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正文內(nèi)容

中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-wenkub

2023-03-28 15:41:45 本頁面
 

【正文】 ,要求細(xì)直、均勻、不交叉,以免誤指。 ? ③顯示立體結(jié)構(gòu)可用透視線條來表示。水合氯醛試液可除去細(xì)胞中的淀粉,油脂等,增加細(xì)胞壁的折光率,還能使萎縮的細(xì)胞壁膨脹,從而使細(xì)胞的形態(tài)更加清晰。 粉末制片 ? 一般制片:取粉末少許,置于潔凈的載玻片上,滴加 1~ 2滴蒸餾水或甘油醋酸試液,用解剖針混合均勻,然后將蓋玻片一側(cè)邊沿輕輕壓在粉末旁載片上,慢慢放下,若蓋下后潤(rùn)濕劑未充滿蓋片,則可在一側(cè)滴加少量潤(rùn)濕劑,使之充滿蓋片;若潤(rùn)濕劑過多而溢出蓋片外,則用濾紙屑從側(cè)面將過多的潤(rùn)濕劑吸去,保持制片清潔,即可置顯微鏡下觀察。 2 粉末制片法 此法是鑒定生藥最常用的方法之一,簡(jiǎn)便快速,主要鑒別細(xì)胞的形態(tài)特征。 ④ 加濾光片。 光源的調(diào)節(jié) 觀察不同的對(duì)象要使用不同強(qiáng)弱的光線,如觀察無色的薄壁細(xì)胞、淀粉粒的層紋、細(xì)小的草酸鈣晶體等需要較暗的光線;組織較厚的、有色的厚壁細(xì)胞等就需要較強(qiáng)的光線。高倍鏡頭觀察物象時(shí),只能用細(xì)調(diào)節(jié)手輪調(diào)節(jié)焦距。 注意在顯微鏡中看到的是實(shí)物倒像。 ④ 調(diào)節(jié)焦距。 ② 對(duì)光。機(jī)械部分包括鏡座、鏡臂、鏡筒、載物臺(tái)、粗細(xì)調(diào)節(jié)手輪及推動(dòng)器或壓夾。 3.材料 制作徒手切片和表面制片,可選用新鮮藥材;制作粉末片,選用干燥藥材的粉末。 (2)熟悉生物顯微鏡使用方法及作圖要領(lǐng)。 二、儀器、試劑及材料 1.儀器 生物顯微鏡、酒精燈、蓋玻片、載玻片、鑷子、解剖針、擦鏡紙、吸水紙、火柴、繪圖鉛筆 (HB、 2H、 4H)、直尺和橡皮,以上都是每次實(shí)驗(yàn)必備品。 三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 生物顯微鏡由光學(xué)部分和機(jī)械部分組成。使用生物顯微鏡時(shí),利用反射鏡將外來光線導(dǎo)入聚光鏡中,由聚光鏡將光線會(huì)聚在標(biāo)本上,用光欄調(diào)節(jié)光線強(qiáng)度。上升聚光鏡到載物臺(tái)水平,打開光欄至最大限度,再將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒的正下方,使對(duì)準(zhǔn)載物臺(tái)上的透光孔(轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),聽到“得”一聲,即已對(duì)正)然后用二手轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,同時(shí)從接目鏡向下看,直至鏡中出現(xiàn)一明亮而均勻的視野為止。從側(cè)面注視接物鏡與標(biāo)本片之間的距離,旋轉(zhuǎn)粗調(diào)節(jié)手輪,使鏡筒慢慢下降(或使載物臺(tái)慢慢上升),直至物鏡幾乎與標(biāo)本片相接觸,但切勿觸及標(biāo)本片,以免造成鏡頭與標(biāo)本片的損壞。如果觀察過程中發(fā)現(xiàn)清晰的圖像逐漸模糊,說明調(diào)節(jié)手輪失靈,應(yīng)進(jìn)行檢修。 低倍鏡下觀察到的物象轉(zhuǎn)至高倍鏡下觀察時(shí),通常視野轉(zhuǎn)暗,可調(diào)節(jié)聚光器和光柵以增加亮度。 調(diào)節(jié)光源有幾種方法: ① 轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,凹面光強(qiáng),平面光較暗(帶電光源的顯微鏡可直接調(diào)節(jié)光線的明暗)。 使用顯微鏡注意點(diǎn) ① 取拿顯微鏡時(shí),必須一手握住鏡臂,一手托住鏡座,輕取輕放,防止因撞擊使鏡頭內(nèi)各組透鏡脫膠而影響觀察的清晰度。 粉末的制備 ? 選擇具有代表性的樣品適量,置粉碎器中,粉碎,使之全部樣品通過 ~ (相當(dāng)于藥典 4~ 5號(hào)篩),中成藥則應(yīng)通過 (相當(dāng)于藥典 6號(hào)篩),裝于瓶中備用??捎^察細(xì)胞中的不溶性物質(zhì)如淀粉粒、脂肪油滴、色素顆粒等。 3.組織簡(jiǎn)圖繪制要領(lǐng) ?常用的各種組織簡(jiǎn)圖代表符號(hào) (1)繪圖的一般原則: ? ①一切結(jié)構(gòu)均用線條來表示。對(duì)球體、圓柱體或圓錐體的立體結(jié)構(gòu)可以用圓點(diǎn)襯托明暗光線的方式,而不可用任何涂影來表示。