【正文】 塊不能萌發(fā)或萌發(fā)后菌絲逐漸萎縮。（四）添加尿素的影響 菌種培養(yǎng)基種添加尿素，能夠補(bǔ)充氮素的不足。堅(jiān)持隨拌料隨裝瓶，及時(shí)滅菌防止堆肥變酸。堆肥偏干。其原因是:一是接種工具灼燒后未冷卻就挖取菌種塊，菌絲被燙死或菌絲過(guò)火焰時(shí)被火焰燒死。如緊鄰幾瓶的種塊全部滋生雜菌，可能是母種帶雜菌或接種工具灼燒滅菌不嚴(yán)。（三）檢查污染 發(fā)現(xiàn)污染雜菌應(yīng)及時(shí)采取措施。培養(yǎng)室要求保持空氣干燥、清潔、避強(qiáng)光，留有能啟閉的通風(fēng)口，空氣流通無(wú)死角。其質(zhì)量監(jiān)控是全程的，目的是要把所有的問(wèn)題消滅在產(chǎn)品出廠之前。在母種使用前和栽培種生產(chǎn)后作試驗(yàn)性栽培，如果試種出現(xiàn)問(wèn)題，那么這批菌種就要被銷(xiāo)毀。每一個(gè)菌種袋都由電腦打上日期及有關(guān)菌株的代號(hào)等。對(duì)每個(gè)用作母種的菌株都做生長(zhǎng)質(zhì)量、栽培性狀和遺傳特征等分析。除亞洲以外，Sylvan在各大洲均設(shè)有分公司，共有300多名科技人員與熟練工人參與菌種研究、生產(chǎn)以及售后服務(wù)。尤其是由Kerrigan博士領(lǐng)導(dǎo)的賓州實(shí)驗(yàn)室，有一個(gè)稀有的野生菇及商業(yè)菌株基因庫(kù)。瑞士Hauser實(shí)驗(yàn)室有2個(gè)基地：1個(gè)在的蘇黎士附近；另1個(gè)是眾所周知的白色皇后公司，位于英國(guó)倫敦北部約160公里處。五、國(guó)外的菌種公司國(guó)外的小型菇場(chǎng)都是購(gòu)買(mǎi)大公司的菌種，他們認(rèn)為這樣不但菌種質(zhì)量有保障，從經(jīng)濟(jì)上也更合算。選用這些碳源和氮源培養(yǎng)蘑菇液體菌種，菌絲生長(zhǎng)量較大，100～200升發(fā)酵罐一般供氧培養(yǎng)4天左右即可。⑥售價(jià)33000元/臺(tái)。用作種源的液體菌種一定要純凈，未受細(xì)菌和霉菌的污染，菌絲球要密實(shí)，每毫升液體菌種含菌絲球1000～3500個(gè)。一般的谷粒菌種要用谷粒培養(yǎng)物作種源，制種所需時(shí)間就較長(zhǎng)。每接完一支試管，接種耙要重新消毒，防止交叉感染。接種前，首先把接種室(箱)打掃干凈，噴2%來(lái)蘇爾或新潔爾滅凈化空氣，再把已滅菌的菌種瓶及用具全部搬進(jìn)去，然后按常規(guī)對(duì)接種室(箱)進(jìn)行嚴(yán)格消毒。保壓2小時(shí)，或在2千克蒸汽壓力下，～3小時(shí)。裝料過(guò)緊，瓶?jī)?nèi)透氣性差，發(fā)菌困難，料裝好后，用錐形木棒朝料中部打下洞穴，深達(dá)瓶底，以提高瓶?jī)?nèi)透氣性和固定接種塊。由于草料蓬松，不易入瓶，所以要手抓料置于瓶口，用另一手緊握木捧將草料壓入瓶?jī)?nèi)并塞緊。以防吐黃水。如果草料在攤曬時(shí)被雨淋過(guò)或質(zhì)地欠佳，還可以加入1%左右的發(fā)酵糞肥，或添加1%的硫酸銨等。尤其是氣生型菌株，如糞草料偏熟，會(huì)造成菌絲徒長(zhǎng)，形成菌被。糞肥用豬、牛糞等均可，要求先曬干、粉碎后使用。