【正文】 超聲波3min或在121℃高壓滅菌鍋中2030min或置沸水浴中加熱30min → 冷卻（40 ℃）+加酶混合液 → 37 ℃過(guò)夜（812小時(shí)）或4243 ℃ ，4h冷卻定容，離心過(guò)濾得到維生素B2待測(cè)液 → 堿性鐵氰化鉀，振搖10s+異丁醇10ml → 振動(dòng)45s → 留有機(jī)相 → 無(wú)水Na2SO4除去水分 →維生素B1待測(cè)液說(shuō)明：堿性鐵氰化鉀：150g含維生素BB2的食物有動(dòng)物內(nèi)臟、魚(yú)類、蠔類、臭豆腐、醬豆腐等。常以游離態(tài)或以核酸結(jié)合型存在于自然界中。測(cè)定方法選擇：①硫色素?zé)晒夥ǎ壕S生素B1氧化成硫色素；②紫外分光光度法；③偶氮染料比色法：重氮化，與對(duì)氨基苯乙酮反應(yīng)，呈紫紅色；④熒光目測(cè)法；⑤液相色譜法。遇氧化劑或還原劑很不穩(wěn)定，在干燥時(shí)較耐熱，在堿性條件下易分解，在弱酸條件下（pH=）穩(wěn)定。維生素B1能促進(jìn)胃腸功能，增進(jìn)食欲，幫助消化，消除疲勞，防止肥胖，潤(rùn)澤皮膚和防止皮膚老化。維生素C總量的測(cè)定（ 2，4二硝基苯肼法）原理：將樣品中的還原型維生素C氧化為氧化型維生素C ，氧化型維生素C與2，4二硝基苯肼法耦聯(lián)生成紅色的脎，其呈色的強(qiáng)度與濃度成正比。L的草酸溶液中進(jìn)行的，目的是保持反應(yīng)在一定的酸度環(huán)境中，避免維生素C 的氧化，同時(shí)此染料不致氧化待測(cè)液中非維生素C的還原性物質(zhì)，因此，對(duì)維生素C的測(cè)定具有一定的選擇性；干擾本法的離子有：Fe2+, Sn2+, Cu2+, SO3 2+, S2O32+ ,SO2。? 對(duì)含有其它還原性物質(zhì)的樣品，如Fe2+，可用80mlL1）， VC臨用現(xiàn)配，不能加熱。注意：2，6二氯靛酚的酸堿指示特性和氧化還原指示特性來(lái)判斷滴定終點(diǎn)，要求15s不褪色才為真正的終點(diǎn)。2，6二氯靛酚具有酸堿指示和氧化指示的良種性質(zhì)。維生素C還原型可被氧化為維生素C氧化型，維生素C氧化型仍具備一定的生理的作用。維生素分析的方法選擇微生物學(xué)測(cè)定方法生物學(xué)測(cè)定方法儀器分析的方法：熒光分析法，分光光度法，薄層層析法和高效液相色譜法等根據(jù)樣品品種，類型，待測(cè)維生素的性質(zhì)，含量以及干擾物質(zhì)的種類和多少來(lái)決定。維生素含量高低是評(píng)價(jià)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。美化皮膚,保持青春；防止血液凝固,預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化， ；防止疤痕；防止流產(chǎn)；減輕手腳抽筋、僵硬狀況；可治療生殖機(jī)能障礙 豌豆油、葵花子油、芝麻油、蛋黃、核桃、葵花子、花生米、芝麻、萵筍葉、柑橘皮、瘦肉、乳類等中較多防止膽固醇沉積；助長(zhǎng)毛發(fā)；有助于鈣的吸收；治療心臟??；可幫助減肥；防止治療粉刺；建議：以大米為主食的南方人，必須提取更多的維生素F 促進(jìn)乳汁分泌；防止寄生蟲(chóng)和食物中毒；有鎮(zhèn)痛作用；增加食欲；防止口腔潰爛；預(yù)防貧血 防止內(nèi)出血和痔瘡；冶療經(jīng)期月經(jīng)過(guò)量；促進(jìn)血液正常凝固，促進(jìn)腸胃健康功能。