圖內(nèi)的結(jié)構(gòu)名稱,可直接用文字寫明,也可用數(shù)碼代注,再在圖下集中注明。 ? ②仔細(xì)觀察各部位的形狀和結(jié)構(gòu)及其之間的比例關(guān)系和較明顯的立體結(jié)構(gòu)。 ( 2)掌握顯微測(cè)微尺的校正和使用方法。 (三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 1.解離制片法 2.顯微測(cè)微尺的使用 3.描繪器的使用及描繪圖放大倍數(shù)的計(jì)算 ?解離制片法 系利用化學(xué)試劑使植物體的細(xì)胞與細(xì)胞 間的中層物質(zhì)溶解,細(xì)胞相互分離的方法。將切割好的材料置于坩堝中,加 5%氫氧化鉀溶液適量,加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止。所以加熱處理時(shí)間不宜太長(zhǎng)。經(jīng)硝酸、鉻酸解離的材料,草酸鈣、碳酸鈣結(jié)晶及淀粉粒、脂肪油等均已消失。載臺(tái)測(cè)微尺:為一特制的載玻片,在載玻片的中央封有 lmm長(zhǎng)的小尺,精確分成 10大格,每大格又分 10小格,共 100小格,每小格長(zhǎng)度為 ,即 l0μm標(biāo)尺的外圍有一小黑環(huán),便于在顯微鏡下尋找標(biāo)尺。使用目鏡測(cè)微尺時(shí),將目鏡自鏡筒中抽出,旋開鏡片,將目鏡測(cè)微尺的標(biāo)尺正面向上,安放在目鏡中部的隔板上,旋上鏡片,放回原鏡筒內(nèi),進(jìn)行測(cè)量。 77=/ μm。如:高倍鏡下測(cè)得薄荷腺鱗直徑為 24小格,即為 3. 89μm 24=93μm。當(dāng)載玻片上物體的物像經(jīng)接物鏡 E、接目鏡 D及 PP,平面上小孔 M到達(dá)于眼時(shí),同一雙眼睛同時(shí)看到載物臺(tái)的物體和圖板上的鉛筆、圖紙,這樣即可進(jìn)行描繪。如要畫的物體大于一個(gè)視野,則畫完一個(gè)視野后,同時(shí)平移標(biāo)本片和繪圖紙,使描好的目的物像仍有少部分在視野中并重合,再如上法繼續(xù)描繪至整個(gè)物體畫完。 ( 3)掌握雜質(zhì)的檢查方法。(當(dāng)歸等) (三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 1. 灰分測(cè)定法 藥材取自大自然,采收后雖經(jīng)產(chǎn)地加工,但不可避免地會(huì)帶有一些無機(jī)物或摻雜物如泥砂等,為了控制藥材的純度,藥典對(duì)一些藥物規(guī)定了總灰分和酸不溶性灰分的限量,總灰分包括植物體細(xì)胞組織及其內(nèi)含物如各類結(jié)晶體等灰化的殘留物 (又稱“生理灰分” )和外界的無機(jī)摻雜物灰化的殘留物。如供試品不易灰化,可將坩堝放冷,加熱水或 10%硝酸銨溶液 2ml,使殘?jiān)鼭駶?rùn),然后置水浴上蒸干,殘?jiān)涨胺胱疲鳞釄鍍?nèi)容物完全灰化。 2. 浸出物測(cè)定法 許多藥材的有效成分尚不清楚,或已知的有效成分尚無精確的定量方法,浸出物的測(cè)定是最常用的控制質(zhì)量的指標(biāo)。 ( 1)水溶性浸出物測(cè)定法 測(cè)定用的供試品須粉碎 ,使能通過二號(hào)篩 ,并混合均勻。精密量取濾液 25ml,置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,在水浴上蒸干后,于 105℃ 干燥 3小時(shí),移置干燥器中,冷卻 30分鐘,迅速精密稱定重量,除另有規(guī)定外,以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量( %) 。水分含量的測(cè)定方法,依所含成分的不同而異。 第一法 (烘干法 ) 本法適用于不含或少含揮發(fā)性成分的藥品。 儀器裝置 如圖。將 A瓶置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱 ,待甲苯開始沸騰時(shí),調(diào)節(jié)溫度,使每秒鐘餾出 2滴。 減壓干燥器 取直徑 12cm左右的培養(yǎng)皿,加入新鮮五氧化二磷干燥劑適量,使鋪成 ~ 1cm的厚度,放入直徑 30cm的減壓干燥器中。 ( 2)掌握陳列的原植物標(biāo)本鑒定特征。 試劑 甲醇、乙醇、稀鹽酸、 30%硝酸、含氯石 灰、硫酸。 ( 3)掌握川烏的顯微鑒定特征。 材料 目的要求項(xiàng)需掌握的原植物標(biāo)本和藥材標(biāo)本;川烏根橫切片,牛 膝根橫切片、川牛膝橫切片。 ( 4)掌握黃連、甘草理化鑒定方法。 (三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 原植物鑒定注意點(diǎn) 藥材性狀鑒定注意點(diǎn) 顯微鑒定 ( 1)必須觀察片 ( 2)選擇觀察片 理化鑒定 黃連 (味連 )根莖橫切面簡(jiǎn)圖 黃連粉末圖 甘草根橫切面簡(jiǎn)圖
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