其制作要點(diǎn)如下: 發(fā)酵糞草料培養(yǎng)基堆制方法與蘑菇栽培堆肥堆制方法基本相同，一般糞草比例為5:5或4:6。高溫干燥天氣生產(chǎn)時(shí)，瓶口料可適當(dāng)補(bǔ)點(diǎn)封口水，且滅菌后，要及時(shí)冷卻接種，以避免瓶口失水偏干，不利菌絲定植。其堆制過(guò)程與制法（1）相似，堆制結(jié)束后曬干備用。經(jīng)分裝后滅菌，一般2千克蒸汽壓力保持2～。其間翻堆3次，第1次翻堆時(shí)加入另一半石膏粉，第2次翻堆時(shí)加入過(guò)磷酸鈣，第3次翻堆時(shí)用石灰水調(diào)整pH值。用棉籽殼作培養(yǎng)基生產(chǎn)蘑菇菌種，具有發(fā)菌快，菌絲粗壯，生命力強(qiáng)，吃料封面迅速等優(yōu)點(diǎn)，一般1瓶棉籽殼菌種可代替2～。 麥粒結(jié)構(gòu)緊實(shí)，熱穿透作用慢，滅菌時(shí)間要長(zhǎng)，滅菌方式以高壓滅菌效果較理想。糞草要在麥粒吹晾前4小時(shí)左右，用石灰清水預(yù)濕，pH值8左右，含水量為55%左右。常用的填充料有糞草、泥土、谷糠、谷殼等。含水過(guò)低，質(zhì)地硬，菌絲穿透難，繁殖數(shù)量少，播種后易染菌。麥粒吸水量控制的標(biāo)準(zhǔn)是，每100千克麥粒吸水吹晾后，濕重達(dá)136～140千克為度。一般以經(jīng)過(guò)休眠階段的隔年陳麥浸泡效果好，吸水軟化快。三、原種及栽培種的生產(chǎn)原種是將母種轉(zhuǎn)接于裝有堆肥的菌種瓶或袋中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)的菌種(二級(jí)種)。因此，制做母種篩選合適的培養(yǎng)基配方非常重要。（四）母種的培養(yǎng) 將接種后的試管放入25℃的培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，一般需要15～20天的培養(yǎng)，菌絲才能長(zhǎng)滿(mǎn)試管斜面。（3）半氣生型菌株 分離這類(lèi)菌株時(shí)，要挑選氣生菌絲和基內(nèi)菌絲生長(zhǎng)相對(duì)均衡的單菌落，移植部位的貼生菌絲要求排列稀而清晰，呈線(xiàn)束狀。在顯微鏡下觀察，菌絲具有節(jié)間短、分枝多。轉(zhuǎn)管移植時(shí)，種塊附著的基質(zhì)不要太厚。操作技術(shù)如下: 接種前先將接種用具、培養(yǎng)基以及菌種等放到接種箱(或接種室)內(nèi)，然后按每立方米用高錳酸鉀5克，40%甲醛溶液10毫升的量進(jìn)行熏蒸消毒30分鐘，如有紫外線(xiàn)滅菌燈，同時(shí)開(kāi)啟照射30分鐘后進(jìn)行接種。 趁熱將試管一端墊放到木條上，使其成一定角度的斜面，一般斜面長(zhǎng)度達(dá)試管全長(zhǎng)的1/2為宜。松緊度以提起棉塞試管不脫落適為宜。標(biāo)準(zhǔn)的棉塞應(yīng)是塞頭較大，不易變形，入管的部分占塞總長(zhǎng)的2/3，露在管外的部分則為1/3(不少于l厘米) 。（二）制作試管斜面 選擇優(yōu)質(zhì)馬鈴薯，去皮(挖去芽眼),切成薄片，稱(chēng)取200克，加水1000毫升放入小鋁鍋內(nèi)煮沸20～30分鐘，趁熱用3層紗布過(guò)濾后取濾液,并用熱水補(bǔ)充到1000毫升，倒回小鋁鍋內(nèi)。