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高中生物同步課件:53 血紅蛋白的提取和分離(7)(人教版選修1)-全文預(yù)覽

2024-12-15 07:20 上一頁面

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【正文】 液洗脫瓶,打開下端出口進(jìn)行洗脫。 裝填凝膠柱時不得有氣泡存在: 因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果 。 75表示凝膠的得水值,即每克凝膠膨 脹時吸水 。 ④ 組裝: 將上述三者按相應(yīng)位置組裝成一個整體 。 20mmol/L磷酸緩沖液 1mL 透析過程動畫演示 : ( 1)凝膠色譜柱的制作: ① 取長 40厘米,內(nèi)徑 , 兩端磨平。 ② 試管中溶液層次: 第 1層(最上層): 甲苯層 (無色透明); 第 2層(中上層): 脂溶性物質(zhì)沉淀層 (白色薄層固體); 第 3層(中下層): 血紅蛋白的水溶液層 (紅色透明液體); 第 4層(最下層): 雜質(zhì)沉淀層 (暗紅色)。 血紅蛋白的特點: (1)紅細(xì)胞的洗滌 : 去除雜質(zhì)蛋白,利于后續(xù)血紅蛋白的分離純化 . 采集血樣 低速短時間離心 (速度越高和時間越長,會使白細(xì) 胞等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果) 吸取血漿: 上層透明的黃色血漿。 市場上有高分子量、次高分子量及低分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白試劑出售。解聚成單條肽鏈 ,因此測定的結(jié)果只是 單條肽鏈的分子量 。 在 電場 的作用下, 這 些 帶電 分子 會 向著 與 其所 帶電 荷相反的 電極 移 動 瓊脂糖凝膠電泳示意圖 聚丙烯酰胺凝膠電泳 測定蛋白質(zhì)分子量 :常用 十二烷基硫酸鈉( SDS) — 聚丙烯酰胺 凝膠電泳。 : ① 許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán),在 一定的 PH下,這些基團(tuán)會帶上正 電或負(fù)電。 : 思考:說出人體血液中緩沖對。 ② 相對分子量 較大 的蛋白質(zhì) 無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。 : 根據(jù)蛋白質(zhì) 各種特性 的差異,如 分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力 等等,可以用來分離 不同種類的蛋白質(zhì)。 本課題學(xué)習(xí)目標(biāo) 體驗從復(fù)雜體系中提取生物大分子的基本過程和方法,并了解色譜法、電泳法等分離生物大分子的基本原理。 : 選用一定的 物理或化學(xué) 的方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的 生物大分子 。 : ① 當(dāng)相對分子量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時, 相對分子量較小的蛋白質(zhì) 容易 進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢 。 能夠抵制外界的酸和堿對溶液 PH值的影響, 維持 PH基本不變。 :在本課題中使用的緩沖液是 :________
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