【正文】 徑（莽草酸途徑），莽草酸是這3種氨基酸的共同前體，分支酸是芳香族氨基酸合成途徑的分支點(diǎn)。 直接發(fā)酵法是目前生產(chǎn)賴氨酸的主要方法。氫離子的親和力隨樹脂交換基團(tuán)性質(zhì)而異，取決于樹脂交換基團(tuán)與H+所形成的酸的酸性強(qiáng)弱在高濃度時(shí)，不同離子的親和力差異顯著減少氨基酸與酸堿兩種樹脂都能發(fā)生交換? 離子交換法從復(fù)雜的混合物中，分離性質(zhì)相似大分子的方法之一，依據(jù)的原理是物質(zhì)的酸堿性、極性，也就是所帶陰陽離子的不同。在相同條件下，影響谷氨酸晶型的關(guān)鍵因素是加酸速度等電點(diǎn)工藝類型帶菌體直接常溫等電點(diǎn)法帶菌體冷凍低溫一次等電點(diǎn)法除菌體常溫等電點(diǎn)法濃縮水解等電點(diǎn)法低溫濃縮等電點(diǎn)法從結(jié)晶方法分類：逐步起晶法和連續(xù)結(jié)晶法（即當(dāng)量中和法）離子交換法提取谷氨酸的基本理論目前味精廠均采用732強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂，利用陽離子交換樹脂對(duì)谷氨酸陽離子的選擇性吸附，使發(fā)酵液中妨礙谷氨酸結(jié)晶的殘?zhí)羌疤堑木酆衔铮鞍踪|(zhì)、色素等非離子性雜質(zhì)得以分離，后經(jīng)洗脫達(dá)到濃縮提取谷氨酸的目的。介穩(wěn)區(qū)決定晶核的成長(zhǎng)，不穩(wěn)區(qū)決定晶核的形成，故投種要注意時(shí)間。在4%以上，等電提取容易，收率高；－%常溫下不易達(dá)過飽和狀態(tài)，結(jié)晶生成速度慢，難形成晶核或晶核數(shù)量極少。谷氨酸的溶解度pH對(duì)Glu溶解度的影響溫度對(duì)Glu溶解度的影響其他雜質(zhì)的影響：有其他氨基酸會(huì)導(dǎo)致谷氨酸溶解度增加雜質(zhì)對(duì)Glu溶解度的影響在等電點(diǎn)操作過程中，溶液中g(shù)lu逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)檫^飽和狀態(tài)，過量的溶質(zhì)便結(jié)晶析出。低溫提取谷氨酸）等電－離交法等電點(diǎn)－離子交換、等電點(diǎn)－鋅鹽法總回收率可達(dá)85%。谷氨酸的提取發(fā)酵液中不僅有目的產(chǎn)物谷氨酸，還有菌體、殘?zhí)?、色素、膠體物質(zhì)及其他副產(chǎn)物工藝選擇原則：簡(jiǎn)單、操作方便、原料價(jià)格低廉、來源豐富、產(chǎn)品純度高、勞動(dòng)強(qiáng)度小、設(shè)備簡(jiǎn)單、造價(jià)低、盡量不造成或減少對(duì)環(huán)境的污染　谷氨酸發(fā)酵液的性質(zhì)發(fā)酵液呈淺黃色漿體、表面浮有少許泡沫、發(fā)酵溫度一般為3436,－，近中性。同時(shí)提高氧的傳遞速率，提高溶氧水平。缺點(diǎn)及解決措施：糖濃度高，滲透壓大，菌體不適應(yīng)。 不能生成細(xì)胞膜合成所需物質(zhì)224。 蒸汽間接殺菌224。工藝特點(diǎn)發(fā)酵穩(wěn)定，較粗放，不易染菌，產(chǎn)酸時(shí)間提前，發(fā)酵周期縮短(30h左右)初糖8%，滲透壓低，粘度小，氧傳遞系數(shù)大，有利于菌體生長(zhǎng)和胞內(nèi)谷氨酸向胞外滲透，且谷氨酸合成酶系的酶活均顯著提高，直到發(fā)酵終了時(shí)仍能保持較高水平低糖流加工藝，接種量大，縮短了長(zhǎng)菌期和發(fā)酵周期。