【正文】 n：表示為串聯(lián)級數(shù)。這是早期的質(zhì)譜 質(zhì)譜串聯(lián)方式。 六．串聯(lián)質(zhì)譜 (tandem MS) ? 為了得到更多的有關分子離子和碎片離子的結構信息，早期的質(zhì)譜工作者把亞穩(wěn)離子作為一種研究對象。 ? 大氣壓化學電離 (atmospheric pressure chemical ionization, APCI)的原理 ? 溶液中的樣品流出毛細管時被氮氣流霧化，到加熱管中被揮發(fā)，在加熱管端進行電暈 (Corona)尖端放電，電極的高壓使溶劑分子被電離，形成反應氣等離子體。而生物大分子則產(chǎn)生多種多電荷離子，在質(zhì)譜圖上得到多電荷離子的峰簇。隨著溶劑分子的蒸發(fā)，帶電液滴的半徑逐漸縮小，液滴表面的電荷密度逐漸增大。這二種方式都可以獲得與分子離子有關的信息而得到化合物的分子量。 適合分析蛋白 、 多肽 、 多聚糖等生物領域 。 用一定波長的脈沖式激光進行照射 。 4．基質(zhì)輔助激光解析電離 (matrixassister laser desorptionionization, MALDI) ? MALDI發(fā)展較晚，但在生物領域已發(fā)揮出它的重要作用。 ? FAB 源適合分析 極性強、難氣化、不穩(wěn)定的化合物 。 原子槍 樣品 MH+ Ar0/Cs+ 原子槍樣品? FAB利用重的原子 Xe或 Ar，惰性氣體的原子先被電離，后被電位加速，使其有較大的動能。 M + CH5+ → MH + +CH4 M + C2H5+ → MH + + C2H4 ? 由 CI產(chǎn)生的準分子離子過剩的能量小，故 CI屬于軟電離技術之一。此時樣品分子與反應氣分子相比是極少的，并在一定能量的電子的作用下，反應氣分子被電離后因離子 分子反應產(chǎn)生一些活性反應離子，這些離子再與樣品分子發(fā)生離子 分子反應，使樣品分子實現(xiàn)電離。為了得到分子量可以采用 CI電離方式。 ? EI電離還有個特點是質(zhì)譜圖重現(xiàn)性好，并有較多的碎片離子信息，對推測未知物結構有幫助。 2．分子離子進一步發(fā)生化學鍵斷裂形成 碎片離子。樣品汽化后在電離區(qū)與電子作用，一些分子獲得足夠能量后丟失一個電子形成正離子。 ? EI源中使用的燈絲是用鎢或錸金屬材料制成的。 ? 2．完成多級（時間上）串聯(lián)質(zhì)譜的操作。實際測得的信號是在同一時間內(nèi)所對應的正弦波信號的疊加，這種信號輸入計算機進行快速傅里葉變換，便可檢出各頻率成分 ,利用頻率和質(zhì)量的已知關系可得到正常的質(zhì)譜圖。由電子束與樣品碰撞產(chǎn)生的離子，在強磁場作用下被迫以很小的軌道半徑運動，不產(chǎn)生可檢出信號。 ? 二種技術解決辦法 :(1)兩極加速技術 (2)離子反射技術 5．傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀 (Fourier transfom ion cyclotron resonance mass spectrometer,FTICR) ? 由于傅里葉技術的發(fā)展，新型的 ICRFTMS出現(xiàn)，與此同期發(fā)展的 FTIR和超導 FTNMR，開辟了現(xiàn)代有機結構傅里葉譜學分析的新時代。經(jīng)過長度為 L的漂移管到達檢測器，離子飛行需要的時間 公式 9 ? 從上述二公式看出，質(zhì)量越大的離子飛行速度越小，到達檢測器所需的時間也越長。 ? 離子阱分析器的缺點： 是與標準圖有一定差別，這是由于在離子阱中生成的離子有較長的停留時間，可能發(fā)生離子 ——分子反應，故有的離子阱采用外加離子源，這樣使得離子阱在分析上得到更廣泛的應用。 ? 特定 m/z離子在阱內(nèi)一定軌道上穩(wěn)定旋轉(zhuǎn)，改變端電極電壓，不同 m/z離子飛出阱到達檢測器。