根據(jù)其溶解特性分為：水溶性維生素：脂溶性維生素：維生素功用 人體不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，必須通過(guò)食物來(lái)提供；缺少任何一種時(shí)都會(huì)出現(xiàn)特有的缺乏癥狀。有機(jī)物質(zhì)，折光性能高說(shuō)明：樣品中有機(jī)酸的提取結(jié)束后須經(jīng)過(guò)微孔濾膜（)過(guò)濾才能上機(jī)測(cè)定，否則引起柱的污染和測(cè)定干擾；載液濃度和酸度都須準(zhǔn)確（pH=），并也須經(jīng)過(guò)微孔濾膜（)過(guò)濾脫氣后才能使用，否則誤差大且不穩(wěn)定；標(biāo)準(zhǔn)液的濃度范圍應(yīng)包括樣品的濃度。乙醇的濃度不要高于800ml有效酸度的測(cè)定有效酸度的影響因子：有效酸度取決于原料品種和成熟度，加工方法，其值的大小受酸的數(shù)量和性質(zhì)影響，同時(shí)受其中酸，果膠，某些鹽類和蛋白質(zhì)的緩沖能力的影響；意義：有效酸度是人們對(duì)食品味覺(jué)中的酸度的主要決定者測(cè)定方法有： pH試紙法，標(biāo)準(zhǔn)色管比色法和pH計(jì)測(cè)定法pH標(biāo)準(zhǔn)液可以用國(guó)家計(jì)量管理機(jī)關(guān)提供的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)按規(guī)定配制，也可以按專業(yè)書籍的配方配置有效酸度測(cè)定 通常用pH計(jì)法測(cè)定 準(zhǔn)確，方便一般的 果蔬樣品與水1：1比例研磨后過(guò)濾蘋果等核果類與籽粒樣品與水1 ：23，沸水煮30min，過(guò)濾測(cè)定有機(jī)酸組分的測(cè)定意義：有機(jī)酸的種類組成是農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)特征之一；? 有機(jī)酸的種類組成與成熟度，氣候條件，施肥等管理措施有關(guān)常用的方法：氣相色譜法，薄層色譜法和液相色譜法氣相色譜法原理：在硫酸的催化下，有機(jī)酸成為丁酯的衍生物，用氣相色譜法分離分別測(cè)定。揮發(fā)性酸度的測(cè)定揮發(fā)性酸包括：醋酸，蟻酸，丁酸和甲酸等。有機(jī)酸的測(cè)定總酸度的測(cè)定原理：樣品中的有機(jī)酸用堿滴定時(shí)，被中和生成鹽類，用酚酞作指示劑，它在pH=（微紅色），根據(jù)堿的消耗量來(lái)計(jì)算有機(jī)酸的總量。核桃油中還含有人體不可缺少的微量元素鋅、錳、鉻等。核桃油：健腦作用：人體的大腦組織細(xì)胞主要是由 60% 的不飽和脂肪酸和 35% 蛋白質(zhì)所組成。%。? 本身不含有膽固醇，它對(duì)于血液中膽固醇的積累具有溶解作用，故能減少對(duì)血管產(chǎn)生硬化影響。消化吸收率達(dá)98%。原理：有苯提取種子中的脂肪酸，以一定濃度的NaOH溶液滴定，以脂肪酸的摩爾質(zhì)量為282為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算其含量（%）。脂肪酸應(yīng)用氣相優(yōu)勢(shì)：本身具揮發(fā)性（對(duì)于飽和的不揮發(fā)的則可用液相色譜分析），碳原子含量較多，氣相的檢測(cè)靈敏度高。脂肪酸的測(cè)定動(dòng)植物油脂中脂肪酸的種類很多。一般非揮發(fā)性的有機(jī)溶劑的折光率高，油的折光率低。L1硫酸亞鐵銨溶液15ml，1：1硫5ml，蒸餾水8ml，振動(dòng)數(shù)分鐘，分層后棄去水相，同法再重復(fù)12次（除盡為止），并用蒸餾水洗去多余的試劑，然后用干燥劑CaCl2吸去多余水分。