最高風(fēng)量比一次糖發(fā)酵法高50%100%.溫度控制開始控制溫度3032℃，之后每隔56h升一度。有時(shí)需要補(bǔ)加12次適量的青霉素。發(fā)酵控制劑：，添加35U/mL青霉素之后，視OD值凈增、菌體有否變形、耗糖等情況，考慮是否需再補(bǔ)加一次或兩次青霉素添加青毒素的時(shí)間與量青霉素必須在細(xì)胞對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的早期加入，確保在加入青霉素后，菌體培增，由長(zhǎng)菌型細(xì)胞向產(chǎn)酸型細(xì)胞轉(zhuǎn)化。生產(chǎn)過程中，根據(jù)生產(chǎn)菌在發(fā)酵過程中的代謝特點(diǎn)及其變化，由排氣中CO2含量，反饋控制通氣強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn)排氣中CO2含量恒定(13%左右)。、產(chǎn)酸速率明顯下降；發(fā)酵后期，OD值下降，菌體發(fā)生自溶?；驹戆l(fā)酵期間，向發(fā)酵培養(yǎng)基中添加吐溫60，高級(jí)飽和脂肪酸(C1618)及其親水醇酯類，對(duì)脂肪酸的合成有拮抗作用，控制磷脂合成，形成不完全的細(xì)胞膜，谷氨酸向膜外泄漏能力增強(qiáng)。消泡劑消泡的機(jī)理破泡：降低表面張力抑泡：抑泡劑分子優(yōu)先被吸附，除去發(fā)泡劑的吸附層，使表面粘度局部地方顯著降低。泡沫表面積、溫度、pH、溶液濃度。除控制補(bǔ)料速度外，在工業(yè)上，還可采用調(diào)節(jié)溫度(降低培養(yǎng)溫度可提高溶氧濃度)、液化培養(yǎng)基、中間補(bǔ)水、添加表面活性劑等工藝措施，來改善溶氧水平。生物素濃度濃度增加，耗糖速度增大，需要增加供氧。谷氨酸生成期，在細(xì)胞最大呼吸速率時(shí)，谷氨酸產(chǎn)酸量最大。第二類包括異亮氨酸、賴氨酸、蘇氨酸和天冬氨酸等天冬氨酸系氨基酸，供氧充足可得最高產(chǎn)量，但供氧受限，產(chǎn)量受影響并不明顯；其合成途徑是產(chǎn)生NADH的乙醛酸循環(huán)或消耗NADH的磷酸烯醇式丙酮酸羧化系統(tǒng)，產(chǎn)生的NADH量不多，因而與供氧量關(guān)系不明顯。v 不同的代謝途徑產(chǎn)生不同數(shù)量的NAD(P)H，再氧化所需要的溶氧量不同。供氧對(duì)谷氨酸發(fā)酵的影響臨界溶解氧濃度好氣微生物對(duì)培養(yǎng)液中溶解氧濃度的最低要求，在某一濃度以下，微生物的呼吸速率隨溶解氧降低而顯著下降，此溶解氧濃度稱為臨界溶解氧濃度。，在將近放罐時(shí)，為了后工序提取谷氨酸。例如 中性和微堿條件下積累谷氨酸，在酸性條件下形成谷氨酰胺和N乙酰谷氨酰胺。,－微量元素微量元素是指微生物需要量十分微小，但又不可完全沒有的元素錳是某些酶的激活劑，羧化反應(yīng)必需錳，如谷氨酸生物合成途徑中，草酰琥珀酸脫羧生成α酮戊二酸是在錳存在下完成的。G為4－5ppm，鎂離子濃度為2590mg/Kg硫是含硫氨基酸的組成成分，構(gòu)成酶的活性基團(tuán)。2. 硫酸鎂功能葉綠素的組成成分。無機(jī)鹽功能構(gòu)成菌體成分、酶的組成成分、酶的激活劑或抑制劑、調(diào)節(jié)培養(yǎng)基滲透壓、調(diào)節(jié)pH和氧化還原電位等。氮源種類及添加方式氮源分類有機(jī)氮（蛋白質(zhì)、胨、氨基酸等，谷氨酸發(fā)酵的有機(jī)氮源常用玉米漿、麩皮水解液、米糠水解液、豆餅水解液和糖蜜等）無機(jī)氮（尿素、液氨、氨水、碳酸氫銨、硫酸銨、氯化銨和硝酸銨等）菌體利用無機(jī)氮比有機(jī)氮快速，銨鹽、尿素、氨水等比硝基氮優(yōu)越，因?yàn)橄趸柘冉?jīng)過還原才能被利用。