【正文】 反對態(tài)度。這些做法在世界上正受到強(qiáng)烈的抵制，1994 年，40 多個國家的婦女反對美國公司申請和獲得乳腺癌基因的專利，因?yàn)檫@些基因是自然產(chǎn)物，不是人類發(fā)明，不應(yīng)成為知識產(chǎn)權(quán)。 對遺傳工程的生物能否給予專利保護(hù)就像過去歐洲圈占無生命的公有資源土地一樣，“圈地運(yùn)動”同樣存于今天：美國一家公司用一種植物為原料制成抗癌物質(zhì)，賺取上億美元,而這一植物的自然資源地的人們卻沒有拿到一分錢補(bǔ)償，這時就涉 及到生物遺傳資源能否擁有私有知識產(chǎn)權(quán)的問題。我認(rèn)為所有的科學(xué)創(chuàng)造、發(fā)明都應(yīng)該以改善人類生活為目的，基因工程方面的研究也如此。現(xiàn)已開發(fā)出的基因工程菌有凈化農(nóng)藥的DDT的細(xì)菌、降解水中的染料、環(huán)境中有機(jī)氯苯類和氯酚類、多氯聯(lián)苯的工程菌、降解土壤中的TNT炸藥的工程菌及用于吸附無機(jī)有毒化合物(鉛、汞、鎘等)的基因工程菌及植物等?；蚬こ碳夹g(shù)可提高微生物凈化環(huán)境的能力。由中國、美國、德國三國科學(xué)家及中外六家研究機(jī)構(gòu)參與研制的專門用于治療乙肝、慢遷肝、慢活肝、丙肝、肝硬化的體細(xì)胞基因生物注射劑,最終解決了從剪切、分離到吞食肝細(xì)胞內(nèi)肝炎病毒,修復(fù)、促進(jìn)肝細(xì)胞再生的全過程。在很多領(lǐng)域特別是疑難病癥上,基因工程工程藥物起到了傳統(tǒng)化學(xué)藥物難以達(dá)到的作用。在花色、花香、花姿等性狀的改良上也作了大量的研究?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)極地的魚體內(nèi)有一些特殊蛋白可以抑制冰晶的增長,從而免受低溫的凍害并正常地生活在寒冷的極地中。在利用基因工程手段增強(qiáng)植物對細(xì)菌和真菌病的抗性方面,也已取得很大進(jìn)展。農(nóng)作物生物技術(shù)的目的是提高作物產(chǎn)量改善品質(zhì),增強(qiáng)作物抗逆性、抗病蟲害的能力。參考文獻(xiàn)[1] [D].青島:青島大學(xué)碩士，2007.[2] Sharp , 15: 485490.[3] 康潔, [J].現(xiàn)代免疫學(xué), 2004, 24(5): 439441.[4] 林少微,王雪華, [J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報, 2007, 4(29)_3.[5] 黃艷敏, [J].河北化工, 2009, 32(1):213216.[6] (CT)基因在肝癌中作用的研究[D]..[7] [D].福建:.[8] 魏群，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（第二版）[Q]2007,11:3.[9] 陳愛葵, [J].廣東教育學(xué)院學(xué)報, 2008, 28(3):5.[10] [J].2005,5，（3）：367.第五篇：基因工程論文淮陰工學(xué)院生物課程論文 引言（或緒論）第 1 頁共 7 頁基因工程也稱遺傳工程，它主要是指通過DNA重組技術(shù)，對生物特定的基因進(jìn)行復(fù)制（克隆）、改造（修飾、重組）或人工合成新的基因，以達(dá)到改造生物性狀乃至創(chuàng)造新的物種的目的。 重組載體的菌落PCR 重組載體菌落 PCR電泳，結(jié)果顯示PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,電泳分析發(fā)現(xiàn)陽性產(chǎn)物可以擴(kuò)增出560bp大小的條帶，假陽性產(chǎn)物不能擴(kuò)增出560bp大小的條帶,與預(yù)期結(jié)果相符，可以初步篩選出陽性產(chǎn)物。 測序鑒定重組載體將小提鑒定結(jié)果正確的質(zhì)粒送交上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限司，以載體反向引物為測序引物。l無菌水溶解沉淀。（15）沉淀用3ml70%乙醇重懸清洗，以除去PEG，12000r/min離心8min。（13）加2ml無菌水溶解沉淀，將液體吸到10ml離心管中，再吸2ml ddH2O沖洗瓶壁，隨后將洗液加到同一10ml離心管中，隨后加100181。