，葡萄糖20克，蛋白胨3克，維生素B120毫克，瓊脂20克，水1000毫升。須指出，即使是最純品的瓊脂，也仍然會(huì)含有微量的含氮化合物及殘存無(wú)機(jī)鹽，因此在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)要求精確的實(shí)驗(yàn)中不用瓊脂。由于用瓊脂配制的固體培養(yǎng)基清晰透明，便于觀察菌絲的形態(tài)，故成為常規(guī)斜面域平板培養(yǎng)基不可缺少的材料。（一）培養(yǎng)基配方 母種培養(yǎng)基常用瓊脂做凝固劑，其又名洋菜或凍粉，從海藻石花菜或其他紅藻中提取加工而成，為透明、無(wú)味、粉條或粉末狀。母種也叫一級(jí)種，由于菌絲生長(zhǎng)在試管的斜面上，所以又稱(chēng)為試管種或斜面種。一般來(lái)說(shuō)，凡是長(zhǎng)期從事蘑菇制種生產(chǎn)、實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)豐富的專(zhuān)業(yè)工作者用肉眼就能鑒定所分離的菌株是不是所需的蘑菇菌株。圖42 蘑菇孢子彈射分離裝置2. 褶片粘貼法 在無(wú)菌條件下取一小塊子實(shí)體組織，蘸少量無(wú)菌瓊脂或漿糊，粘附于試管培養(yǎng)基斜面的對(duì)面玻壁上(圖43)，加棉塞后在20℃左右靜置，菌孔組織中的孢子會(huì)彈射到斜面培養(yǎng)基上，再去掉試管壁上的菌塊，經(jīng)進(jìn)一步培養(yǎng)獲得多孢子萌發(fā)的菌絲體。圖41 組織分離法（二）孢子分離 孢子分離為有性繁殖，所獲菌種已經(jīng)發(fā)生遺傳重組等變異，生產(chǎn)性狀有可能優(yōu)于母體，也有可能劣于母體。這些方法一般由科研單位采用，所分離的菌種須經(jīng)出菇品比試驗(yàn)，成功后才能推廣應(yīng)用。保持土層濕潤(rùn)而不發(fā)白，含水量在15%左右，這是爭(zhēng)取氣生型菌株高產(chǎn)的關(guān)鍵措施之一。 氣生型菌株對(duì)病蟲(chóng)害的抗性較弱，所以菇房的消毒工作要加強(qiáng)，衛(wèi)生清理要日?；貏e是出菇階段要防止菇房經(jīng)常處在高溫高濕的環(huán)境中。播種期一般比貼生型菌株推遲5天，而貼生型菌株播種后則能承受2～3天的28～33℃高溫。氣生型菌株與貼生型菌株相比，耐濕性較差，土層菌絲生長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)2天，出菇晚3天左右。 氣生型菌株的基質(zhì)內(nèi)菌絲較少，菌絲細(xì)胞的酶活性相對(duì)較弱，堆肥中要多使用有機(jī)肥，少用化肥，建堆時(shí)碳氮比宜控制在30～33，采用二次發(fā)酵的堆肥，氣生型菌株要求前發(fā)酵堆期為14天，貼生型菌株為12天。與貼生型菌株相比，基質(zhì)含水量要減少2%以上，一般控制在50%55%。因此，配制氣生型原種和栽培種基質(zhì)時(shí)，要控制好基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)配比和腐熟度。生產(chǎn)實(shí)踐表明，氣生型菌株與貼生型菌株在制種和栽培技術(shù)上有所不同，需要采取以下相應(yīng)的技術(shù)措施： 培養(yǎng)氣生型母種時(shí)，要求基質(zhì)略硬略干一點(diǎn)，如1000毫升斜面基質(zhì)內(nèi)，瓊脂用量要比貼生型母種增加l克。