當(dāng)碳氮比在100：11以上才開始累積谷氨酸，在谷氨酸發(fā)酵中，用于合成菌體的氮　僅占總耗用氮的3－8%，而30－80%用于合成從谷氨酸。發(fā)酵糖濃度選擇一般控制在125－150g/L，產(chǎn)酸55－70g/L采用一次高糖發(fā)酵工藝（糖濃度170－190g/L），產(chǎn)酸可達(dá)80g/L。二級(jí)種子培養(yǎng)目的：獲得發(fā)酵所需的足夠數(shù)量的菌體為發(fā)酵培養(yǎng)基的配制原則供給菌體生長(zhǎng)繁殖和谷氨酸生產(chǎn)所需要的適量的營(yíng)養(yǎng)和能源原料來源豐富，價(jià)格便宜，發(fā)酵周期短，對(duì)產(chǎn)物提取無妨礙等碳 源目前采用的谷氨酸產(chǎn)生菌均不能利用淀粉，只能利用葡萄糖、果糖、蔗糖和麥芽糖等，有些能利用醋酸、乙醇、正烷烴。另一方面，種子培養(yǎng)基應(yīng)盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基接近，以適合發(fā)酵的需要。經(jīng)常進(jìn)行菌種分離純化，提供新的菌株供生產(chǎn)使用。固定CO2的情況：1 乙酰CoA濃度增加，與F16P共同激活PEP羧化酶；2 乙酰CoA氧化，產(chǎn)生的ATP抑制丙酮酸激酶。關(guān)閉DCA 2224。青霉素誘變育種的基本過程：選擇選擇合適的出發(fā)菌株 制備待處理的菌懸液 誘變處理 篩選 保藏和擴(kuò)大試驗(yàn)出發(fā)菌株：(1)要有一定的目標(biāo)產(chǎn)物的生產(chǎn)能力(2)對(duì)誘變劑敏感(3)生產(chǎn)性能好，如生長(zhǎng)快、營(yíng)養(yǎng)要求低、產(chǎn)孢子多且早，最好是生產(chǎn)上自然選育的菌株。北京棒桿菌(7338)與鈍齒棒桿菌(B9)的比較天津短桿菌(T613)與鈍齒桿菌(B9)的比較 目前味精行業(yè)采用的主要菌株 鈍齒棒桿菌B9和天津短桿菌TG866是我國(guó)味精行業(yè)生產(chǎn)上的重要菌種。 折斷分裂。不運(yùn)動(dòng)。 單個(gè)、成對(duì)及“V”字形排列。胞內(nèi)有橫隔。賴氨酸總產(chǎn)量的65%、蛋氨酸的63%和蘇氨酸的55%均為亞太地區(qū)國(guó)家所消費(fèi)。水、電、汽消耗也較國(guó)外高生產(chǎn)規(guī)模：日本最大單罐體積達(dá)500m3,我國(guó)僅200m3,多數(shù)廠為50m3,小的人有20m3每立方米發(fā)酵罐年產(chǎn)量，日本為20t，我國(guó)為5－8t污染：國(guó)外已普遍地對(duì)味精廢液進(jìn)行綜合利用，我國(guó)在培養(yǎng)單細(xì)胞蛋白方面已取得成功，但應(yīng)用不廣。目前應(yīng)用酶法生產(chǎn)的氨基酸有10多種，如L－丙氨酸、L－色氨酸、L－絲氨酸等。目前DL－蛋氨酸、甘氨酸、DL－丙氨酸等就采用此方法生產(chǎn)。73味精溶解后渾濁的原因及解決措施（1）產(chǎn)生原因①硫化鈉過量②消泡劑過量 ③含有DL谷氨酸鈉 ④原材料質(zhì)量差
（2）解決措施①中和、結(jié)晶操作規(guī)范 ②控制硫化鈉質(zhì)量和用量③控制消泡劑用量 ④控制原材料質(zhì)量74味精帶有顏色的原因及解決措施產(chǎn)生原因