由離子源產(chǎn)生的離子，通過脈沖離子門進入離子阱，通過調(diào)節(jié)射頻電壓和直流電壓，離子可以穩(wěn)定地存貯在離子阱中。樣品的離子引入并儲存在圓形電極和一組射頻電極組成的離子盒中，改變射頻逐個拉出所有的離子。 ? 用電場無磁場，無磁滯現(xiàn)象，掃描快。操作儀器時，變化參數(shù)有 U、 V、ω三個。磁場與電場之間為第二無場區(qū)，是最重要的無場區(qū)，可以設置各種碰撞室和電極，以觀察離子的碎片反應。 ? 按離子源、靜電場分析器、磁分析器順序排列為順置型雙聚焦質(zhì)譜儀 ? 還有 逆置型雙聚焦質(zhì)譜儀 ，其 磁分析器位置在前，靜電分析器位置在后 。加上 方向聚焦 的作用，這就是 “ 雙聚焦 ” 。因此 靜電場可看作是一個能量分析器 。同一質(zhì)量的離子，由于初始動能略有差別，加速后的速度也略有差別，因此它們經(jīng)靜磁場偏轉(zhuǎn)后不能準確地聚焦于一點，也就是說 靜磁場具有能量色散作用 。若將加速電壓固定，掃描磁場則可測出樣品分子生成的各種 m/z值的離子。這意味著磁場有質(zhì)量色散能力 ,可以單獨用作質(zhì)量分析器。離子受磁場的作用力作圓周運動。 ? 這二種質(zhì)量分析器曾經(jīng)是有機質(zhì)譜的主體，現(xiàn)仍在繼續(xù)發(fā)揮重要作用。 。 ? 測定靈敏度的方法多種多樣的，一般直接進樣靈敏度的測定方法是：在固定分辨本領的情況下，直接進入微克量級的某種樣品，看其 分子離子峰的強度與噪聲的比值，就是信 /噪比值，用 S/N 表示 。 由此可見 分辨率是質(zhì)譜儀分開相鄰兩離子質(zhì)量的能力 。 ? 2．分辨率(resolution) 分辨率 又稱之為分辨本領。通常用機械泵預抽真空，然后用擴散泵或渦輪分子泵連續(xù)地抽氣?？蛇M行譜庫檢索。這種平板式微通道板檢測器具有極高的靈敏度。檢測器的種類有電子倍增器、光電倍增器、平板式微通道板檢測器等。 ? 功能：把不同質(zhì)荷比的離子分開排列成譜，是質(zhì)譜儀的核心。不同性質(zhì)的樣品需用不同的電離方式。 ? 氣體和液體樣品在不需要進一步分離時用此方式進樣，儲氣罐可加熱至 200℃ 。 ? 離子飛行方向依 m/e 的大小而偏轉(zhuǎn) (曲率半徑為 r)，其關系為： 質(zhì)譜方程式 設計質(zhì)譜儀器的主要依據(jù) 其中 k 是比例常數(shù)。 主要過程： ? 在極高的真空度下 (105～ 108Torr ), 高能電子束 (1070 eV) 在離子源內(nèi)激發(fā)樣品的氣態(tài)分子，離子源內(nèi)分子由電子束作用失掉一個電子形成分子離子 [M]+。 ? 近年來質(zhì)譜與各種色譜的聯(lián)用技術發(fā)展迅速。 ? 1950 年至 1970 年：有機質(zhì)譜迅速發(fā)展為測定有機化合物分子量和結構的強有力的工具。 ? 上個世紀 50 年代：高分辨率質(zhì)譜儀出現(xiàn)，有機化合物結構分析； ? 上個世紀 60 年代末：色譜 質(zhì)譜聯(lián)用儀出現(xiàn)，有機混合物分離分析；促進天然有機化合物結構分析的發(fā)展； ? 計算機的應用又使質(zhì)譜分析法發(fā)生了飛躍變化，使其技術更加成熟，使用更加方便。進入了生命科學的范疇。 一、有機質(zhì)譜的基本原理： 質(zhì)譜儀原理的示意圖： ? 進樣系統(tǒng) 離子源 (電離和加速，形成各種離子 ) 質(zhì)量分析器 (把不同質(zhì)荷比的離子分開 ) 檢測器 (檢測各種質(zhì)荷比的離子 ) 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。將離子按質(zhì)荷比 (m/e) 分開并按質(zhì)荷比大小排列成譜圖