《dna復(fù)制》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有許多不同的轉(zhuǎn)錄因子，看到的現(xiàn)象是：同一 DNA序列可被不同的蛋白因子所識(shí)別；能直接結(jié)合 DNA序列的蛋白因子是少數(shù)，但不同的蛋白因子間可以相互作用，因而多數(shù)轉(zhuǎn)錄因子是通過(guò)蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間作用與 DNA序列聯(lián)系并影響轉(zhuǎn)錄效率的 蛋白質(zhì)的鋅指結(jié)構(gòu) 轉(zhuǎn)錄調(diào)控的實(shí)質(zhì)在于蛋白質(zhì)與 DNA、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用 堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)及其與 DNA的結(jié)合 。 RNA聚合酶是一種反式作用于轉(zhuǎn)錄的蛋白因子。而將啟動(dòng)子倒就不能起作用，可見增強(qiáng)子與啟動(dòng)子是很不相同的。真核啟動(dòng)子一般包括轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)及其上游約 100－ 200bp序列，包含有若干具有獨(dú)立功能的DNA序列元件，每個(gè)元件約長(zhǎng) 7－ 30bp。 阻遏物調(diào)節(jié)機(jī)制 衰減子調(diào)節(jié)機(jī)制 衰減子：在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)節(jié)基因表達(dá)的衰減作用，用于終止和減弱轉(zhuǎn)錄，這種調(diào)節(jié)的作用部位叫衰減子 —— 是一種位于結(jié)構(gòu)基因上游前導(dǎo)區(qū)的終止子。 ? lac阻遏蛋白負(fù)性調(diào)節(jié)與 CAP正性調(diào)節(jié)兩種機(jī)制協(xié)調(diào)合作：當(dāng) Lac阻遏蛋白封閉轉(zhuǎn)錄時(shí)， CAP對(duì)該系統(tǒng)不能發(fā)揮作用；但是如果沒有 CAP存在來(lái)加強(qiáng)轉(zhuǎn)錄活性，即使阻遏蛋白從操縱序列上解聚仍幾無(wú)轉(zhuǎn)錄活性。后者作為一種誘導(dǎo)劑分子結(jié)合阻遏蛋白，使蛋白構(gòu)象變化，導(dǎo)致阻遏蛋白與 O序列解離、轉(zhuǎn)錄發(fā)生。 七、基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄調(diào)控方式 ? 基因表達(dá)調(diào)控概述 ? 原核生物以操縱子為單元進(jìn)行表達(dá)和調(diào)控，特異的阻遏蛋白是控制原核啟動(dòng)序列活性的重要因素。 ? 核酶的生物學(xué)意義 ，具有重要生物學(xué)意義。 ?不同的 RNA病毒復(fù)制方式不同 5 ? RNA 5 ? 3 ? 3 ? RNA+ 釋放 釋放 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA+ RNA+ RNA ?RNA及 RNA+的合成方向均為 5‘ 3’ 核酶 ? 1982年 Cech發(fā)現(xiàn)四膜蟲 rRNA前體自我剪接作用， RNA有催化作用 。 ，需核酸酶。 ? 加工過(guò)程： 剪切作用：需核酸酶參與。 四、轉(zhuǎn)錄過(guò)程的選擇性抑制劑 放線菌素 D 利福平 α －鵝膏蕈堿 原核 抑制 抑制 不抑制 真核 抑制 不抑制 抑制 RNA聚合酶 Ⅱ 五、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的“加工”（成熟過(guò)程） 在細(xì)胞內(nèi)，由 RNA聚合酶合成的原初轉(zhuǎn)錄物（ primary transcript）往往需要一系列的變化，包括鏈的裂解、 5?和 3?末端的切除和特殊結(jié)構(gòu)的形成、核苷的修飾、以及拼接和編輯等過(guò)程，才轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓?RNA分子。磷酸二酯鍵成核糖核酸鏈 (RNA) 4. 轉(zhuǎn)錄終止 轉(zhuǎn) 錄終止信號(hào)有兩種情況 弱終止子： 依賴 ρ 因子（終止因子， terminators） 的終止 NusA蛋白識(shí)別 DNA鏈上的終止信號(hào)，在 ρ 因子幫助終止。 3’ 5’ +1 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) AACTGT ATATTA TTGACA TATAAT 5’ 3’ － 35序列 Sextama 框 － 10序列 Pribnow框 2. 轉(zhuǎn)錄起始 加入的第一個(gè)核苷三磷酸常是 GTP或 ATP。 ?亞基：在全酶中存在，功能不清楚?！?末端的起始核苷酸常為 GTP或ATP 一、轉(zhuǎn)錄基本特點(diǎn) ? 不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄 ? “ 轉(zhuǎn)錄單位 ” （ transcription unit） 以 操縱子 （ operon）為轉(zhuǎn)錄的功能單位 ,結(jié)構(gòu)上包括四個(gè)功能區(qū)：多順反子（結(jié)構(gòu)基因區(qū)）、啟動(dòng)子、操作子、終止子和調(diào)節(jié)基因。 模板鏈 (template strand)及反意義鏈 (antisense strand):指導(dǎo) RNA合成的 DNA鏈為模板鏈，又稱反意義鏈。連接方式 339。轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的初級(jí)轉(zhuǎn)錄本是 RNA前體（ RNA precursor），需經(jīng)加工過(guò)程（ processing）方具有生物學(xué)活性。經(jīng)過(guò) 30～ 50個(gè)循環(huán)，可使原 DNA量增加 106～ 109倍。 質(zhì)粒的特點(diǎn) : ?細(xì)胞染色體外能自主復(fù) 制的小型環(huán)狀 DNA分子； ?質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體； ?最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒； ?存在于許多細(xì)菌及酵母菌等生物中； ?質(zhì)粒的存在對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)影響； ?質(zhì)粒的復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成 。 ? 舉例： 大腸桿菌的一種限制酶能識(shí)別 GAATTC序列 ， 并在 G和 A之間切開 。 SOS修復(fù) ? 指 DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危急狀態(tài)時(shí)所誘導(dǎo)的一種 DNA修復(fù)方式，修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組的完整
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