弗氏檸檬酸桿菌tpl基因的體外擴(kuò)增畢業(yè)論文-全文預(yù)覽
【正文】 幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的基因得以迅速擴(kuò)增。PCR技術(shù)以驚人的速度廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)各領(lǐng)域。 PCR技術(shù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymeras chain reaction，簡(jiǎn)稱PCR）是近十幾年發(fā)展和普及最迅速的分子生物學(xué)新技術(shù)之一，是一項(xiàng)在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。為了提高LDOPA產(chǎn)量和底物轉(zhuǎn)化率，研究者們對(duì)微生物酶法合成LDOPA的工藝方法進(jìn)行了大量研究。所以越來越多的研究者開始尋求新的LDOPA獲得途徑。1913，MarcusGuggenheim從蠶豆的豆莢中第一次分離提取到天然存在于植物體內(nèi)的 LDOPA[2]。 LDOPA的衍生物多巴胺是一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)，由于多巴胺不能透過血腦屏障進(jìn)入腦組織，所以不能通過補(bǔ)充多巴胺來治療帕金森氏病，而LDOPA可以通過血腦屏障，并在腦組織中脫羧形成多巴胺，從而使腦組織中多巴胺含量增加而達(dá)到治療的目的。左旋多巴一直是帕金森病治療的金標(biāo)淮。PCR技術(shù)產(chǎn)生時(shí)間雖不長(zhǎng)，卻以驚人的速度廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)各領(lǐng)域。本實(shí)驗(yàn)是以基因組 DNA 為模板，利用PCR 技術(shù)從弗氏檸檬酸桿菌( Ci trobacter f reundii ) 中擴(kuò)增得到含有酪氨酸酚解酶（the Tyrosine Phenol Lyase，簡(jiǎn)稱TPL）基因的有效DNA 片段，得到大量的有效基因。關(guān)鍵詞：弗氏檸檬酸桿菌 TPL 基因 PCR 擴(kuò)增AbstractPolymerase Chain Reaction (PCR) is one of the mon techniques in molecular biology, which can amplify nucleic acids through the cycle of denaturation， annealing and extension. Tyrosine phenol lyase genecontaining DNA fragment was amplified from Citrobacter freundii, get a lot of effective gene using PCR technology. PCR technology generation time is not long, but it is widely used in various fields of molecular biology at an alarming rate. PCR technology can quickly and specifically any desired gene or DNA fragment was amplified, It not only can be used for gene isolation, cloning and DNA sequencing analysis can also be used for the construction of mutant and rebinant, the study of the regulation of gene expression, gene polymorphism analysis, genetic disease and infectious disease diagnosis, tumor mechanism explorationThe forensic identification, and many other aspects. PCR technology has bee a revolution on the methodology, it will greatly promote the various disciplines of molecular biology and research progress.Key words：citrobacter freundii gene PCR TPL amplification 常州工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）目錄1 前言 2 3. PCR技術(shù) 3 立題依據(jù)和研究?jī)?nèi)容 4 立題依據(jù)……………………………………………………………………………...…….4 研究?jī)?nèi)容……………………………………………………………………………...…….42實(shí)驗(yàn)原理 5 SDS法制備基因組DNA 5 瓊脂糖凝膠電泳原理 5 PCR反應(yīng)原理 63實(shí)驗(yàn)器材與步驟 8 8 83..2實(shí)驗(yàn)儀器 9 9................................................................................................................................9. SDS法制備細(xì)菌基因組DNA 10 11 PCR 124 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和注意事項(xiàng) 13 13..............................................................................................................155結(jié)論 16致謝 16參考文獻(xiàn) 161前言 酪氨酸酚裂解酶左旋多巴又稱L多巴，為酪氨酸的羥化物，在體內(nèi)是左旋酪氨酸合成兒茶酚胺的中間產(chǎn)物。未來左旋多巴新給藥方法的思路包括應(yīng)用藥物的新劑型,如經(jīng)皮鉆貼劑、鼻腔噴霧劑、咀嚼片以及緩釋劑等[1]。 LDOPA生產(chǎn)的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展 1911 年，Casimir Funk 在實(shí)驗(yàn)室中第一次成功合成 D,LDOPA。解決此問題的最好辦法是使D型和L型多巴完全分開，但D型和L型多巴的拆分非常困難。隨后，John等在蠟狀芽孢桿菌（Bucillus cereus）中也發(fā)現(xiàn)酪氨酸酶，并用來生產(chǎn)LDOPA。近年來，隨著分子生物
醫(yī)療健康相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1