【正文】 B. 239。 1 第二章《 基因工程 》復(fù)習(xí) 題 一、選擇題 1. 限制性核酸內(nèi)切酶是由細(xì)菌產(chǎn)生的，其生理意義是 （ D） A 修復(fù)自身的遺傳缺陷 B 促進(jìn)自身的基因重組 C 強(qiáng)化自身的核酸代謝 D 提高自身的防御能力 （ D） A 基因工程及分離工程 B 基因工程及發(fā)酵工程 C 基因工程及細(xì)胞工程 D 基因工程及蛋白質(zhì)工程 3. 基因工程操作的三大基本元件是 :(I 供體 II 受體 III 載體 IV 抗體 V 配體 ) （ A） A. I + II + III B. I + III + IV C. II + III + IV D. II + IV + V 4. 多聚接頭（ Polylinker ）指的是 （ A） A. 含有多種限制性內(nèi)切酶識別及切割順序的人工 DNA 片段 B. 含有多種復(fù)制起始區(qū)的人工 DNA 片段 C. 含有多種 SD 順序的人工 DNA 片段 D. 含有多種啟動(dòng)基因的人工 DNA 片段 2 DNA 片段中含有回文結(jié)構(gòu)的是 （ D） A. GAAACTGCTTTGAC B. GAAACTGGAAACTG C. GAAACTGGTCAAAG D. GAAACTGCAGTTTC 6. 若將含有 539。 OH 和 539。 OH 和 539。用 SmaI 酶切后凝膠電泳上出現(xiàn)四條長度不同的帶子，其長度總和與已知數(shù)據(jù)吻合，該重組分子插入片段上的 SmaI 酶切位點(diǎn)共有 （ D） 個(gè) B. 3 個(gè) C. 2 個(gè) D. 至少 2 個(gè) 14. 外源基因在大腸桿菌中以融合蛋白的形式表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)是 (I 融合基因能穩(wěn)定擴(kuò)增 II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解 III 表達(dá)產(chǎn)物易于親和層析分離 ) （ D） B. I + II C. I + III D. II + III (I 加大外源 DNA 與載體的分子之比 II 載體分子除磷 III 連接酶過量 IV 延長連接反應(yīng)時(shí)間 ) （ A） A. I + II B. I + II + III C. I + III + IV D. II + III + IV ，但酶切后產(chǎn)生的粘性末端相同的一類酶為 （ B ） 質(zhì)粒作為基因克隆載體應(yīng)有下列何種調(diào)控元件 （ ABD ） Tetr 5 18. λ 噬 菌 體 外 包 裝 目 的 基 因 片 段 的 大 小 應(yīng) 為 （ D ） DNA 的 50% B. 小于噬菌體 DNA的 75% DNA的 105% DNA的 75%～ 105% ( AB ) 3’ OH 與 5’ P 之間的磷酸二酯鍵 B. 恢復(fù)缺口 質(zhì) 粒 作 為 基 因 克 隆 載 體 應(yīng) 有 下 列 何 種 調(diào) 控 元 件 ( A B C D ) 復(fù)制子 標(biāo)記 ( D ) ①利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成②從基因組文庫中提取 ③從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù) ⑤利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ ，該抗性基因在基因工程中的主要作用是 B A．提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性 6 B．有利于對目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測 C．增加質(zhì)粒分子的分子量 D．便于與外源基因連接 23. 有關(guān)基因工程的敘述正確的是 D A．限制酶只在獲得目的基因時(shí)才用 B．重組質(zhì)粒的形成是在細(xì)胞內(nèi)完成的 C．質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體 D．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料 ( B ) 因 ( B ) A．基因槍法 B．顯微注射法 D．花粉管通道法 （ C ） A、所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列 B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體 C、運(yùn)載體必須具備的條件之一是：具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外 7 源基因連接 D、基因控制的性狀都能在后代表現(xiàn)出來 的理由是（ D ） A、能復(fù)制 B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn) C、具有標(biāo)記基因 D、它是環(huán)狀 DNA ，錯(cuò)誤的是（ A ） A、 DNA 連接酶將黏性末端的堿基對連接起來 B、 限制性內(nèi)切酶用于目的基因的獲得 C、目的基因須由運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 D、 人工合成目的基因不用限制性內(nèi)切酶 （ D ） A、限制酶只在獲得目的基因 時(shí)才用 B、重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成 C、質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體 D、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料 DNA 分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。