，因 而可自發(fā)進行。 雙水相體系的種類 目前已有的雙水相體系根據(jù)成相物質(zhì)的不同可分為以下類型 (見表 1)。但隨著高聚物 無機鹽、低分子量的某 些表面活性劑之間，以及很多普通有機物和無機鹽之間的新型 ATPS 被不斷開發(fā)出來，這種觀點的傳統(tǒng)地位受到了挑戰(zhàn)。系線上的各點上下相的組成相同，而體積不同，上下相的體積比近似服從杠桿規(guī)則，即 其中， tV 和 bV 分別為上相和下相體積 ， tA 和 bA 分別為 A 點與 B 點和 A 點與 T點之間的距離。但是，如 果相比過大或過小，在提高被分配物質(zhì)回收率的同時也將降低其純度，影響提純效果，因此在應(yīng)用過程中需綜合考慮回收率與純化效果間的相互關(guān)系，以保證體系萃取效率的最優(yōu)化。該技術(shù)一出現(xiàn)，就被認為是生物產(chǎn)品分離和提純的一個有效方法 。但雙水相萃取技術(shù)從原則上講與一般溶劑萃取有許多共同之處。借此就可以利用雙水相體系進行物質(zhì)的分離。然而， 90 年代以來，研究結(jié)果表明 ： 用雙水相萃取技術(shù)處理小分子也取得了較理想的效果，開拓了雙水相分配技術(shù)的新領(lǐng)域，也為分離金屬離子打下了堅實的基礎(chǔ)。假如物質(zhì)從下相轉(zhuǎn)移到上相的摩爾自由能變化為△ G，那么此分配系數(shù)也可以表示為 ： 自由能變化△ G 主要包含物質(zhì)與兩相間的界面能的變化和兩相的電位差，可表示為 ： 式中 ： γ pt— 物質(zhì)在上相的界面張力 γ pb— 物質(zhì)在下相的界面張力 A— 表示大分子或粒子的摩爾表面積 μ t、 μ o— 表示兩相電位 Z— 物質(zhì)所帶電荷 從上式可以看出，物質(zhì)的表面積和表面電荷、物質(zhì)在兩相的界面特征、電位差是影響物質(zhì)分配平衡的主要因素。目前還沒有定量的關(guān)聯(lián)模型能預(yù)測整個體系的分配關(guān)系，最佳的操作條件仍需要具體的實驗來完成得到。近 30 年來，各類用于計算生物物質(zhì)在雙水相系 統(tǒng)分配系數(shù)的模型時有報道，諸如 Baski： 晶體吸附模型 [22]、 Hayne 模型 [2324]、Grossman 自由體積模型 [25]、 Diamond 一 Hsu 模型 [26]等，其中 Diamond 一 Hsu 模型既可計算聚合物 /聚合物雙水相系統(tǒng)中低分子量膚的分配系數(shù)，又能計算高分子量蛋白質(zhì)的分配系數(shù)，有一定的普適性。 39。與一些傳統(tǒng)的分離方法相比，雙水相萃取技術(shù)具有以下獨有的特點 [21]： （ 1） 雙水相體系所形成的兩相大部分都是水，水含量一般高達 70%~90%。與普通的有機溶劑萃取相比，形成雙水相的物質(zhì)對人體無害，可用于食品添加劑、注射劑和制藥中，是一種環(huán)境友好型萃取分離體系。 （ 6） 高聚物的濃度、無機鹽的種類和濃度，以及體系的 PH 值等因素都對被萃取物質(zhì)在兩相間的分配產(chǎn)生影響，因此可以采用多種手段來提高選擇性和回收率。39。至今，它已發(fā)展成為一種專用于生物產(chǎn)品分離的雙水相技術(shù)。張春秀等 [34]研究了 PEG1500/磷酸鹽雙水相體系對銀杏葉浸取液中的黃酮類物質(zhì)的萃取，萃取效率達 %。雙水相萃取技術(shù)對于金屬離子的萃取分離多用于一些常見金屬離子和稀有貴金屬的分離。因此，雙水相萃取作為一種新型的分離技術(shù)應(yīng)用于金屬離子的萃取分離方面具有良好的發(fā)展前景。雙水相體系中金屬離子的萃取分離的其他研究情況見表 4。