因此在選用蘑菇菌株時(shí)，必須對(duì)所用菌株的外觀特征盡量了解，并對(duì)所用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件加以分析和比較，以免判斷失誤。半氣生型菌株又名半貼生型或半匍匍型菌株。貼生型菌株又名匍匍型菌株。這類(lèi)菌株的菌絲主要生長(zhǎng)在培養(yǎng)基表面，延伸后高出基質(zhì)表面并暴露在空氣中(俗稱(chēng)“氣生型”菌絲)，其色潔白，絨毛狀，又濃又厚。③子實(shí)體對(duì)溫度反應(yīng)敏感，21℃以上會(huì)出現(xiàn)死菇。③罐頭加工，噸耗859千克，罐藏標(biāo)準(zhǔn)一級(jí)菇約占60%～70%。經(jīng)福建省蘑菇菌種審定委員會(huì)批準(zhǔn)，自1990年起正式作為優(yōu)質(zhì)罐藏菌株推廣使用。②產(chǎn)菇適溫廣，在20～23℃持續(xù)2～3天不影響出菇。③加工預(yù)煮率為68%。②菇體中等大小，～。5. 上海1011 上海市農(nóng)科院食用菌研究所自國(guó)內(nèi)傳統(tǒng)栽培的氣生型1021菌株中選育而成。③罐頭加工 噸耗954～986千克，%，整菇率62%～77%。是大面積使用的高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)菌株。②結(jié)菇率高，出菇集中，轉(zhuǎn)潮快。適于鹽漬加工與鮮食。由上海市農(nóng)科院食用菌研究所自波蘭引進(jìn)。產(chǎn)菇一般在10千克/平方米以上。風(fēng)味淡，商品質(zhì)量欠佳，適于鹽漬加工與鮮食。（1）形態(tài)特征 ①菌絲在PDA培養(yǎng)基上呈貼生型，菌絲索狀、分枝多、分隔短，平貼基質(zhì)呈放射狀扇形蔓延。結(jié)菇力強(qiáng)，成菇率高，且后勁大。該菌株出菇較一般菌株晚3～5天。菇體基本單生，1～4潮菇產(chǎn)量結(jié)構(gòu)均勻，通常是邊長(zhǎng)菇邊扭結(jié)，因此采收要及時(shí)。近幾年該品種在福建省的栽培面積占90%以上，在全國(guó)已推廣2億多平方米，產(chǎn)菇近200萬(wàn)噸。表41 蘑菇雜交菌株生產(chǎn)性狀簡(jiǎn)介國(guó)別 選育單位 菌株名稱(chēng) 同工酶譜 主 要 特 點(diǎn)中國(guó) 福建省蘑菇菌種研究推廣站 As2796As3003As4607 HG4HG4HG4 中國(guó)廣泛使用，抗逆性強(qiáng)，鮮菇適用于罐藏或鮮銷(xiāo)。生產(chǎn)上常用的白色蘑菇品種，各主產(chǎn)國(guó)均有自己選育出來(lái)的代表品種。奶色品種菌蓋表面平滑或鱗片狀，菌柄白色，菌蓋白色或奶油色，子實(shí)體較大。如果進(jìn)行組織分離的菇體是一個(gè)變異體(概率極小)，可以作為新菌株，例如白色木耳、白色金針菇都是從自然突變的個(gè)體上組織分離的著名新品種。我國(guó)的菌號(hào)比較混亂，有些單位或個(gè)人引進(jìn)一個(gè)菌株后由于商業(yè)目的就重新編一個(gè)菌號(hào)，同一菌株在不同地方有不同的菌號(hào)，出現(xiàn)同種異名現(xiàn)象。