【正文】 分枝桿菌復(fù)合群菌種 間 的 鑒 定）? GenoType原理：基于 PCR擴(kuò)增的檢測(cè)方法。guǒ)分析儀器特點(diǎn)：，每隔 6秒測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物的濁度． (kěyǐ)設(shè)定相應(yīng)的反應(yīng)條件與檢測(cè)要求．．基因 組 DNA反 應(yīng) 條件 :n第四十 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。毫微微克 /毫升 快速 ng) 陽(yáng)性 (y225。LAMP去除核酸 擴(kuò) 增抑制因子216。實(shí)驗(yàn) 周期短 (幾乎一個(gè) (yī(PURE)LAMP 方法 (fāngfǎ)PURE 方法 (fāngfǎ)216。for? 利用 Bst酶的鏈置換功能進(jìn)行反應(yīng)。fēn)高，反應(yīng)靈敏。isothermal（ ）環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增基因 (jīyīn)檢測(cè) 同時(shí)工作效率大大提高。 sh237。)循環(huán)，在靶ＤＮＡ擴(kuò)增的同時(shí)可獲得定量的結(jié)果 .即在同一個(gè) (yī ɡ232。)熒光定量 PCR PCR是一種根據(jù)脫氧核糖核酸（ DNA）復(fù)制原理而設(shè)計(jì) (sh232。n)技術(shù)? GeneXpert MTB/RIF 快速診斷技術(shù)第三十四 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。i)分子生物學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)? 引入現(xiàn)代免疫學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)第三十三 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。 假陰性（ FN） 1）觀察玻片的視野數(shù)量不足2）鏡檢技術(shù)能力差3）染色操作不規(guī)范（抗酸桿菌顏色暗淡、背景對(duì)比不足或過(guò)高）4）顯微鏡存在問(wèn)題5）染液質(zhì)量差 3）對(duì)技術(shù)人員復(fù)訓(xùn)4）現(xiàn)場(chǎng)檢查顯微鏡工作狀態(tài)5）重新購(gòu)置質(zhì)量合格的染料并重新配制染液 量化誤差（ QE） 1）觀察玻片視野數(shù)量不足2）陽(yáng)性玻片的分級(jí)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)掌握差3）鏡檢技術(shù)能力差4）顯微鏡存在問(wèn)題 ）對(duì)技術(shù)人員復(fù)訓(xùn)4）現(xiàn)場(chǎng)檢查顯微鏡工作狀態(tài) 第三十二 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。常見(jiàn) (ch225。ng)和低假陰性v 量化誤差（ Quantification Error ， QE）：同一張陽(yáng)性玻片初檢者和復(fù)檢者陽(yáng)性判斷級(jí)別的差異。? 高假陰性（ High False Negative HFN）： 2＋以上的陽(yáng)性玻片被錯(cuò)誤地判讀為陰性。第二十九 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。第二十八 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。b、上一年陰性玻片總數(shù)：每年玻片的總數(shù)減去全年陽(yáng)性玻片數(shù)。復(fù)檢樣本量計(jì)算 (j236。第二十六 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。復(fù)檢玻片樣本量：盲法復(fù)檢的關(guān)鍵是復(fù)檢結(jié)果能否真正代表 (d224。ih249。涂片 (ty224。tǒng) — 室內(nèi)質(zhì)控171。) — 直接涂片法缺點(diǎn)：? 敏感性低：通常每毫升含 500010000條以上抗酸菌才可得到陽(yáng)性結(jié)果；? 特異性較低：只能 (zhī n233。 j237。第二十一 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。)：? 0條 /300視野： 萋 尼氏抗酸桿菌陰性? 18條 /300視野：實(shí)報(bào)菌數(shù)? 39條 /100視野：萋 尼氏抗酸桿菌陽(yáng)性（ +）? 19條 /10視野： 萋 尼氏抗酸桿菌陽(yáng)性（ 2+）? 19條 /1視野： 萋 尼氏抗酸桿菌陽(yáng)性（ 3+）? ?10條 /1視野： 萋 尼氏抗酸桿菌陽(yáng)性（ 4+）第二十 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。ngx236。? 痰涂片 (t（二）仔細(xì)觀察 300以上的視野。（三）將染色后的玻片放置在報(bào)紙上，如果透過(guò)痰膜不能分辨報(bào)紙上的文字，則表明該玻片涂抹過(guò)厚，或染色過(guò)程有誤。染色染色 (rǎns232。（三）載玻片只允許一次性使用，嚴(yán)禁清洗后重復(fù)用于 AFB檢查。)流程涂痰膜自然干燥復(fù)紅加熱初染5分鐘自然干燥鏡檢流水沖洗美蘭復(fù)染30秒鹽酸酒精脫色流水沖洗流水沖洗第十四 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。jiē)痰涂片檢查法 同時(shí)，也可以叩擊前胸，或由家屬協(xié)助叩擊后背胸壁。 停止咳嗽后，收縮腹肌將剩余的氣體盡量呼盡。? 