【正文】 。 Ⅲ．脫色工程菌的構(gòu)建 將分別含有降解偶氮染料質(zhì)粒的偏號(hào)Kx和Kd兩株假單胞菌通過(guò)質(zhì)粒轉(zhuǎn)移技術(shù)培育出兼有分解兩種偶氮染料功能的脫色工程 菌。li224。chu225。,在特殊培養(yǎng)基上（如含有(h225。ng)的方法,遺傳工程方法(fāngfǎ)包括兩個(gè)水平的研究：一種是細(xì)胞水平；另一種是基因水平。,57,第五十七頁(yè)，共八十一頁(yè)。nɡ zǔ)—遺傳工程,遺傳工程是70年代初發(fā)展起來(lái)的生物技術(shù)。（20世紀(jì)70年代）,能進(jìn)行原生質(zhì)體融合的細(xì)胞(x236。ngh233。ch233。,b. 局部轉(zhuǎn)導(dǎo)(specialized transduction) 由部分缺陷(quēxi224。,53,第五十三頁(yè)，共八十一頁(yè)。 通過(guò)接合而獲得新性狀的受體細(xì)胞就是接合子（conjugant） 特點(diǎn)：細(xì)胞接觸,51,第五十一頁(yè)，共八十一頁(yè)。,50,第五十頁(yè)，共八十一頁(yè)。jūn)有性生殖,大腸桿菌的接合是通過(guò)性纖毛（中空）進(jìn)行的。r225。另外，可利用霉菌的原生質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)化。)桿菌屬）、Bacillus、Neisseria（奈瑟氏球菌屬）、Rhizobium（根瘤菌屬）、Staphylococcus、Pseudomonas和Xanthomonas中多見(jiàn)。 方法： ①CaCl2處理細(xì)胞，使其成為能攝取外源DNA的感受態(tài)狀態(tài). ②電穿孔法electroporation：用高壓脈沖電流擊破細(xì)胞膜，或擊成小孔，使各種大分子（包括DNA ）能通過(guò)這些小孔進(jìn)入細(xì)胞。,47,第四十七頁(yè)，共八十一頁(yè)。 特點(diǎn)：無(wú)需細(xì)胞接觸。,定義：受體菌自然或在人工技術(shù)作用下直接攝取來(lái)自供體菌的游離DNA片段(pi224。試驗(yàn)方法如下：,目前發(fā)現(xiàn)自然(z236。y224。)了供體細(xì)菌的部分遺傳性狀—“轉(zhuǎn)運(yùn)同化” 轉(zhuǎn)化現(xiàn)象是1928年英國(guó)的細(xì)菌學(xué)家格里菲斯首先發(fā)現(xiàn)的,，被命名為格里菲斯實(shí)驗(yàn)（證明DNA是生命遺傳物質(zhì)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)之一）。,Ⅰ.轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。,作用：重組可使生物體在未發(fā)生突變的情況下，也能產(chǎn)生(chǎnshēng)新遺傳型的個(gè)體。,自發(fā)突變(tūbi224。 fen)缺失或重復(fù)時(shí)，其結(jié)果可造成基因的減少或增加； 如發(fā)生倒位或易位時(shí)，則可造成基因排列順序的改變，但數(shù)目卻不改變。,★染色體結(jié)構(gòu)(ji233。n)（chromosomal aberration）,某些理化因子，如X射線(xiàn)等的輻射及烷化劑、亞硝酸等，除了能引起點(diǎn)突變外，還會(huì)引起DNA的大損傷（macrolesion）——染色體畸變，它包括： 染色體結(jié)構(gòu)上的變化： 缺失(quē shī)（deletion） 重復(fù)（duplication） 易位（translocation） 倒位（inversion） 染色體數(shù)目的變化,38,第三十八頁(yè)，共八十一頁(yè)。與染色體畸變相比，移碼突變也只能算是DNA分子的微小損傷(sǔnshāng)。,36,第三十六頁(yè)，共八十一頁(yè)。 分類(lèi)：轉(zhuǎn)換（transition），即DNA鏈中的一個(gè)嘌呤被另一個(gè)嘌呤或是一個(gè)嘧啶被另一個(gè)嘧啶所置換； 顛換（transversion），即一個(gè)嘌呤被一個(gè)嘧啶,或是一個(gè)嘧啶被一個(gè)嘌呤所置換。)：一個(gè)或數(shù)個(gè)堿基發(fā)生變化,35,第三十五頁(yè)，共八十一頁(yè)。ufā)的，誘變又可分為點(diǎn)突變和畸變。 