db33t 536-2005 動(dòng)物尿樣中萊克多巴胺的測(cè)定-全文預(yù)覽
【正文】 注入液相色譜儀，作單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)，以色譜峰面積按外標(biāo)法積分定量。流速：。 定容用2％乙酸溶液（）定容到1mL，過膜，上機(jī)?！?氮吹儀?！?分析天平 ?！?振蕩器。萊克多巴胺稀釋液（5μg/ml）：精密量取1ml萊克多巴胺貯備液（），置50mL棕色容量瓶中，用甲醇稀釋并定容至刻度，為萊克多巴胺工作液?！?戊烷磺酸鈉溶液：取800mL水，（，C5H11O3SNa?H2O），混勻?！?1mol/L NaOH溶液：取澄清的氫氧化鈉飽和溶液56mL，加水至1000mL，搖勻?！?無(wú)水硫酸鈉。 甲醇。相對(duì)應(yīng)每一個(gè)樣品的濃度(ng/L)可以從校正曲線上讀出?！?加入100μL酶底物液到微孔中，充分混合并在室溫孵育510min。 加入100μL第一抗體溶液到每一個(gè)微孔中，在37℃孵育30分鐘后倒出孔中的液體，將微孔架倒置在洗水紙上拍打（每輪拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，再加入工作洗液（）250μL，重復(fù)操作兩遍。7 測(cè)定步驟 注意事項(xiàng)不同品牌的試劑盒其操作步驟可能略有差別，具體操作步驟可根據(jù)試劑盒使用說(shuō)明書略作調(diào)整?！?冰箱。6 儀器與設(shè)備 微孔板酶標(biāo)儀(帶450nm濾光片)。5 試劑和溶液 除非另有說(shuō)明，本法所用試劑均為分析純，水為去離子水，符合GB/T 6682二級(jí)水的規(guī)定。GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3 試樣制備采集的尿樣應(yīng)保存于4℃左右的冰箱中。線性范圍：酶聯(lián)免疫（ELISA），高效液相色譜（HPLC），氣相色譜－質(zhì)譜（GC－MS）。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：應(yīng)永飛、吳平谷、陸春波、林仙軍、周文海、任玉琴、屈健、浦琴華。本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心、浙江省疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)起草，浙江一星集團(tuán)飼料有限責(zé)任公司參與起草。酶聯(lián)免疫（ELISA）法為篩選方法，檢測(cè)限為5μg/L，高效液相色譜（HPLC）法和氣相色譜－質(zhì)譜（GC－MS）法為定量方法，定量限HPLC法為5μg/L、GC－MS法為1μg/L。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 方法采用萊克多巴胺酶聯(lián)免疫試劑盒或類似產(chǎn)品，按試劑盒說(shuō)明書操作?！?第二抗體工作液：用第二抗
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