注意事項(xiàng)：同油重法? 濾紙包或?yàn)V紙筒的編號(hào)用鉛筆寫，不能用記號(hào)筆，油筆，鋼筆? 試樣包應(yīng)捆在一根玻璃棒上，以防止樣品上浮，抽提不完全乙醚使用注意事項(xiàng)：①乙醚易燃易爆，在整個(gè)使用過(guò)程中不能有明火；②乙醚有毒，麻醉劑，應(yīng)在通風(fēng)的環(huán)境中進(jìn)行；③乙醚在存放的過(guò)程中，防止其氧化，并用棕色瓶裝滿；④乙醚中過(guò)氧化物的檢查：10ml乙醚+1ml新配制的10%KI，在沒(méi)有陽(yáng)光直射，稍搖動(dòng)并靜置分層后，對(duì)著白色背景，從橫斷方向觀察，兩液層均應(yīng)無(wú)色。? ④保證提取充分和樣品的代表性，樣品在提取前要經(jīng)過(guò)粉碎（對(duì)于大粒的樣品是必須的，并且這種粉碎是比較粗的），混勻后磨細(xì)（注意在磨細(xì)的過(guò)程中油分的損失）? ⑤浸提結(jié)束后須除盡乙醚才能烘干。樣品中含有水分使提取劑的提取能力和提取的對(duì)象改變，結(jié)果偏高。如果為化學(xué)純或以上的純度，則無(wú)須有除去水分和雜質(zhì)等步驟，若為工業(yè)用乙醚，則須除去水分和雜質(zhì)步驟純化之。苯,80℃.粗脂肪：有機(jī)溶劑提取的物質(zhì)包括油脂和類脂。 石油醚，3060℃ ； 二硫化碳，℃。在生物化學(xué)領(lǐng)域里，對(duì)于脂類含量的研究，采用氯仿甲醇混合液提取全部的脂類。需要樣品與鹽酸溶液一起加熱，淀粉，蛋白質(zhì)等分解，使脂類呈游離狀 態(tài)，從而用有機(jī)溶劑提取出來(lái)。但有共同的特點(diǎn)：不溶于水，溶于有機(jī)溶劑，如乙醚，三氯甲烷，苯，二硫化碳，四氯化碳等，可以將游離態(tài)的油脂提取出來(lái)而與其他成分分離。游離態(tài)特點(diǎn)：①以小滴形狀大量堆積于植物的貯藏器官中，當(dāng)細(xì)胞破壞和施用壓力則可以將個(gè)別的小滴聯(lián)成大滴，當(dāng)有足夠的大滴定時(shí)就得到了液體油。 油：常溫下為液體的油脂。 果膠酸=果膠酸鈣比色法原理：果膠物質(zhì)水解，生成半乳糖醛酸在強(qiáng)酸的條件下與咔唑縮合，形成紫紅色溶液，（530nm）注意：①硫酸的純度和濃度都要求高，GR，濃硫酸；②須嚴(yán)格除去糖分。對(duì)于含有大量糖類和脂類或色素時(shí)，須先預(yù)處理（乙醇，乙醚）（95%乙醇會(huì)溶解果膠）。重量法： 原理：利用果膠酸鈣不溶于水的特點(diǎn)。另外，許多植物中果膠物質(zhì)還包括：阿拉伯樹(shù)膠，聚半乳糖和阿拉伯半乳糖。不溶性膳食纖維（中性洗滌纖維）的測(cè)定 原理：在中性洗滌劑的消化作用下，試樣中的糖、淀粉、蛋白質(zhì)、果膠等物質(zhì)被溶解除去，不能消化的殘?jiān)鼮椴蝗苄陨攀忱w維，主要包括纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、角質(zhì)和二氧化硅等，還包括不溶性灰分。酸洗滌重量法（酸性洗滌纖維，ADF ） 原理：季銨鹽，例如十六烷基三甲基溴化銨（簡(jiǎn)稱CTAB），是一種表面活性劑，在溶液中能有效地使動(dòng)物飼料、植物樣品中蛋白質(zhì)、多糖、核酸組分水解、濕潤(rùn)、乳化、分散，而纖維素及木質(zhì)素則很少變化。