可逆性：從原始的野生型基因到變異株的突變稱(chēng)為正向突 變（forward mutation），從突變株回到野生型的 過(guò)程則稱(chēng)為回復(fù)突變或回變（back mutation或 reverse mutation）。 稀有性：突變率低且穩(wěn)定。n)的特點(diǎn),適用于整個(gè)生物界，以細(xì)菌的抗藥性為例。,2. 基因突變(jī yīn tū bi224。hu224。ng)，稱(chēng)為性狀表達(dá)（發(fā)育）。,三、遺傳信息的表達(dá)(biǎod225。)決定多肽鏈中氨基酸的排列順序(sh249。,三、遺傳信息的表達(dá)(biǎod225。ch233。ngg242。,3. 密碼子 RNA上每三個(gè)堿基決定一個(gè)氨基酸,細(xì)菌的繁殖體現(xiàn)為：DNA、RNA、蛋白質(zhì)等的合成,27,第二十七頁(yè)，共八十一頁(yè)。),2. 三種RNA （1）信使核糖核酸(h233。,1. 核糖核酸RNA RNA——核糖（DNA為脫氧核糖） 尿嘧啶U代替(d224。一個(gè)(yī ɡ232。,至今發(fā)現(xiàn)的主要降解質(zhì)粒（以其所能分解的底物命名）,25,第二十五頁(yè)，共八十一頁(yè)。nɡ jiě)性質(zhì)粒,二甲苯質(zhì)粒：XYL（Xylene） 辛烷質(zhì)粒：OCT（Octane） 甲苯(jiǎ běn)質(zhì)粒：TOL（Toluene） 萘質(zhì)粒：NAP（Napthalene） 樟腦質(zhì)粒：CAM（Camphor） 水楊酸質(zhì)粒：SAL（Salicylate）,在環(huán)保(hu225。62106Da，94.5kbp,特點(diǎn)：能夠插入(chā r249。 對(duì)多種抗生素有抗性，也可作為基因載體。 ji)志賀式菌中），而且能把抗藥性轉(zhuǎn)移到E.coli。u)R因子。 mǎ)水平（信息單位）,21,第二十一頁(yè)，共八十一頁(yè)。n)密碼：DNA上各個(gè)核苷酸的特定排列順序。)序列不同。,（5）基因水平（功能(gōngn233。,真核微生物：往往(wǎngwǎng)有不同數(shù)目的染色體。,（3）染色體水平(shuǐp237。bāo)內(nèi)存在部位和方式（七個(gè)水平）：,（1）細(xì)胞水平： DNA集中在核質(zhì)體中。r)將遺傳信息傳遞給子代。,4. DNA復(fù)制 DNA的復(fù)制過(guò)程首先(shǒuxiān)是DNA的雙鏈從一端打開(kāi)，分離成 兩條單鏈，然后以每條單鏈為模板，通過(guò)堿基配對(duì)逐漸 建立起完全互補(bǔ)的一套核苷酸單位，新連接上的多核苷 酸與原有的多核苷酸鏈重新形成新的雙螺旋DNA。,DNA雙螺旋結(jié)構(gòu) DNA是由兩條多核苷酸分子的長(zhǎng)鏈所組成。n)的物質(zhì)基礎(chǔ),2. DNA的化學(xué)組成 DNA是一種高分子化合物，它由四種核苷酸組成，每一種 核苷酸均含環(huán)狀堿基、脫氧核糖和磷酸(l237。bāo)內(nèi)可能存在一種轉(zhuǎn)化物質(zhì)，它能通過(guò)某種方式進(jìn)入RII型細(xì)胞并使RII型細(xì)胞獲得穩(wěn)定的遺傳性狀，轉(zhuǎn)變?yōu)镾III型細(xì)胞。nkāng),健康,健康,健康,健康,健康,健康,病死,病死,病死,Griffith 轉(zhuǎn)化試驗(yàn)示意圖,12,第十二頁(yè)，共八十一頁(yè)。y224。)活RII菌或死SIII菌 ————小鼠存活 對(duì)小鼠注射活SIII菌————————小鼠死亡 對(duì)小鼠注射活RII菌和熱死SIII菌 ———小鼠死亡 抽取心血 分離 活的SIII菌,F.Griffith， 研究(y225。n)的物質(zhì)基礎(chǔ),細(xì)菌(x236。)，提高處理效果。,定向培育：有目的地控制微生物生長(zhǎng)條件，使其向人類(lèi)需要(xūy224。,7,第七頁(yè)，共八十一頁(yè)。)稱(chēng)變異,6,第六頁(yè)，共八十一頁(yè)。n)與變異的基本概念,5,第五頁(yè)，共八十一頁(yè)。 細(xì)菌的遺傳是在系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中形成的，系統(tǒng)發(fā)育愈久的細(xì)菌，其遺傳的保守程度愈大，越不易受外界環(huán)境條件的影響。chu225。)的作用是什么？,3,第三頁(yè)，共八十一頁(yè)。,自學(xué)(z236。jūn)的遺傳與變異,1,第一頁(yè)，共八十一頁(yè)。jūn)的生長(zhǎng)和遺傳變異,3.2 細(xì)菌(x236。