分光光度法是測定金屬離子常用的方法。 ε = cm； 表觀摩爾吸光系數(shù)ε 550 = 104L/mol 表 5 雙水相萃取光度法測定金屬離子 Tablel 5 Eextraetion spectrophotometrie determination of metal iron in aqueous twoPhase system 萃取劑 成相組分 被測離子 波長（ nm） ε104 鋅試劑 PEG/硫酸銨 Ga(III) 630 方案論證 茜素 S 偶氮砷 Ⅲ 亞硝基 R 鹽 偶氮砷 Ⅲ 亞硝基 R 鹽 鄰苯二酚紫 鉻黑 T 鋅試劑 5BrPADAP 鄰二氮菲 茜素 S 鉻黑 T 結(jié)晶紫 PAR 鋁試劑 PEG/硫酸銨 PEG/硫酸銨 聚乙烯醇 /硫酸鈉 PEG/硫酸銨 PEG/硫酸銨 PEG/硫酸鈉 PEG/硫酸鈉 聚乙二醇 乙醇 /硫酸銨 丙醇 /硫酸銨 PEG/硫酸銨 PEG/硫酸鈉 PEG/硫酸銨 PEG/硫酸銨 PEG/硫酸銨 Al(III) Cu(II) U(VI) Co(II) Zr(VI) Pd(II) Be(II) Cu(II) Hg(II) Ru(III) Fe(III) Fe(III) Mn(II) Re(VII) Pd(II) La(III) 520 530 655 418 660 500 591 560 610 545 508 580 539 636 525 480 3 4 由于傳統(tǒng)的萃取方法存在著運行成本高、溶劑污染環(huán)境，對人體 有害等缺點，而雙水相體系與傳統(tǒng)的有機溶劑萃取有很大的不同，具有其獨特的優(yōu)點，能夠從根本上解決以上問題，這是傳統(tǒng)的溶劑萃取法所不能比擬的。相信隨著研究的深入，雙水相萃取技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域?qū)⑦M一步的拓寬，從而成為一種優(yōu)良的萃取技術(shù)。對這方面進一步的研究，需要有直接從微觀入手的分析技術(shù)，以及建立雙水相體系中金屬離子萃取分離過程的熱力學(xué)和動力學(xué)模型。在萃取過程中，它們的用量都很大，若能將其回收和循環(huán)利用，不僅可以減少處理廢品的費用，而且能節(jié)省物料的消耗，降低萃取分離工藝成本。目前這方面的研究主要有 ： 雙水相萃取技術(shù)與層析分離技術(shù)、電泳技術(shù)、膜分離技術(shù)等相結(jié)合。綜上所述，雙水相萃取技術(shù)經(jīng)過幾十年的發(fā)展，己經(jīng)在很多領(lǐng)域發(fā)揮了巨大的作用，并具有良好的應(yīng)用前景。用時稀釋制得 1μ g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液 ； H2BO3Na2B4O7： 緩沖溶液 ： 先配制 ，混合制得不同 pH 值的緩沖溶液 ； 300g/L 聚乙二醇 (PEG)2020 溶液 ： 準(zhǔn)確稱取 150g 聚乙二醇 2020，放入 300mL的燒杯中加入少量水后加熱溶解，然后轉(zhuǎn)入 500mL 容量瓶中并定容至刻度，搖勻 ； 混合掩蔽劑 ： 稱取 2g 氟化鈉、 2g酒石酸鉀鈉和 1g 硫脈，放入 100mL 的燒杯中并用水溶解，然后轉(zhuǎn)入 100mL 容量瓶并加水定容至刻度，搖勻，放置于冰箱中保存 。待十分鐘，兩相之間的界面膜清晰后，用滴管移取 PEG 相萃取液。 PEG 溶液用量的選擇 當(dāng)硫酸鈉用量為 、 、 的緩沖 溶液用量為 和 lμ g/mL 的 Zn2+標(biāo)準(zhǔn)溶液為 時，在 0~ 的范圍內(nèi)改變 PEG溶液的用量，考察雙水相的形成及配合物的萃取情況。