首屆北方藥學(xué)研究生論壇-曾蘇-adme在藥物研發(fā)中的作用--從成藥性評(píng)價(jià)到新藥轉(zhuǎn)化研究-全文預(yù)覽
【正文】 Ki測(cè)定 （ IC50100μm） 如果 [S]肝 Ki 好 P450酶誘導(dǎo) 沒(méi)有誘導(dǎo)作用 好 誘導(dǎo)至少一種 P450酶 底物 → 酶 評(píng)估 評(píng)估 評(píng)估 五、基于藥物代謝的毒性預(yù)測(cè) ? Prediction of ADRs or toxicity governed by drug metabolism OON H C H 3OON H 2H OH ON H C H 3H OH ON H 2CY P 2 B6CY P 2 D6CY P 2 D6OON H ROO NR +M D M AN 甲基 ? 甲基多巴胺HMM MDA HMA 100倍 T HepG2 細(xì)胞經(jīng)10μM 利福平（ CYP3A4， 2C誘導(dǎo)劑） (A) 25μM β萘黃酮（ CYP1A2誘導(dǎo)劑）(B) 預(yù)處理后，用 MTT法測(cè)定 銀杏酸 GA（ 15:1 ）對(duì)細(xì)胞的毒性增加 Toxicology Letters, 2022, 187: 131136 肝細(xì)胞 誘導(dǎo) /抑制 MTT法 一些官能團(tuán)如 芳基胺、硝基苯環(huán)、噻吩、呋喃和 3甲基吲哚 等往往被認(rèn)為是危險(xiǎn)結(jié)構(gòu)，通常在設(shè)計(jì)候選藥物時(shí)要避免 GA (15:1) GA (15:1) remained in culture medium (181。 177。 177。 177。 177。 177。 α萘黃酮（ CYP1A抑制劑）和酮康唑（ CYP3A抑制劑）共孵育可降低銀杏酸（ 15:1）對(duì)原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞的毒性 CYP1A和 CYP3A催化銀杏酸（ 15:1）生成毒性更強(qiáng)的代謝物 ? The shRNA plasmids inhibits CYP3A4 mRNA expression in HepG2 cells. (C) The shRNA expression plasmid inhibits CYP3A4 mRNA. (D) The shRNA did not change CYP3A5 mRNA expression ? normalized to corresponding GAPDH mRNA level RNAi方法 轉(zhuǎn)基因細(xì)胞方法 ? 紫杉醇 : CYP3A4 amp。 to Healthy Volunteers Neurontin absorption was saturated No saturation of XP13512 absorption or conversion to gabapentin Conce nt ra t ions of G aba pen t in and P ro dr ug in B lood A f t erO ra l A dm inist ra t ion of 280 0 mg X P 135 12 in S t udy X P 006Time (h r)0 6 12 18 24 30 36Concentration (ug/mL)024681012141618G aba pen t inP ro dr ugXP13512: Very Low Exposure to Prodrug Concs of Gabapentin and Intact XP13512 in Blood After Oral Administ of XP13512 to Healthy Volunteers at 2800 mg Gabapentin Cmax was 50fold higher than prodrug Cmax Gabapentin AUC was 280fold higher than prodrug AUC 3. 基于代謝物的新藥發(fā)現(xiàn)和藥物設(shè)計(jì) ? 研究藥物在體內(nèi)外的 代謝物 ? 設(shè)計(jì) 生物轉(zhuǎn)化激活的前體藥物 ? 發(fā)現(xiàn) 一些活性代謝物比母體藥物更安全有效或再經(jīng)過(guò) 結(jié)構(gòu)修飾 發(fā)現(xiàn)新藥 ? 新藥發(fā)現(xiàn)和藥物設(shè)計(jì)的一種重要來(lái)源 OCH 3 CN HC C H 3OH 2H 3 C CHO+H O N HC C H 3O非 那 西 丁 撲 熱 息 痛C Y P 1 A 2Phenacetin, 1887 (nephrotoxic, methemoglobinemia) Recognized as active metabolite of phenacetin in 1948。在寬劑量范圍內(nèi)與加巴噴丁生物利用度（ ≥70%）成正比。 177。 177。 177。 40 177。 177。mol/L) ketoconazole (181。 