（√ ） 原核細(xì)胞和真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄的 mRNA 均具有與 rRNA 結(jié)合的 SD 序列，以利于進(jìn)行有效的轉(zhuǎn)錄。（ ） 9. 將目的基因與載體連接過程是由 DNA 連連 接接 酶酶 來 完成。 點(diǎn)突變的基因系列在堿基替換中，若為一個(gè)嘌呤換成另一個(gè)嘌呤或一個(gè)嘧啶換成另一個(gè)嘧啶者稱 轉(zhuǎn)換 ，若一個(gè)嘌呤換成一個(gè)嘧啶或一個(gè)嘧啶換成一個(gè)嘌呤者稱 顛換 。 11 目的 基因與載體連接方 式 有哪些 1) 粘性末端連接； 2） 平頭末端連接； 3） 人工接頭法； 4） 同源多聚尾連接法 如何利用抗性標(biāo)記基因篩選陽性克隆？ 抗性標(biāo)記篩選；抗性基因插入失活篩選； LacZ 基因失活篩選。 c、延伸（ 70℃ 75℃）：在 Taq 酶的作用下，從 引物的 5′端→ 3′端延伸，合成與模板互補(bǔ)的 __ DNA 鏈 ______。 序列 為 mRNA能在細(xì)菌核糖體上產(chǎn)生有效結(jié)合和轉(zhuǎn)譯的特殊序 13 列。 (gene) 具有特定功能的 DNA 片段，這些片段有的編碼蛋白質(zhì)，有的編碼 rRNA、 tRNA，有的則是與復(fù)制、轉(zhuǎn)錄調(diào)控有關(guān)的 DNA序列。原核生物必須有相應(yīng)的原核 RNA 聚合酶可識別原核細(xì)胞 15 的啟動(dòng)子 , 以催 化 RNA 的合成。為了防止載體的自我環(huán)化，通常用堿性磷酸酶去除載體粘性末端的 5’ P以抑制 DNA的自我環(huán)化。 DNA 克隆到 ?LacZ 區(qū)段的插入型噬菌體上后，如何篩選重組噬菌體？ β 半 乳糖苷酶失活的插入型載體，在其基因組中含有一個(gè)大腸桿菌的 lacZ 區(qū)段，此區(qū)段編碼有β 半乳糖苷酶基因 lacZ，在誘導(dǎo)物 IPTG（異丙基硫代半乳糖苷）存在下，β 半乳糖苷酶能作用Xgal(5溴 4氯 3吲哚 β D半乳糖苷 )形成藍(lán)色化合物（ 5溴 4氯靛藍(lán)）。 T4DNA 連接酶同一般的大腸桿菌 DNA連接酶不同。如：已知蛋白質(zhì)中的亮 氨酸（ Leu）為 Leu 營養(yǎng)缺陷菌所必需 , 當(dāng)外源目的基因可表達(dá)亮氨酸 , 將該基因的重組子轉(zhuǎn)入 Leu 缺陷菌中 , 在不含亮氨酸的基本培養(yǎng)基平板中 , 只有重組子表達(dá)的亮氨酸才能被 Leu 缺陷菌所利用而能生長繁殖 ,形成菌落。本方法適用于插入片段較大的重組子的初步篩選。 互補(bǔ)篩選 ？ 質(zhì)粒載體具有β 半乳糖苷酶基因（ lacZ），當(dāng)外源 DNA 插入到它的 lacZ，可造成表達(dá)后的β 半乳糖苷酶失活，利用這一點(diǎn)就可以通過大腸桿菌轉(zhuǎn)化子菌落在添加有 XgalIPTG 培養(yǎng)基中的顏色變化鑒別出重組子和非重組子。 2）不同點(diǎn)： 原核細(xì)胞基因的編碼區(qū)是連續(xù)的，真核細(xì)胞基因的編碼區(qū)是間隔的，不連續(xù)的。 P Ｂ． 239。 P Ｄ． 339。 P 4． 噬菌體 lDNA 體外包裝的上下限是天然 lDNA 長度的（ D ） Ａ． 25 50 % Ｂ． 50 100 % Ｃ． 75 100 % Ｄ ． 75 105 % Ｅ． 100 125 % 8．分子雜交的化學(xué)原理是形成（ E ） Ａ．共價(jià)鍵 Ｂ．離子鍵 Ｃ．疏水鍵 Ｄ．配位鍵 Ｅ．氫鍵 9．促紅細(xì)胞生長素（ EPO ）基因能在大腸桿菌中表達(dá)，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細(xì)胞生長素，這是因?yàn)椋? E ） Ａ．人的促紅細(xì)胞生長素對大腸桿菌有毒性作用 Ｂ．人的促紅細(xì)胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn) 定 Ｃ．大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細(xì)胞生長素特異性結(jié)合并使其滅活 Ｄ．人的促紅細(xì)胞生長素對大腸桿菌蛋白水解酶極為敏感 Ｅ．大腸桿菌不能使人的促紅細(xì)胞生長素糖基化 10．鳥槍法克隆目的基因的戰(zhàn)略適用于（ A ） Ａ．原核細(xì)菌 Ｂ．酵母菌 Ｃ．絲狀真菌 Ｄ．植物 Ｅ．人類 11． cDNA 第一鏈合成所需的引物是（ D ） Ａ． Poly A Ｂ． Poly C Ｃ． Poly G Ｄ． Poly T Ｅ．發(fā)夾結(jié)構(gòu) 12． cDNA 法獲得目的基因的優(yōu)點(diǎn)是（ B ） Ａ．成功率高 Ｂ．