【正文】 實(shí)驗(yàn)五 根及根莖類中藥（二） 一、目的要求 （ 1）掌握下列藥材的性狀鑒定特征：牛膝、川牛膝、商陸、川烏、草烏、附子。 （ 4）掌握大黃、虎杖的理化鑒定方法。在減壓干燥器出口連接新鮮無(wú)水氯化鈣干燥管，打開活塞，待內(nèi)外壓一致，關(guān)閉活塞，打開干燥器，蓋上瓶蓋，取出稱瓶迅速精密稱定重量，計(jì)算供試品中的含水量（ %）。檢讀水量，并計(jì)算供試品中的含水量（ %）。使用前，全部?jī)x器應(yīng)清潔，并置烘箱中烘干。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量（ %）。直徑和長(zhǎng)度在 3mm以下的花類、種子和果實(shí)類藥材，可不破碎。以各該品種項(xiàng)下規(guī)定濃度的乙醇或甲醇代替水為溶劑。 取供試品約 2～ 4g，稱定重量，置 100～ 250ml的錐形瓶中，精密加入水 50～ 100ml，塞緊 ,稱定重量 ,靜置 1小時(shí)后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸 1小時(shí)。如當(dāng)歸，用 70％乙醇作溶劑，采用熱浸法測(cè)定，其浸出物不得少于 ％，地龍以水作溶劑，采用熱浸法測(cè)定，其浸出物不得少于 ％。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。 （ 1） 總灰分測(cè)定法 測(cè)定用的供試品須粉碎，使能通過二號(hào)篩，混合均勻后，取供試品 2～ 3g（如須測(cè)定酸不溶性灰分，可取供試品 3～ 5g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量 (準(zhǔn)確至 )，緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時(shí)，逐漸升高溫度至 500～ 600℃ ，使完全灰化并至恒重。 試劑 五氧化二磷、氯化鈣等 。 實(shí)驗(yàn)三 中藥材灰分、水分、浸出物測(cè)定及雜質(zhì)檢查法 （一）、目的要求 （ 1）掌握灰分及酸不溶性灰分的測(cè)定方法。 顯微描繪器使用時(shí)取下顯微鏡的接目鏡，裝上描繪器，如不是附屬在目鏡上的描繪器尚需加上目鏡，調(diào)節(jié)物像清晰后，再調(diào)繪圖板的傾斜度，使與描繪器的角度相一致，用顯微描繪器上的濾光片調(diào)節(jié)光線強(qiáng)弱，使視野中的物像及繪圖紙上鉛筆均較清晰，即可進(jìn)行描繪。 ? 3．描繪器的使用及描繪圖放大倍數(shù)的計(jì)算 描繪器是描繪顯微鏡下所見物體物像時(shí)所用的一種儀器，常見的有單獨(dú)的描繪器和固定在目鏡上的描繪器，描繪器 (見圖 )由二個(gè)三棱鏡 A、 B粘合在一起， A棱鏡合面 PP，除中央部的小圓孔 M外，均涂以水銀，旁側(cè)有一反射棱鏡 C，與垂直方向約呈 75176。如果接物鏡和接目鏡的放大倍數(shù)改變，目鏡測(cè)微尺應(yīng)重新校正。 ? (1)目鏡測(cè)微尺的校準(zhǔn)：將載臺(tái)測(cè)微尺放在顯微鏡的載物臺(tái)上，于高倍鏡下將測(cè)微尺清晰地調(diào)整到視野的中央，將目鏡測(cè)微尺放人目鏡內(nèi) (有的已將目鏡測(cè)微尺固定在目鏡內(nèi) )，適當(dāng)移動(dòng)載臺(tái)測(cè)微尺，使二種尺子的刻度重合，找出二尺的重合刻度線，根據(jù)二條重合線問小格數(shù)的比值，計(jì)算目鏡測(cè)微尺在高倍物鏡下每小格的數(shù)值 (μm)。經(jīng)過校正之后的目鏡測(cè)微尺，方可用來(lái)測(cè)量顯微鏡下物體的大小。采用此解離法制片需在通風(fēng)處進(jìn)行，以防氯氣中毒。也可以采用加溫的辦法來(lái)縮短浸漬時(shí)間，以材料用玻璃棒輕壓，可以離散為度，然后用水洗至中性，即可制片觀察。待材料能被輕壓離散時(shí)，傾去堿液，用水洗至中性，即可取所需部位加稀甘油制片觀察。欲解離的材料，需先切割成 2mm的薄片。 （二）儀器、試劑及材料 XS系列顯微鏡、單（雙）面刀片、燒杯、試管、目鏡測(cè)微尺、載臺(tái)測(cè)微尺、顯微描繪器、繪圖板、恒溫水浴、量筒。 ? ④畫引線，注字。圖下需注明標(biāo)本的名稱、部位和放大倍數(shù)。 ? ④各部位應(yīng)先畫出引線再注文字。 ? ②所有結(jié)構(gòu)線條不能用尺或其他圓規(guī)或曲線板等工具代畫，必須徒手作圖，以表示生物的自然形態(tài)。 ? 水合氯醛處理制片：取粉末少許，置于潔凈的載玻片上，滴加水合氯醛試液 1～ 2滴，混合后在小火焰上來(lái)回加熱，并以解剖針攪拌（切勿使溶液蒸干），補(bǔ)充 2～ 3次水合氯醛試液，然后將處理的粉末集中一處，為防止水合氯醛結(jié)晶析出，滴加稀甘油混合后蓋上蓋玻片，用濾紙屑清潔蓋玻片周圍的多余藥液，即可置顯微鏡下觀察。 ? 特別堅(jiān)硬的藥材可用銼刀將其銼成粉末。 ③ 要注意保持顯微鏡的干燥和清潔，使用前后，均需將顯微鏡擦干凈，注意鏡頭要用擦鏡紙或綢巾單向擦拂，切勿用手、手帕或紙片等去擦，觀察臨時(shí)制片時(shí)，要防止水分或藥液外溢以致沾污鏡頭及其他部分。 ③ 調(diào)節(jié)光柵，開大光強(qiáng)，關(guān)小光弱。方法是先在高倍鏡中尋找一物，移至視野中心，轉(zhuǎn)過低倍物鏡，觀察此物在低倍鏡視野中所在的部位，記下座標(biāo)位置，以后凡在低倍鏡視野中找到的物體就移動(dòng)至所記錄的座標(biāo)位置，轉(zhuǎn)過高倍鏡，正置視野中心。更換高倍鏡時(shí)如出現(xiàn)鏡頭觸及載玻片現(xiàn)象，則要檢查標(biāo)本切片是否放反，或高低倍鏡是否配套。 ⑤ 看到物象后，若觀看部分不在視野中心，則慢慢移動(dòng)載片，使之適中，再轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)手輪，直至看到最清楚的物象為止。將欲觀察的標(biāo)本片從鏡前方橫置于載物臺(tái)上，（注意蓋玻片應(yīng)向上）使標(biāo)本對(duì)準(zhǔn)透光孔的中央。 低倍鏡的操作方法 ① 將顯微鏡放置離桌緣約 10cm處，鏡臂應(yīng)靠近胸前。物鏡將標(biāo)本作第一次放大，目鏡將第一次放大的像作第二次放大，兩者相乘即是觀察到的放大倍數(shù)。 2．試劑 甘油、水、水合氯醛試液、甘油醋酸試液、間苯三 酚試液、濃鹽酸，以上都是實(shí)驗(yàn)室必備試液。中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn) 總論 ?一、中藥鑒定的法定依據(jù) ?二、藥材鑒定取樣法 ?三、藥材來(lái)源鑒定法 ?四、藥材性狀鑒定法 ?五、藥材顯微鑒定法 ?六、藥材理化鑒定法 各論 實(shí)驗(yàn)一 組織制片技術(shù) 一、 目的要求 (1)掌握徒手制片、粉末制片和表面制片的方法。另需單（雙面）刀片或剃刀、徒手切片器、培養(yǎng)皿。光學(xué)部分包括成像系統(tǒng) —— 目鏡和物鏡，照明系統(tǒng) —— 聚光器、可變光欄和反射鏡。觀察時(shí)視野范圍內(nèi)應(yīng)均勻明亮，先用低倍鏡觀察，如需要放大，可將目的物調(diào)至視野中央，然后轉(zhuǎn)換成高倍鏡，仔細(xì)觀察。 ③ 裝片。自目鏡向下觀察，同時(shí)旋轉(zhuǎn)粗調(diào)節(jié)手輪，使物鏡慢慢上升（或使載物臺(tái)慢慢下降），直至在視野中看到物象為止。 高倍鏡的操作方法 應(yīng)先在低倍鏡下選擇物像，移至視野中心，換轉(zhuǎn)高倍 鏡，應(yīng)能看到欲觀察之物像，轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)手輪使之圖像清晰。 高低倍鏡視野中心的校正：由于顯微鏡使用過久或使用 不當(dāng)，有時(shí)出現(xiàn)高低倍鏡視野中心不重合的現(xiàn)象，影響工作效率，因此使用前應(yīng)事先校對(duì)高低倍鏡視野中心。 ② 升降聚光器，上升光強(qiáng)，下降光暗。 ② 每次觀察標(biāo)本片時(shí)，必須先用低倍鏡觀察，看清物象后，再換高倍鏡。 ? 注意：若有較多的組織（如纖維等）不能通過篩子，而作為殘?jiān)^子）遺去，就會(huì)影響該藥材特征的檢出，造成結(jié)果判斷的困難。凡含淀粉粒的粉末進(jìn)行鑒定時(shí)，必須先按此法進(jìn)行裝片。線條要求粗細(xì)均勻，圓滑，明暗一致。點(diǎn)要小而圓，由密到稀逐步過渡。注字書寫要求清楚、端正。 ? ③用較淡的鉛筆 (2H或 4H)，按照實(shí)物或顯微圖像的比例關(guān)系和立體投影畫出輪廓草圖，經(jīng)反復(fù)對(duì)照修改后，再用較濃的鉛筆 (HB或 2H)繪出修改圖。 （ 3）掌握描繪器的使用方法。適用于研究細(xì)胞的立體形態(tài)結(jié)構(gòu)，尤其適宜觀察導(dǎo)管、管胞、石細(xì)胞和纖維等增厚壁的狀況。如離析的材料稍硬，可用 6％～ 10％氫氧化鉀液加熱使之離析，尚可更換一次試液。 ? 硝酸 鉻酸離析法：適用于木質(zhì)化組織，如木材、根、莖、樹皮等材料，將材料放入坩堝或試管中，加 10％硝酸與 10％鉻酸的等量混合液，其量為材料的 20倍，放置浸漬的時(shí)間，視材料的性質(zhì)而異，一般為 12日或更長(zhǎng)的時(shí)間。 氯酸鉀法：本法適用于堅(jiān)硬的材料，如木類及某些堅(jiān)硬的果皮、種皮等，將材料置坩堝或小燒杯中，加 50％硝酸試液約 5ml及氯酸鉀粉少量，緩緩加熱至沸，當(dāng)氣泡漸少時(shí)，再及時(shí)加入少量的硫酸鉀，以維持氣泡穩(wěn)定產(chǎn)生 (約 15～20分鐘 )，至材料能分離開時(shí)，傾去試液，加水洗滌數(shù)次，即可制片