12基因工程的基本操作程序zl4-全文預覽
【正文】 （ 4） 為了增強目的基因的表達水平，往往還要增加一些其他調控元件，如增強子等； （ 5） 有時需要確定目的基因表達的產物存在于細胞的什么部位，往往要加上可以標識存在部位的基因（或做成目的基因與標識基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。 不可以。 ③ 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。 轉錄開始后， RNA聚合酶沿 DNA分子移動，并以 DNA分子的一條鏈為模板合成 RNA。 （ 3）將表達載體導入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。 珠蛋白是動物血紅蛋白的重要組成成分。 DNA獲取目的基因和切割載體時一般情況下為什么 要選用同一種限制性核酸內切酶？經過重組過程后會形 成幾種 DNA分子？ ？ Ca2+處理細胞。 _____________切斷目 的基因，使其產生 _____ ____________。獲得目的基因的常見方法有三種：（ 1）從基因文庫中獲取目的基因，根據(jù)基因的 _________序列，基因在________上的位置，基因的 ________產物 mRNA，基因的 _______產物蛋白質等獲取目的基因。 基因工程的基本操作程序 ?目的基因的獲取 ?基因表達載體的構建 ?將目的基因導入受體細胞 ?目的基因的檢測與鑒定 一、目的基因的獲取 目的基因主要是指 ______________________ 編碼蛋白質的結構基因 例子 ? 獲取目的基因的常用方法有哪些 ? （ 1）從 基因文庫 中獲取 （ 2）利用 PCR技術擴增 （ 3）人工合成 (一 )從基因文庫中獲取目的基因 ？種類？如何構建？ 一、目的基因的獲取 基因組文庫 cDNA文庫 含有一種生物的 全部 基因 含有一種生物的 部分基因 種類： 基因組文庫 cDNA文庫 基因組 DNA文庫 cDNA文庫 基因組 DNA文庫與 cDNA文庫的比較 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 啟動子 終止子 與 RNA聚合酶結合位點 ：編碼蛋白質 ,連續(xù)不間斷 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 原核細胞 基因結構 ①不編碼蛋白質。 1．有關目的基因的獲取和基因文庫的理解，不正確的是 ( ) A．目的基因可以從自然界中分離，也可以人工合成 B．目的基因主要指編碼蛋白質的結構基因 C．基因文庫就是基因組文庫 D． cDNA文庫只含有某種生物的一部分基因 2．下列屬于獲取目的基因方法的是 ①利用 mRNA反轉錄形成 ②從基因文庫中獲取 ③從受體細胞中提取 ④利用 PCR技術擴增 ⑤利用 DNA轉錄 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥ D C 復習： 目的基因？例子 ? 獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 什么是基因文庫？種類？ 原核細胞與真核細胞的基因結構？ 怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因？ 基因組文庫？ cDNA文庫？ (二）利用 PCR技術擴增目的基因 PCR技術 — 多聚酶鏈式反應 ? 原理： ? 前提： ? 條件： DNA雙鏈復制 一段已知目的
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