但由于銨根離子在該體系中影響鋅的測定。綜合考慮，硫酸鈉的用量選擇 表 8 硫酸鈉用量的影響 Table 8 Effect of amounts of sodium sulfate added 硫酸鈉用量 1 吸光度 4 5 6 7P E G 溶液用量（m L ）A實驗部分 0 1 硫酸鈉用量 ( g )A 圖 3 硫酸鈉用量的影響 Fig. 3 Effect of amounts of sodium sulfate added 酸度的選擇 當(dāng) 300g/LPEG 溶液用量為 、硫酸鈉用量為 、 為 和μ g/mL 的 Zn2+標(biāo)準(zhǔn)溶液為 時，分別試驗了 、 、 的H2BO3Na2B4O7：緩沖溶液及用量在 0~ 范圍內(nèi)的影響。 表 9 酸度的影響 Table 9 Effect of amounts of the acidity 緩沖液加入量 0.05 吸光度 0 實驗部分 圖 4 酸度的影響 Effect of amounts of the acidity 鋅試劑用量的影響 當(dāng) 300g/LPEG 溶液用量為 、硫酸鈉用量為 、 的緩沖溶液用量為 和μ g/mL 的 Zn2+標(biāo)準(zhǔn)溶液為 時，考察鋅試劑的用量在。 表 10 Table 10 鋅試劑的用量 吸光度 0． 000 00 緩沖液加入量 ( mL )A分光光度法測定痕量鋅的方法研究進展 0 鋅試劑用量（m L ）A 圖 5 鋅試劑用量的影響 Fig. 5 Effect of amounts of zineon solution 配合物穩(wěn)定性及組成 當(dāng) 300g/LPEG 溶液用量為 、硫酸鈉用量為 、 為 和 pH 值為 時，按實驗方法制備溶液，待分層后取 PEG 相并每隔 3min測定其吸光度。本實驗中采用了試驗選定的條件：當(dāng) 300g/LPEG 溶液用量為 、硫酸鈉用量為 、 的緩沖溶液用量為 和μ g/mL 的 Zn2+標(biāo)準(zhǔn)溶液為 時，用光度法來確定 PEG 相中鋅 (Ⅱ )鋅試劑所形成的 二元配合物的組成。 表 12 等摩爾連續(xù)變化法測定配合物的組成 Table12 Determination of position of plex using the method of equivalent molarity Zn A 分光光度法測定痕量鋅的方法研究進展 00 1Z n 與總摩爾濃度的比值A(chǔ) 圖 7 等摩爾連續(xù)變化法測定配合物的組成 Fig. 7 Determination of position of plex using the method of equivalent molarity (2)利用摩爾比法來確定 PEG 相中 鋅 (Ⅱ )鋅試劑 所形成絡(luò)合物的組成 當(dāng)加入的鋅 (Ⅱ )量相對于鋅試劑量較 小時，溶液中鋅試劑處于過量，所加入的鋅 (Ⅱ )全部轉(zhuǎn)化為絡(luò)合物，溶液的吸光度與金屬離子和配位試劑的摩爾比值呈直線關(guān)系；而當(dāng)鋅 (Ⅱ )加入量超過了配位試劑的絡(luò)合能力時，鋅 (Ⅱ )濃度繼續(xù)增大，吸光度也不再有顯著增加。 線性范圍 配制一系列 Zn2+標(biāo)準(zhǔn)溶液，按實驗方法，在選定的實驗條件下，測定 PEG 中配合物的吸光度。 cm)。 7 樣品的測定 Z n 濃度m g / L吸光度A結(jié)論 8 結(jié)論 本論文對雙水相萃取與分光光度法的聯(lián)用以及相應(yīng)的分析方法進行了研究。探討了共存物質(zhì)對 Zn2+萃取測定的影響及消除