碳水化合物測(cè)定的一般步驟：農(nóng)產(chǎn)品單糖粗液研磨或過(guò)篩待測(cè)樣品糖分待測(cè)液測(cè)定單糖粗液?jiǎn)翁谴忠捍郎y(cè)液水提水提或稀酸解除蛋白和除澄清劑除蛋白和除澄清劑酶解CaCl2HOAC 浸提酸解旋光法測(cè)定待測(cè)液粗纖維素的測(cè)定 酸堿洗滌法原理：將樣本用酸，堿水解，酸可將淀粉，果膠質(zhì)和部分半纖維素水解后除去；堿可以除去蛋白質(zhì)，脂肪及部分半纖維素 和木質(zhì)素。馬鈴薯的密度可由其在空氣中和在水中稱重之差求得。植物樣品中少量淀粉的測(cè)定——蒽酮法原理：在一定酸度（）和高壓鍋(1kg/cm2) 的條件下水解淀粉，用蒽酮法測(cè)定由淀粉水解得到的糖分。CaCl2HOAC 浸提——旋光法原理：CaCl2HOAC為分散和液化劑，在一定的酸度和加熱條件下，使淀粉溶解并部分酸解，生成一定的水解產(chǎn)物，具有一定的旋光性，可用旋光計(jì)測(cè)定。酶水解——氰化鹽碘量法原理：利用淀粉酶的專一性產(chǎn)生還原糖，氰化鹽碘量法測(cè)定。本法不適合蛋白含量高的樣品；⑦顯色液超過(guò)標(biāo)線后不能直接稀釋；⑧ 測(cè)定用波長(zhǎng)可根據(jù)樣品中的含量高低（顯色顏色的深淺）和樣品中糖的主要類別來(lái)選擇，一般有620nm和630nm兩種波長(zhǎng)。也可先配制成12%的蒽酮乙酸乙酯溶液，然后在顯色時(shí)分別加蒽酮和硫酸，保證蒽酮濃度在812μg/ ml即可得到充分的顯色； 另外因蒽酮保存在乙酸乙酯溶液中可延長(zhǎng)保存的時(shí)間達(dá)數(shù)周。水溶性糖的測(cè)定方法：酸水解銅還原直接滴定法和銅還原碘量法。若樣品稱重為26g，制成糖溶液的體積為100ml時(shí)，則每1 V或1 S即表明樣品含蔗糖1%，用此測(cè)讀非常方便。蔗糖的 = +，如將L固定為2dm，則K=，故C= 蔗糖(g) = 蔗糖的“規(guī)定當(dāng)量”（26g）是國(guó)際上統(tǒng)一蔗糖旋光測(cè)定的規(guī)定。糖料作物中蔗糖的測(cè)定—旋光法原理：利用蔗糖對(duì)光的偏振特性，光通過(guò)的蔗糖溶液發(fā)生偏移，并且偏移的角度大小與糖的含量高低正相關(guān)。注意：查表為經(jīng)驗(yàn)所得，故須嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行淀粉指示劑需在沸水中配制，指示劑不能過(guò)早的加入，要到I2消耗差不多的時(shí)候再加（淡黃色）。用氧化還原指示劑指示滴定終點(diǎn)。要求：因?yàn)榉磻?yīng)過(guò)程和產(chǎn)物因反應(yīng)條件而有較大的變化，要求嚴(yán)格按操作規(guī)程做?？扇苄蕴牵▎翁恰㈦p糖）測(cè)定：①總糖 ②還原性糖 ③非還原性糖還原性糖測(cè)定方法：重量法 原理：還原糖將斐林試劑還原產(chǎn)生的Cu2O的量來(lái)測(cè)定還原糖的量的方法。9 粗灰分的結(jié)果用占干物重的%表示。5 本法測(cè)定是風(fēng)干或烘干的植物樣品，對(duì)于含水量高的瓜果，蔬菜樣品則需先風(fēng)干或烘干后測(cè)定。如果是黃棕色，表明Fe3+含量高，綠色表明Mn2+含量高。高的話，鉀鹽揮發(fā)損失，硅酸鹽和磷酸鹽容易形成難溶性鹽膜，包裹碳粒，使灰化不完全；同時(shí)在高溫條件下，由于碳的存在，磷和硫等容易形成還原性氣體而損失。（1）水溶性灰分（能被人體直接吸收）（2）酸溶性灰分 1 測(cè)定灰分的步驟包括預(yù)灰化和灰化兩個(gè)過(guò)程。一般用玻璃研缽研細(xì)，不過(guò)篩。