【正文】 cromanipulation）在顯微鏡下，用顯微操作裝置對細(xì)胞進行解剖和微量注射（microinjection）的技術(shù)。這種操作必須在顯微操作儀下進行。（三）細(xì)胞拆合161。161。161。二、細(xì)胞融合161。用于研究植物的生長發(fā)育、分化和變異；進行無性繁殖；制取代謝產(chǎn)物。（二）顯微分光光度測定技術(shù)第三節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞工程與顯微操作技術(shù)一、細(xì)胞培養(yǎng)（一）動物細(xì)胞培養(yǎng)161。五、放射自顯影技術(shù)六、定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù)（一）流式細(xì)胞儀161。161。161。免疫電鏡技術(shù)可分為免疫酶標(biāo)技術(shù)、免疫膠體金技術(shù)、免疫鐵蛋白技術(shù)。在實驗過程中要注意設(shè)立各種實驗對照以檢驗結(jié)果的可靠性。161。 161。是利用抗體同特定抗原專一結(jié)合的原理，對抗原進行定位測定的技術(shù)。?脂溶染色法：借蘇丹染料溶于脂類而使脂類顯色。?Schiff反應(yīng)：醛基可使Schiff試劑中的無色品紅變?yōu)榧t色。特點：介質(zhì)密度較低，介質(zhì)的最大密度應(yīng)小于被分離生物顆粒的最小密度。分離活細(xì)胞的介質(zhì)要求：l1）能產(chǎn)生密度梯度，且密度高時，粘度不高；l2）PH中性或易調(diào)為中性；l3）濃度大時滲透壓不大；l4）對細(xì)胞無毒。類型：速度沉降、等密度沉降。 可將細(xì)胞器初步分離，常需進一步通過密度梯離心再行分離純化。 用途：分離大小相差懸殊的細(xì)胞和細(xì)胞器。超速離心機的最高轉(zhuǎn)速可達(dá)100000r/min，離心力超過500kg。25kr/min，離心力amp。轉(zhuǎn)速10~25kr/min的離心機稱為高速離心機。1997年，Wilmut等克隆了綿羊Dolly。161。分辨率：~。（三）掃描隧道顯微鏡scanning tunneling microscope，STM161。3）冰凍蝕刻 freezeetching（二）掃描電子顯微鏡161。放大倍數(shù)可達(dá)百萬倍；161。二、電子顯微鏡（一）透射電子顯微鏡transmission electron microscope, TEM1. 原理161。用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞，通常具有相差或DIC物鏡，有的還具有熒光裝置。1952年Nomarski發(fā)明，利用兩組平面偏振光的干涉，加強影像的明暗效果，能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影。進入顯微鏡的光線為偏振光，鏡筒中有檢偏器 （與起偏器方向垂直的偏振片）。（五）相差顯微鏡原理用途：觀察未經(jīng)染色的玻片標(biāo)本。有兩個特殊的濾光片；161。生物大分子→病毒→細(xì)胞 病毒191。核殼：殼體與核酸構(gòu)成病毒的核殼體二、病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖（復(fù)制）161。識別161。子粒所構(gòu)成。殼體又由更小的形態(tài)單位161。也是與細(xì)胞的最根本的區(qū)別之一。161。因為它們的主要生命活動必須在細(xì)胞內(nèi)才能表現(xiàn)，在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖。176。原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的遺傳結(jié)構(gòu)裝置和基因表達(dá)的比較161。二、細(xì)胞的大小細(xì)胞體積的守恒規(guī)律。161。161。161。鞘對于藍(lán)藻抵抗不利環(huán)境很重要。在電鏡下可見細(xì)胞壁有4 個結(jié)構(gòu)層，化學(xué)分析表明，藍(lán)藻的細(xì)胞壁除了有與和高等植物一樣的纖維素成分外，還有與細(xì)菌相似的肽聚糖。這些內(nèi)含物各自有其特征性的細(xì)胞化學(xué)染色性能。故它是一種原始的光合作用。藻膽蛋白分子均由α、β 兩個亞基構(gòu)成，其上各帶有1～4 個色素團。光合（作用）片層161。176。在光鏡下可觀察到藍(lán)藻細(xì)胞中央部位較周圍原生質(zhì)明亮，是遺傳物質(zhì)DNA 所在部位，它相當(dāng)于細(xì)菌的核區(qū)，稱為中心質(zhì)或中央體。藍(lán)藻的分布十分廣泛。屬單細(xì)胞生物，但有些藍(lán)藻經(jīng)常以絲狀的細(xì)胞群體存在。DNA分子環(huán)狀，但遺傳信息量很大，可與高等植物相比。（二）藍(lán)藻161。，有時能整合到核DNA中去。161。161。：161。E菌毛：是菌體表面及其蛋白纖細(xì)，須用電鏡觀察。C莢膜（capsule）：細(xì)菌最外表的一層多糖類物質(zhì)。