（11）棄上清，得到沉淀的核酸。8000r/min離心15min，小心倒掉上清，敞開瓶口倒置于紙巾上，使殘余上清液流盡，晾干。（6）加30ml預(yù)冷的溶液Ⅲ，緩慢顛倒數(shù)次，防止SDS破壞基因組DNA，冰浴放置15min。此步驟的目的為出去培養(yǎng)基，以獲得更純的細(xì)菌沉淀物。取出菌懸液，觀察菌體生長狀況，將菌懸液分裝于兩個250ml離心桶中，調(diào)平。 合成干涉片段的退火合成片段的退火體系：各管混勻后90℃保溫3分鐘，37℃保溫1h，再取5μL退火溶液加45μL 滅菌雙蒸水混勻，使干涉片段終濃度為8ng/μL。：，shRNA的表達(dá)由人的轉(zhuǎn)錄啟動子H1 Promoter啟動，H1啟動子屬于PolⅢ啟動子，該啟動子總在其下游的固定距離開始轉(zhuǎn)錄合成RNA，轉(zhuǎn)錄過程遇到4~5個連續(xù)的U即終止，非常精確；同時CMV Promoter為真核生物啟動子，可在該質(zhì)粒中高效啟動紅色熒光蛋白的表達(dá)；MCS為多克隆位點(diǎn)。 質(zhì)粒人工構(gòu)建的目的天然存在的野生型質(zhì)粒由于分子量大、拷貝數(shù)低、單一酶切位點(diǎn)少、遺傳標(biāo)記不理想等缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對之進(jìn)行改造構(gòu)建 MRP1的研究進(jìn)展MRP1的底物 直接通過細(xì)胞毒性分析和底物刺激的ATP酶測量進(jìn)行識別MRP1的底物的，底物是由大量的多樣化的疏水復(fù)合物，有機(jī)陰離子結(jié)合物以及陰離子非結(jié)合性底物所組成。是染色體外穩(wěn)定遺傳，并能以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中的因子。 用于RNAi的載體基因工程中，攜帶目的基因進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增和表達(dá)的工具，稱為載體。 siRNA簡介RNA干擾作用是通過siRNA（small interfering RNA，siRNA）這類小RNA分子作為較穩(wěn)定的中間介質(zhì)實(shí)現(xiàn)的。不同生物體內(nèi)的RNA干擾作用機(jī)制也各有不同，但是主要可以分為兩種類型：特異效應(yīng)作用機(jī)制與非特異效應(yīng)作用機(jī)制。為下一步抑制mrp1基因在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)奠定基礎(chǔ)。構(gòu)建針對mrp1 mRNA的RNA干擾表達(dá)載體。腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥性（multidrug resistance, MDR）是導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞化療失敗的主要原因。所以，我們要在抓住機(jī)遇，大力發(fā)展基因工程技術(shù)的同時，需要嚴(yán)格管理，充分重視轉(zhuǎn)基因生物的安全性。解決基因工程倫理問題的基本思路可以概括為四個基本原則，即不傷害原則、有利原則、尊重原則以及公正原則[8]。比如基因藥物，它不僅能根治遺傳性疾病、惡性腫瘤、心腦血管疾病等，甚至人的智力、體魄、性格、外表等亦可隨意加以改造；還有，克隆技術(shù)如果不加限制，任其自由發(fā)展，最終有可能導(dǎo)致人類的毀滅。所以，各國政府及一些大公司都十分重視基因工程技術(shù)的研究與開發(fā)應(yīng)用，搶奪這一高科技制高點(diǎn)。目前國外已有許多公司開始利用基因工程研究生物柴油及其他生物燃料，圣地亞哥藍(lán)寶石能源生物科技公司稱，他們有望在2011年前銷售由藻類生產(chǎn)出的“汽油”；科羅拉多州的Solix 生物燃料公司的第一個試點(diǎn)工廠，計(jì)劃于今年夏天正式投產(chǎn)營運(yùn)[7]。90年代后期問世的DNA改組技術(shù)可以創(chuàng)新基因，并賦予表達(dá)產(chǎn)物以新的功能，創(chuàng)造出全新的微生物，如可將降解某一污染物的不同細(xì)菌的基因通過PCR技術(shù)全部克隆出來，再利用基因重組技術(shù)在體外加工重組，最后導(dǎo)入合適的載體，就有可能產(chǎn)生一種或幾種具有非凡降解能力的超級菌株，從而大大地提高降解效率。