注意：要求制備分析的過(guò)程盡量短（鮮樣）注意防止在制備過(guò)程中水分的損失新鮮樣品要求在當(dāng)天（24小時(shí)）分析完成。3 糧食樣品：取每個(gè)個(gè)體的中間部分樣品，也可整個(gè)取樣，混勻后再分出樣品。2 蔬菜瓜果樣品：個(gè)體較小的如小白菜，葡萄，荔枝，龍眼和黃皮等，隨機(jī)取若干個(gè)整體，切碎混勻，縮分到所需數(shù)量；對(duì)于體積較大的，如西瓜，蘿卜，大白菜和菠蘿蜜等，可按成熟度及個(gè)體大小的組成比例，選取若干個(gè)體，按生長(zhǎng)軸縱剖分4分或8分，對(duì)角線取2份，切碎混勻，縮分到所需數(shù)量。一般也只分析新鮮的樣品，特別是糖分和維生素類項(xiàng)目。同時(shí)要提醒的是不是保存的溫度越低越好；農(nóng)產(chǎn)品中微量元素的分析同樣要防止污染。chapter2 粗灰分的測(cè)定一定溫度條件下，有機(jī)物質(zhì)燃燒剩余的部分為粗灰分。莖葉樣品灰化的溫度不超過(guò)550 ℃。 灰分的顏色通常是灰白色或淺灰色。不過(guò)也有例外，飼料灰分的測(cè)定則規(guī)定為600 ℃，2小時(shí)。8 脂肪含量高的樣品應(yīng)先提取脂肪后灰化。纖維素、半纖維素、果膠：結(jié)構(gòu)性物質(zhì) 利于腸胃的蠕動(dòng)（纖維素、半纖維素），大部分不被吸收。有銅還原法和鐵氰化鉀法等。銅還原直接滴定法原理：還原糖使斐林試劑還原產(chǎn)生的Cu2O，而本身被氧化為糖酸，不具還原性。氰化鹽碘量法原理：還原糖與已知過(guò)量的堿性鐵氰化鉀作用，生成亞鐵氰化鉀和糖酸，過(guò)量的鐵氰化鉀在醋酸存在的條件下與KI作用生成游離的I2，用標(biāo)準(zhǔn)的Na2S2O3溶液滴定生成的I2（以淀粉做指示劑），根據(jù)空白值和樣品值的差值計(jì)算消耗的鐵氰化鉀的體積從而得到樣品還原糖的量。比色波長(zhǎng)：560nm， 620nm 測(cè)定范圍：10～180μg/ml，最好25～50 μg/ml。α= 因此100ml中旋光物質(zhì)克數(shù)為： C ==Kα 式中K為常數(shù)，隨旋光物質(zhì)的種類和管長(zhǎng)不同而改變。檢糖計(jì)的1 V或1 。一般農(nóng)產(chǎn)品中的蔗糖通過(guò)測(cè)定水溶性糖的總量和還原糖的差值得到。葡萄糖生成黃綠色物，果糖生成藍(lán)綠色物，蔗糖生成顏色在二者之間 注意：①蒽酮溶液放置時(shí)間長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生蒽酮沉淀，使蒽酮在溶液中不均勻造成吸取時(shí)產(chǎn)生較大的偏差，溶液的顏色會(huì)應(yīng)蒽酮的含量的不同而有較大的變化。③ 過(guò)去的資料認(rèn)為測(cè)定的范圍是20180μg/ml，實(shí)際上樣品的濃度超過(guò)50μg/ml則應(yīng)吸光度過(guò)大而造成誤差；④顯色液搖勻時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)混勻的程度而定，以混合均勻?yàn)槎?；⑤顯色保溫的時(shí)間長(zhǎng)短以反應(yīng)完全為度，一般為110分鐘，如果含量很低也可縮短時(shí)間，反之也然；⑥蛋白質(zhì)干擾顯色，特別是色氨酸嚴(yán)重干擾顯色。堿性過(guò)大會(huì)影響其他成分的分解影響測(cè)定的結(jié)果；也有結(jié)果認(rèn)為堿性會(huì)導(dǎo)致葡萄糖的分解，影響結(jié)果。用乙醚50ml分5次洗脫；③用850ml/L的乙醇洗除樣品中可溶性的糖類而淀粉不損失；