不同菌株之間的差異可以是形態(tài)差異，也可以是農(nóng)藝性狀或是生理生化方面的差異。菌株與品種是兩個(gè)不同的概念，所有的分離培養(yǎng)物只要具有差異性，都可認(rèn)為是不同的菌株。我國(guó)農(nóng)作物品種的應(yīng)用需要經(jīng)過(guò)品比試驗(yàn)，區(qū)域性栽培試驗(yàn)，最后須經(jīng)過(guò)作物品種審定委員會(huì)評(píng)審，批準(zhǔn)后取得品種資格方可應(yīng)用于生產(chǎn)。后一個(gè)為種名，常用拉丁文形容詞表示，以描述該種的主要特征，如bisporus意為“雙孢的” 。同一種的個(gè)體之間遺傳特性相似，彼此間交配可育。蘑菇菌種的生產(chǎn)與作物種子的擴(kuò)繁有本質(zhì)的差別，其原因是菌種生產(chǎn)為無(wú)性繁殖過(guò)程，不發(fā)生遺傳重組，母種、原種和栽培種之間的基因型是不變的，所以蘑菇菌種的分級(jí)尤其是原種與栽培種的劃分是人為的。蘑菇菌種因培養(yǎng)基質(zhì)結(jié)構(gòu)不同，有固體菌種與液體菌種之分。第一節(jié) 有關(guān)菌種的概念蘑菇的“種籽”是孢子，通常所用的菌種是菌絲體，相當(dāng)于高等植物的秧苗。在英語(yǔ)中，蘑菇菌種譯為“Spawn”，此詞來(lái)源于拉丁文，為擴(kuò)大的意思，因此蘑菇接種的本意是“移植”。蘑菇菌種由三部分組成，即蘑菇菌株的純菌絲體、菌絲體著生的基質(zhì)和包裝容器。二級(jí)種、三級(jí)種。一、種、品種、菌株及菌號(hào)的區(qū)別（一）種 “種”（species）是生物分類(lèi)的基本單位，在“屬”（Genus）之下，特指具有一定形態(tài)特性和生理特性以及一定自然分布區(qū)的生物類(lèi)群。前一個(gè)為屬名，用拉丁文名詞表示，如Agaricus 意為“蘑菇屬”。農(nóng)作物品種一般指具有高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、農(nóng)藝性狀好，可人工大量栽培的品系，所以品種的定義為“具有生產(chǎn)應(yīng)用價(jià)值的菌株”。在遺傳學(xué)中一般是指自交或近親繁殖若干代后，所獲得的遺傳性狀比較穩(wěn)定的后代。菌株可作為育種材料，但不是所有的菌株都具有生產(chǎn)應(yīng)用價(jià)值。但為方便起見(jiàn)，一般均用數(shù)字表示，附在種名后面而成為菌號(hào)，例如法國(guó)的蘑菇品種F5F60；美國(guó)Sylvan公司的S1S608；荷蘭的UU2；我國(guó)的蘑菇品種As279閩1號(hào)等。一般地說(shuō)，組織分離不會(huì)改變其基因型，分離物與原栽培品種種性相同，不是新菌株。因色澤差，不適合罐藏加工，僅在少數(shù)國(guó)家局部種植。菇體為純白色，頗受市場(chǎng)歡迎，世界各國(guó)栽培的主要是這個(gè)品種。表41例舉了國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)上常用的有代表性的雜交品種。在國(guó)內(nèi)簡(jiǎn)陋的栽培條件下比較栽培，表明AS2796比美國(guó)菌株更具抗逆性。②菇體圓正、無(wú)鱗片，有半膜狀菌環(huán)，菌蓋厚，組織結(jié)實(shí)，菌裙緊密、色淡，柄中粗較直短，無(wú)脫柄現(xiàn)象，每千克鮮菇為90～100只。