味精發(fā)黃 料液脫色不徹底，帶有色素；味精分離不干，母液帶入味精，使色素增加；味精干燥溫度過高或過長(zhǎng)，引起焦化變質(zhì)；洗活性炭中殘留谷氨酸鈉時(shí)，將被吸附的色素解析出來；烘盤布清洗不干凈，出現(xiàn)底層發(fā)黃
味精發(fā)紅 母液除鐵不干凈；母液接觸鐵器或味精將誒出鐵器；活性炭再生不完全，鐵離子沒清除徹底味精發(fā)灰發(fā)青 發(fā)灰：活性炭帶入味精中 發(fā)青：硫化鈉過量
味精久放變黃 料液除鐵不徹底，帶入成品；谷氨酸含殘?zhí)歉?，帶入成品解決措施 加強(qiáng)脫色操作；加強(qiáng)結(jié)晶操作，合理控制參數(shù)；加強(qiáng)分離操作；采用振動(dòng)式干燥器；采用樹脂除鐵；提高谷氨酸質(zhì)量；控制好硫化鈉用量75味精發(fā)臭的原因及解決措施產(chǎn)生原因：室內(nèi)衛(wèi)生差，母液染菌變質(zhì)，帶入味精；活性炭渣子和洗水沒及時(shí)處理，導(dǎo)致雜菌繁殖；母液存放時(shí)間長(zhǎng)或存放母液的容器長(zhǎng)時(shí)間沒用清洗，雜菌繁殖；全中和操作時(shí)泡沫溢出，回收時(shí)帶入雜菌；濕谷氨酸堆放時(shí)間長(zhǎng)，長(zhǎng)菌霉變
解決措施 搞好環(huán)境衛(wèi)生；母液和濕谷氨酸及時(shí)處理；設(shè)備及時(shí)清洗
76強(qiáng)力味精是哪些呈味核苷酸按不同比例與谷氨酸鈉混合制成的添加了5′鳥苷酸、5′肌苷酸，或兩者的混合物77脫敏作用定義經(jīng)特定處理后，不喪失酶活性而失去對(duì)變構(gòu)效應(yīng)物的敏感性，稱脫敏作用78酶活性的控制方法終產(chǎn)物的抑制或激活；輔酶水平的活性調(diào)節(jié)；酶原的活化；潛在酶的活化79氨基酸發(fā)酵代謝控制中，酶活性調(diào)節(jié)的類型有哪些？P226變構(gòu)效應(yīng) 共價(jià)修飾寡聚酶的解聚、蛋白質(zhì)水解激活等氨基酸生產(chǎn)方法蛋白質(zhì)水解、抽提法 　　以豆粕為原料，采用酸水解大豆蛋白的方法來獲取氨基酸。晶核的形成叫做起晶起晶方法 自然起晶 刺激起晶 晶種起晶67飽和溶液、過飽和溶液和過飽和系數(shù)概念。生產(chǎn)上要求使用含鹽分少的碳酸鈉或固體氫氧化鈉進(jìn)行中和中和時(shí)純堿用量：1mol碳酸鈉可中和2mol谷氨酸，即106g碳酸鈉可中和147*2=，才能達(dá)到谷氨酸完全中和59谷氨酸中和液中色素的來源淀粉制糖、培養(yǎng)基滅菌、發(fā)酵液濃縮等。強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂對(duì)谷氨酸發(fā)酵液中各種離子親和力大小Ca2+Mg2+K+NH4+Na+AlaLeuGluAsp51離子交換樹脂的離交過程有五步，非別為？P145（1） 溶液中谷氨酸離子通過溶液向樹脂表面擴(kuò)散（2） 谷氨酸離子穿過樹脂表面向樹脂內(nèi)部擴(kuò)散（3） 谷氨酸離子與樹脂上活性基團(tuán)的可交換離子氫離子進(jìn)行離子交換（4） 交換下來的氫離子從樹脂內(nèi)部像樹脂表面擴(kuò)散（5） 氫離子從樹脂表面擴(kuò)散到溶液中52結(jié)柱的定義及離子交換樹脂提取谷氨酸時(shí)，產(chǎn)生結(jié)柱現(xiàn)象的原因及防止方法。1．空氣的凈化（1）減少濾前空氣的塵粒（2）減少濾前空氣的油水含量（3）保證壓縮空氣的溫度（4）妥善裝填過濾介質(zhì)（5）選用高效濾材（6）保持一定的氣流速度（1）合理調(diào)配培養(yǎng)基（2）保證滅菌溫度和時(shí)間（3）保證設(shè)備無積污和滲漏（4）保證流動(dòng)蒸汽質(zhì)量（5）減少泡沫（6）正確進(jìn)行空氣保壓（1）防止軸封滲漏（2）合理安裝罐內(nèi)設(shè)備（3）合理安裝管路（4）閥門的連接（5）管路的布置（6）管路的試漏（7）管路的吹洗（1）嚴(yán)格進(jìn)行斜面和搖瓶菌種的無菌操作（2）嚴(yán)格進(jìn)行種子罐的無菌操作