2C Diclofenac 177。 SD, μmol/L) 3A Midazolam 177。 )propranolol tablet (x177。 II 同工酶 代謝物結(jié)構(gòu)鑒定 細(xì)胞代謝 Isolated hepatocytes models and techniques used to study DM In vitro Enzyme: 1. Isolated hepatocytes and precisioncut liver slices 2. Subcelluar fractions (hepatic microsomes, S9, Cytosol) 3. Human rebinant enzyme, Pure human enzyme Inhibitor: 1. Chemical inhibitors 2. Antibody 3. RNAi Inducer: 1. Chemical inducers 2. Ligands of nuclear receptors ?Anal technique: ?1. Sensitive and specific assays ?2. RTPCR ?3. Western Blot ?4. Reporter gene assay CYP 首選抑制劑 (1) Ki(μ M) 可用抑制劑 (1) Ki(μ M) 1A2 呋拉茶堿 (2) α 萘黃酮 2A6 反苯環(huán)丙胺、 甲氧沙林 (2) 毛果蕓香堿、 色胺 (3) 2B6 3isopropenyl3methyl diamantine(4) 2isopropenyl2methyl adamantine(4) 舍曲林、 苯環(huán)利定、 塞替派 、 氯吡格雷、 噻氯匹定 、 、 、 (5) 、 、 2C8 孟魯司特 槲皮素 甲氧芐啶、 吉非貝齊 、 羅格列酮、 匹格列酮 3 697 、 2C9 磺胺苯吡唑 氟康唑、 氟伏沙明、 氟西汀 、 1841 2C19 噻氯匹定、 努特卡酮 、 2D6 奎尼丁 2E1 二乙基二硫代氨基甲酸鹽 氯美噻唑、 二烯丙基二硫化物 、 1 150 3A4/5 酮康唑、 伊曲康唑 、 阿扎莫林 醋竹桃霉素、 維拉帕米 (6) 1 10， 24 酶底物的鑒定方法 : 抑制劑探針?lè)? General Method ? Human tissues, Subcellular liver tissue fractions ? New Drug Metabolite Chemical Inhibitor Antibody RNAi Chemical Inducer Identify DMEs Substrate, Isoform Analytical Method 人 重組藥物代謝酶 確證 The effects of P450 specific chemical inhibitors on ECB oxidative metabolism in human liver microsomes CYP3A CYP1A2,3A4 CYP1A2 CYP2D6 CYP2E1 CYP2C9 CYP2C19 Zhang X, et al, Drug Metab Dispo,2022 HLM ? (A) SCANESI of HLM incubate ? (B) SIRESI (211) of HLM incubate ? (C) Negativeion ESIMS/MS spectrum of the deprotonated metabolite ions (211) Human rebinant CYP3A4 ? UGTs的抑制劑 ? 丙磺舒和丙戊酸 (UGT通用抑制劑 ) ? 膽紅素 ,阿扎那韋 (UGT1A1) ? 槲皮素 (UGT1A3) ? 三氟拉嗪 (UGT1A4) ? 保泰松 (UGT1A6) ? 丙泊酚 (UGT1A9) ? 雙氯酚酸鉀 (UGT2B7) UGT1A6/7 動(dòng)物誘導(dǎo) 人 UGT1A3 UGT2B7 Biochem Pharmacol, 73: 184251(2022) 特異性化合物作為酶抑制劑 “ 十一五 ” 重大專項(xiàng)一類新藥 動(dòng)物生物利用度較低 ? 代謝穩(wěn)定性差 ! Nglucuronidation by UGT1A4 The imipramine incubated with the rebinant UGT1A4 and without (A) or with (B) UDPGA. Peaks1: imipramine。 200 177。 100 177。 200 177。 ? well permeability : 04, ? R02 and R05 may be the substrates of Pgp Compounds Conc (?mol/L) MDCKMDR1 Efflux MDCK Efflux Net efflux ratio ratio (Papp (BA)/Papp(AB)) ratio (Papp (BA)/Papp(AB)) R02 10 +Verapamil 100 +CsA 10 R05 1
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1