20℃通常不死菇。③耐水，～1厘米時(shí)重噴。是國(guó)內(nèi)最早大面積栽培的貼生型菌株。肥水不足時(shí)，菌蓋凹陷較明顯，有鱗片。②結(jié)菇率高，出菇齊，轉(zhuǎn)潮快，后期產(chǎn)量高，抗病力較強(qiáng)。法國(guó)Somycel公司育成。②菇體蓋頂略平，呈淺棕色，柄粗短，菇體組織較疏松。噴出菇水要早，原基普遍發(fā)生，呈米粒大小時(shí)，噴用出菇重水。 浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝系經(jīng)紫外線(xiàn)誘變，從S176菌株中選育出來(lái)，1985年通過(guò)輕工部鑒定。品質(zhì)較176菌株有很大改善，可作為罐藏菌株使用。③菌絲培養(yǎng)適溫20～25℃，出菇溫適10～2O℃。菌絲分隔短、分枝多，與氣生型菌株長(zhǎng)速相近。質(zhì)量能達(dá)到罐裝原料菇的要求。菌床以濕管過(guò)冬為好。 福建省輕工業(yè)研究所從罐藏優(yōu)質(zhì)氣生型8211菌株中，分離單孢選育。②菇體圓正，潔白，菌蓋厚實(shí)，無(wú)鱗片，菌裙小、色淺，菌柄粗短，不易開(kāi)傘，菇形中等偏大，每千克鮮菇80～100只。一旦發(fā)生土層菌絲板結(jié)，可采用低溫刺激或重水沖擊處理，或?qū)⑹曳壑苯尤鲇诿熬z部位，以抑制菌絲繼續(xù)板結(jié)，但切勿大動(dòng)土層或更換新土，否則將造成減產(chǎn)。此外，在菌種生產(chǎn)實(shí)踐中還常根據(jù)蘑菇菌絲在斜面培養(yǎng)基上的外觀特征，劃分為3種類(lèi)型:1．氣生型 例如上海1011菌株。這類(lèi)菌株的菌絲灰白色，稀疏或致密，緊貼培養(yǎng)基表面匍匍生長(zhǎng)，氣生菌絲極少或無(wú)，但基內(nèi)菌絲較多較深。其基內(nèi)菌絲比氣生型菌株多，但不及貼生型菌株。而貼生型菌株中，菌絲形態(tài)也有云彩狀、年輪狀或線(xiàn)索狀等多種區(qū)分。雜交型蘑菇菌株AS2796，其菌絲外觀傾向于氣生型，但與傳統(tǒng)氣生型菌絲形態(tài)有別，在菇質(zhì)上接近氣生型菌株，在產(chǎn)量上則接近貼生型菌株。培養(yǎng)氣生型原種和栽培種時(shí)，容易發(fā)生菌絲徒長(zhǎng)、早衰和吐黃水現(xiàn)象，特別是基質(zhì)養(yǎng)分過(guò)富、發(fā)酵過(guò)熱、含水量過(guò)高、裝料緊度不夠、培養(yǎng)溫度偏高、空氣濕度大、菌齡偏長(zhǎng)時(shí)，上述現(xiàn)象較為嚴(yán)重。采用麥粒、棉籽殼等基質(zhì)時(shí)，適當(dāng)加些河泥、谷殼，盡量少加或不加糞肥。氣生型菌株的菌絲香味較濃，菌種培養(yǎng)時(shí)除要避免出現(xiàn)溫高濕大的郁悶環(huán)境外，要加強(qiáng)病蟲(chóng)害管理措施。若采用常規(guī)一次發(fā)酵，氣生型菌株的堆肥堆期要比貼生型菌株長(zhǎng)2～3天，進(jìn)房時(shí)堆肥的含水量控制在55%左右，而貼生型菌株在堆肥進(jìn)房時(shí)要達(dá)到60%左右。 氣生型菌株抗熱性不及貼生型菌株，播種時(shí)堆肥溫度不宜超過(guò)28℃，最好控制在25℃左右。整個(gè)栽培期間，氣生型菌株的菌床打