用PCR法擴(kuò)增片段做RFLP分析，又成俄日擴(kuò)增片段長度多態(tài)性——AmpFLP [5]。常用的方法有DNA分子雜交，檢測基因的缺失、重排、基因拷貝數(shù)擴(kuò)增等。結(jié)果治療組肝功能復(fù)常率、HBVDNA 陰轉(zhuǎn)率、HBeAg 陰轉(zhuǎn)率、HBeAb 陽轉(zhuǎn)率均明顯高于對照組并有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；蚬こ趟幬镏饕?xì)胞因子、抗體、疫苗、激素和寡核甘酸藥物等。轉(zhuǎn)基因技術(shù)能培養(yǎng)出多種快速生長的轉(zhuǎn)基因魚、轉(zhuǎn)基因羊、產(chǎn)奶量高的轉(zhuǎn)基因牛等[2]。同時，植物基因工程技術(shù)的興起為創(chuàng)造植物雄性不育系提供了新的策略和可能[1]。基因工程用于農(nóng)業(yè)方面農(nóng)業(yè)是目前基因工程技術(shù)引用最廣泛的領(lǐng)域之一，農(nóng)作物生物技術(shù)的目的是提高作物產(chǎn)量，改善品質(zhì)，增強(qiáng)作物抗逆性、抗病蟲害的能力。基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展使其在農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)、環(huán)保等方面取得了廣泛的應(yīng)用，帶來了巨大的科學(xué)價值和經(jīng)濟(jì)效益。3．與環(huán)境保護(hù)（1）用于環(huán)境監(jiān)測：用DNA探針可檢測飲水中病毒的含量（2）用于被污染環(huán)境的凈化：分解石油的“超級細(xì)菌”；“吞噬”汞和降解土壤中DDT的細(xì)菌；能夠凈化鎘污染的植物；構(gòu)建新的殺蟲劑；回收、利用工業(yè)廢物等。重組DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀，才能說明目的基因完成了表達(dá)過程。：將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合的過程，實(shí)際上是不同來源的DNA重新組合的過程。鳥槍法的具體做法是：用限制酶將供體細(xì)胞中的DNA切成許多片段，將這些片段分別載入運(yùn)載體，然后通過運(yùn)載體分別轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞，讓供體細(xì)胞提供的DNA（即外源DNA）的所有片段分別在各個受體細(xì)胞中大量復(fù)制（在遺傳學(xué)中叫做擴(kuò)增），從中找出含有目的基因的細(xì)胞，再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來?；蛑委熓前呀】档耐庠椿?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目的基因工程的興起，使得基因治療成為可能?；蛟\斷技術(shù)在診斷遺傳性疾病方面發(fā)展得尤為迅速。與傳統(tǒng)疫苗相比，這種疫苗生產(chǎn)成本顯著降低、比傳統(tǒng)免疫途徑更有效、比傳統(tǒng)的免疫途徑更安全、易儲存和分發(fā)，不需要冷藏設(shè)備?；蚬こ淘卺t(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用目前，基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用非常廣泛，主要包括以下兩個方面：（1）基因工程藥物用基因工程方法制造的“工程菌”，可以高效率地生產(chǎn)出各種高質(zhì)量、低成本的藥品。第一、通過基因工程技術(shù)獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物。例如，在醬油制造過程中，可通過克隆米曲霉中的木聚糖酶基因，用反義RNA技術(shù)抑制該酶的表達(dá)所構(gòu)建的工程菌株可以釀造出顏色淺、口味淡的醬油。據(jù)報道，用DNA探針可以檢測飲用水中病毒的含量。其中不少都是能持久存在的有毒物質(zhì)，這些物質(zhì)的存在對人們所處的環(huán)境造成了極大的威脅。這樣在進(jìn)行安全性試驗(yàn)和臨床應(yīng)用時，就要求有不