161。6．很多支原體能寄生在細(xì)胞內(nèi)繁殖。 161。3．MRNA 與核糖體結(jié)合為多聚核糖體，指導(dǎo)合成約700 多種蛋白。1．支原體具有典型的細(xì)胞膜。1924 年福爾根（Feulgen）等首先用Feulgen 反應(yīng)法專門作為脫氧核糖核酸（DNA）的定性方法。細(xì)胞生理學(xué)主要是研究細(xì)胞對其周圍環(huán)境的反應(yīng)、細(xì)胞生長與繁殖的機制，細(xì)胞從環(huán)境中攝取營養(yǎng)的能力，機體代謝功能與其復(fù)制方法，細(xì)胞的興奮性、收縮性、分泌和細(xì)胞活動的其他表現(xiàn)機制，生物膜的主動運輸和能量傳遞與生物電等。（二) 細(xì)胞生理學(xué)的研究161。魏斯曼（Weissman）推測遺傳單位有序地排列在染色體上。161。161。細(xì)胞遺傳學(xué)的發(fā)展161。?1883 年Van Beneden 與1886 年 Strasburger 分別在動物與植物細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)減數(shù)分裂，至此發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞分裂的主要類型。177。1861 年舒爾策（Max Schultze）提出了原生質(zhì)理論，認(rèn)為有機體的組織單位是一小團原生質(zhì)，這種物質(zhì)在一般有機體中是相似的。 結(jié)構(gòu)基因組計劃的主要細(xì)胞學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展簡史一、細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)1665年：Robert Hooke(英國物理學(xué)家)二、細(xì)胞學(xué)說的建立及其意義德國植物學(xué)家施萊登（），德國動物學(xué)家施旺（）共同提出 細(xì)胞學(xué)說：一切植物、動物都是由細(xì)胞組成的，細(xì)胞是一切動植物體的基本單位三、細(xì)胞學(xué)的經(jīng)典時期原生質(zhì)理論的提出1840年普金耶(Pukinje)(Von Mohl)首次將動物、植物細(xì)胞的內(nèi)含物稱為161。兩個基本點：一是基因與基因產(chǎn)物如何控制細(xì)胞的生命活動，包括細(xì)胞內(nèi)外信號是如何傳遞的；二是基因表達(dá)產(chǎn)物——蛋白質(zhì)如何構(gòu)建和裝配成細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，并使細(xì)胞正常的生命活動得以進行。細(xì)胞工程三、當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究的總趨勢與重點領(lǐng)域（21世紀(jì)細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展趨勢）?細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)(包括分子遺傳學(xué)與生物化學(xué)) 相互滲透與交融是總的發(fā)展趨勢。細(xì)胞增殖及其調(diào)控191。二、細(xì)胞生物學(xué)的主要研究內(nèi)容細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞重要生命活動：191?！? 細(xì)胞生物學(xué)課程是生命科學(xué)的四大基礎(chǔ)學(xué)科之一● 從顯微、超微和分子三個層次來認(rèn)識細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與 功能● 將分子生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、生理學(xué)等課程知識與細(xì)胞生物學(xué)課程中講到的堅持知識的真知來源于實驗室● 時刻注意培養(yǎng)自主學(xué)習(xí)能力、利用各種學(xué)習(xí)資源的能力、提高學(xué)習(xí)效率和利用時間的能力● 提高英文水平，緊跟世界學(xué)科發(fā)展第一章 緒論第一節(jié)細(xì)胞生物學(xué)研究的生命體是多層次、非線性、多側(cè)面的復(fù)雜結(jié)構(gòu)體系， 動的基本單位，有了細(xì)胞才有完整的生命活動。核心問題是將遺傳與發(fā)育在細(xì)胞水平上結(jié)合起來。細(xì)胞骨架體系的研究191。細(xì)胞的起源與進化191。細(xì)胞生物學(xué)的主要發(fā)展趨勢：用分子生物學(xué)及其它相關(guān)學(xué)科的方法，深入研究真核細(xì)胞基因表達(dá)的調(diào)節(jié)和控制，以期從根本上揭示遺傳與發(fā)育的關(guān)系、細(xì)胞衰老、死亡及癌變的機理等基本的生物學(xué)問題，為生物工程的廣泛應(yīng)用提供理論依據(jù)。