42污染噬菌體后的挽救措施（1）并罐法（2）菌種輪換或使用抗性菌株（3）放罐重消法（4）罐內(nèi)滅噬菌體法
43提煉的概念P127將谷氨酸生產(chǎn)菌在發(fā)酵過程中積累的L谷氨酸從發(fā)酵液中提取出來，再進(jìn)一步中和，除鐵、脫色、加工精制成谷氨酸單鈉鹽（俗稱味精）的過程稱為谷氨酸的提煉44生產(chǎn)上選擇谷氨酸提取工藝的原則是：工藝簡(jiǎn)單、操作方便、所用原材料價(jià)格低廉，來源豐富、提取收率高、產(chǎn)品純度高、勞動(dòng)強(qiáng)度小、盡量不造成或減少環(huán)境污染。8~9小時(shí)感染，OD值不長(zhǎng)，pH上升，泡沫增大，耗糖慢，不產(chǎn)酸等噬菌體污染現(xiàn)象(2)發(fā)酵前期污染噬菌體
①吸光度開始上升后下降，甚至4~8h內(nèi)OD值下跌到零以下②pH逐漸上升，不再下降，CO2迅速下降OD值下跌pH上升等③耗糖緩慢或停止，也有時(shí)會(huì)出現(xiàn)睡眠病現(xiàn)象，發(fā)酵緩慢，周期長(zhǎng)，提取困難④產(chǎn)生大量泡沫，發(fā)酵液黏度大，甚至呈現(xiàn)黏膠狀，可拔絲，發(fā)酵液發(fā)紅，發(fā)灰，有刺激性氣味⑤谷氨酸產(chǎn)量甚少⑥鏡檢時(shí)可發(fā)現(xiàn)菌體數(shù)量顯著減少，菌體不規(guī)則，缺乏八字排列，發(fā)圓⑦平板檢查有噬菌體斑，搖瓶檢查發(fā)酵液清稀，⑧二次種子營(yíng)養(yǎng)要求逐漸加多種齡延長(zhǎng)⑨送往提取車間的發(fā)酵液發(fā)紅，發(fā)灰，有刺激性氣味，黏度大，泡沫大⑩精制中和時(shí)色素深，泡沫大，堿加不進(jìn)去，過濾困難(3)發(fā)酵后期污染噬菌體
對(duì)產(chǎn)酸影響不大，甚至有時(shí)竟有提高產(chǎn)酸的趨勢(shì)40染菌的分析（1）從染菌時(shí)間分析：早期：培養(yǎng)基滅菌不徹底、種子帶菌等；中后期：設(shè)備滲漏、空氣系統(tǒng)。谷氨酸發(fā)酵的有機(jī)氮源常用玉米漿、麩皮水解液、豆餅水解液和糖蜜等。（3）從一些發(fā)酵制品中分離目的菌株。棒狀桿菌屬、短桿菌屬、小桿菌屬及節(jié)桿菌屬中的細(xì)菌17谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)菌的主要生化特點(diǎn)。①生物素亞適量②添加表面活性劑、高級(jí)飽和脂肪酸或青霉素③選育溫度敏感突變株、油酸缺陷型或甘油缺陷型突變株15谷氨酸生產(chǎn)菌的育種思路（1）.切斷或減弱支路代謝（2）解除自身的反饋抑制(3).增加前體物的合成 (4).提高細(xì)胞膜的滲透性 (5).強(qiáng)化能量代謝(6).利用基因工程技術(shù)構(gòu)建谷氨酸工程菌株
16現(xiàn)有谷氨酸生產(chǎn)菌主要有哪四個(gè)菌屬。（2）由自然界采集樣品，如土壤、水、動(dòng)植物體等，從中進(jìn)行分離篩選。谷氨酸產(chǎn)量隨糖濃度的增加而增加氮源 無機(jī)氮源: (1)尿素(2) 液氨(3)氨水 有機(jī)氮源:主要是蛋白質(zhì)、胨、氨基酸等。31谷氨酸發(fā)酵不同階段對(duì)PH的要求：、 、