人教版教學(xué)課件12基因工程的基本操作程序修改版-全文預(yù)覽
【正文】 概念 ： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 原理： DNA復(fù)制 利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 四種脫氧核苷酸 (dNTP) 一對引物： 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶） 模板 DNA( 需含有目的基因 ) Mg2+(激活劑 ) 條件： 緩沖溶液 一對寡核苷酸序列：與目的基因的起始段互補 一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物 前提： 過程 高溫變性（ 解旋為單鏈 ） 低溫退火（ 引物與單鏈互補結(jié)合 ） 適溫延伸 （ 在 Taq酶的作用下合成 與模板互補的 DNA雙鏈 ） 重復(fù)循環(huán) 預(yù)變性（ 增加 DNA變性的概率 ） 具體過程 PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ) ① 概念： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù) ③ 條件： _______________________、 _______________、 ___________ 、 ② 原理： __________ ④ 方式：以 _____方式擴增，即 ____（ n為擴增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤ 結(jié)果： 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 DNA復(fù)制 四種脫氧核苷酸 一對引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增 要有一段已知目的基因的核苷酸序列（前提條件） ⑥ 過程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板 在熱作用下， _____斷裂，形成 ___________ b、退火 （ 復(fù)性 55℃ 65℃ ）：系統(tǒng)溫度降低，引 物與 DNA模板結(jié)合，形成局部 ________。 基因工程的基本操作程序 目的基因的獲取 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 目的基因的檢測與鑒定 基因工程基本操作的四個步驟 有了目的基因，我們才能賦予一種生物以另一種生物的遺傳特性。 一、目的基因的獲取 (一 )、目的基因主要是 ______________________ 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 請舉出三個以上的例子 （二）、獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 從基因文庫中獲取 利用 PCR技術(shù)擴增 人工合成 請閱讀 P9第一和二兩段 一、目的基因的獲取 （一）從基因文庫中直接獲取 ： 概念見 P9 :按外源 DNA片段的來源分類 種類 基因組 DNA文庫： 含有一種生物的 全部 基因 部分基因文庫： 只包含了一種生物的 部分 基因， 如： cDNA文庫 為了在不知目的基因序列的情況下，便于獲得所需的目的基因。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列
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