真核細(xì)胞基因組結(jié)構(gòu)及其功能調(diào)控是未來分子細(xì)胞生物學(xué)研究的核心問題。177。原生質(zhì)體161。細(xì)胞分裂的研究?1881 年Remak 發(fā)現(xiàn)雞胚血細(xì)胞的直接分裂，其后Flemming 在動物細(xì)胞中，Strasburger 在植物細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有絲分裂（mitosis）,并證實有絲分裂的實質(zhì)是核內(nèi)絲狀物（染色體）的形成及其向兩個子細(xì)胞的平均分配。四、實驗細(xì)胞學(xué)與細(xì)胞學(xué)的分支及其發(fā)展161。1876 發(fā)現(xiàn)了動物的受精現(xiàn)象。1888 年Strasburger 1893 年Overton 等在植物體也發(fā)現(xiàn)了受精現(xiàn)象，并證明生殖細(xì)胞的染色體也比體細(xì)胞少一半。1905 年Wilson 發(fā)現(xiàn)性別與染色體的關(guān)系。1910 年摩爾根（Morgan）做了大量的實驗遺傳學(xué)工作，證明基因是決定遺傳性狀的基本單位，而且直線排列在染色體上，建立了基因?qū)W說。1943年用高速離心機從活細(xì)胞內(nèi)把核和各種細(xì)胞器，如線粒體、葉綠體分離出來，分別研究它們的生理活性161。（三）細(xì)胞化學(xué)161。當(dāng)前細(xì)胞組分分離技術(shù)、放射自顯影術(shù)和超微量分析等方法的廣泛應(yīng)用，對細(xì)胞細(xì)胞的統(tǒng)一性與多樣性一、細(xì)胞是生命活動的基本單位（一）一切有機體都由細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞是構(gòu)成有機體的基本單位（二）細(xì)胞具有獨立的、有序的、自控代謝體系，細(xì)胞是代謝與功能的基本單位（三）細(xì)胞是有機體生長與發(fā)育的基礎(chǔ)（四）細(xì)胞是遺傳的基本單位，細(xì)胞具有遺傳的全能性（五）沒有細(xì)胞就沒有完整的生命（六）關(guān)于細(xì)胞概念的一些新思考二、細(xì)胞的基本共性第二節(jié) 原核細(xì)胞與古細(xì)胞 一、最小、最簡單的細(xì)胞――支原體支原體的特征：161。161。這此特征與作為非細(xì)胞形態(tài)的病毒是根本不相同的。161。因為它沒有細(xì)胞壁，形態(tài)可以隨機變化。9．支原體的環(huán)狀雙螺旋DNA 較均勻地散布于細(xì)胞 N乙酰胞壁酸NAM分子上有四肽側(cè)鏈，相鄰聚糖纖維之間的短肽通過肽橋（革蘭氏陽性菌）或肽鍵（革蘭氏陰性菌）橋接起來，形成了肽聚糖片層，像膠合板一樣，粘合成多層。鞭毛是某些細(xì)菌的動物器官，鞭毛的結(jié)構(gòu)與真核生物的鞭毛完全不一樣，結(jié)構(gòu)十分簡單，是由一種稱為鞭毛蛋白（flagellin）的彈性蛋白所構(gòu)成。普通菌毛與細(xì)菌吸附和侵染宿主有關(guān)；性菌毛為中空管子，與傳遞遺傳物質(zhì)有關(guān)。部分附著在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，大部分游離于細(xì)胞質(zhì)中。由大亞單位(50S)與小亞單位(30S)組成。，可進行自主復(fù)制的遺傳因子，是裸露的環(huán)狀DNA分子，所含遺傳信息量為2~200個基因。細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的重要物質(zhì)，特別是DNA，積聚在細(xì)胞的一端，形成一種含水量較豐富的致密體，外被很厚的壁，內(nèi)生孢子折光性很強，不易染色，具有度過惡劣環(huán)境的能力，可以在殺死普通細(xì)菌或營養(yǎng)型細(xì)菌的條件下依然存活。 161。161。藍(lán)藻比其它原核細(xì)胞大，直徑一般為10μm，甚至有的達(dá)70μm。1. 中心質(zhì)161。故有人稱藍(lán)藻的中心質(zhì)具有161。的性質(zhì)。藻膽蛋白包括藻藍(lán)蛋白、異藻藍(lán)蛋白（內(nèi)含有藻藍(lán)素）和藻紅蛋白（內(nèi)含有藻紅素）3 類。藍(lán)藻的光合作用效率低，因為它僅含有葉綠素a，而真核細(xì)胞含葉綠素a、b。藍(lán)藻細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有許多各具特點的內(nèi)含物，如藍(lán)藻淀粉、脂滴、藍(lán)藻顆粒體、多磷酸酯體、多角體等等。161。鞘內(nèi)有豐富的纖維絲狀結(jié)構(gòu)分布在不定形基質(zhì)中上，這些纖維的方向隨種的不同而具有不同的特征。它們的繁殖主要靠細(xì)胞分裂，分裂時細(xì)胞中部向內(nèi)生長新橫隔壁，將中心質(zhì)與原生質(zhì)分為兩半。以甲硫氨酸起始蛋白質(zhì)的合成，核糖體對氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核細(xì)胞的相似、 具有內(nèi)