正確的咳痰方法： 咳嗽前應(yīng)緩慢地深吸氣，吸氣后稍屏氣片刻。 送檢痰標(biāo)本的質(zhì)量直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。如何 (rng)。第十 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。k容器上應(yīng)注明與檢驗(yàn)單一致的病人 (b236。)的熟練程度和標(biāo)準(zhǔn)化? 對(duì)結(jié)果的理解第九 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。 pi224。n)操作誤差 標(biāo)本性狀 標(biāo)本來(lái)源? 對(duì)結(jié)果的理解差異可影響檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)臨床治療的參考或指導(dǎo)意義。細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)存在 (cngy224。第五 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。結(jié)核 (ji233。分類(lèi) (fēn l232。)結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)化的必要性? 全球結(jié)核病控制 (k242。結(jié)核病細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)核病細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化與新診斷與新診斷 (zhěndu224。nghu224。第三 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。第四 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。q抗酸性是分枝桿菌的重要特征。o)作用? 細(xì)菌學(xué)檢查是結(jié)核病最客觀、最科學(xué)和最重要 (zh242。第六 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。r233。n)技術(shù)技術(shù)痰涂片、痰涂片 (t)、鏡檢技術(shù)? 標(biāo)本的收集，特別是痰標(biāo)本的采集、保存? 制片和染色過(guò)程的標(biāo)準(zhǔn)化? 讀片操作 (cāozu242。k難以獲得合格標(biāo)本時(shí)，也應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查，但應(yīng)注明標(biāo)本性狀，以供分析結(jié)果時(shí)參考。k不能及時(shí)檢驗(yàn)的痰標(biāo)本應(yīng)置 4C冰箱保存，k如需轉(zhuǎn)運(yùn)，外送前要認(rèn)真核對(duì)檢驗(yàn)單與痰瓶上標(biāo)注，放在專(zhuān)用的轉(zhuǎn)運(yùn)箱內(nèi)運(yùn)送。nx237。第十一 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。如果痰中帶有結(jié)核菌說(shuō)明您患有肺結(jié)核，具有傳染性，應(yīng)該及時(shí)遵醫(yī)囑治療。每個(gè)痰盒應(yīng)分別留取 1～ 2口痰，請(qǐng)不要將 1口痰分開(kāi)放到 2或 3個(gè)痰盒中。一次深吸氣，可連續(xù)咳嗽三聲。在這一過(guò)程中，要注意動(dòng)作的連貫性，一氣呵成。直接 (zh237。) — 直接涂片法操作 (cāozu242。nɡ)涂抹 1份痰標(biāo)本。 第十五 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。（二）染色后的痰膜應(yīng)呈均勻亮藍(lán)色，無(wú)紅色斑塊。（一）為防止抗酸桿菌的交叉污染，嚴(yán)禁油鏡頭直接接觸玻片上的痰膜。鏡檢讀片第十七 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。? 查痰次數(shù)與陽(yáng)性 (y225。) — 直接涂片法顯微鏡檢報(bào)告方式 (fāngsh236。n)標(biāo)本，玻片一次性使用，防止交叉污染；? 打開(kāi)痰盒、涂抹痰膜時(shí)容易產(chǎn)生氣溶膠，應(yīng)注意正確操作和自身防護(hù)；? 石炭酸復(fù)紅初染時(shí)必須加溫。? 是發(fā)現(xiàn)和確定傳染源的重要途徑，是考核和評(píng)價(jià)療效的重要指標(biāo)，有重要的流行病學(xué)意義；? 操作簡(jiǎn)便，價(jià)格低廉，適于各級(jí) (ɡ232。細(xì)菌學(xué)常規(guī)檢查 (jiǎnch225。涂片鏡檢質(zhì)量保證系統(tǒng) (x236。 復(fù)查方式：– 自查：試驗(yàn) (sh236。第二十四 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。? 現(xiàn)場(chǎng)督導(dǎo)：質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室人員赴被質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室就實(shí)驗(yàn)室布局、安全防護(hù)、污染物處理、涂片染色操作、顯微鏡維護(hù) (w233。第二十五 頁(yè) ，共七十四 頁(yè) 。ibiǎo)被評(píng)估實(shí)驗(yàn)室的總體水平。n)表上一年陰性玻片的總數(shù) 玻片陽(yáng)性率% % % % % % %300 185 129 101 80 67 59