《高分子雜質(zhì)的檢查》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 避免其他因素干擾雜質(zhì)測定的真性。主要通過實(shí)驗(yàn)來確定。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)當(dāng)對照溶液配制過久，出現(xiàn)的峰形容易拖尾，有可能是締合峰隨時(shí)間的增加解離的結(jié)果。 中國藥典 2022版最常用的流動相 A是 磷酸鹽緩沖液（磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉 61：39），濃度常為 、 ，另外也有選用檸檬酸鹽、硫酸銨或磷酸鹽作為流動相。在特定的條件下， β－內(nèi)酰胺抗生素由于分子間的氫鍵，靜電相互作用，疏水相互作用等次級相互作用，可以形成締合物，導(dǎo)致其表觀分子量增大，此時(shí)在Sephadex G－ 10 凝膠色譜系統(tǒng)中和高分子雜質(zhì)具有相似的色譜行為，即在 Kav = 0 處表現(xiàn)為單一的色譜峰。 有目的地利用了溶質(zhì)與 Sephadex G－ 10 凝膠介質(zhì)間的相互作用在凝膠顆粒內(nèi)、外有較大差異這一現(xiàn)象 ,通過選擇 適當(dāng)?shù)牧鲃酉?使 β－內(nèi)酰胺抗生素和其高聚物達(dá)到分離。 ③ 當(dāng)流動相中有多元酸 / 鹽存在時(shí) ,pH 通過影響多元酸的解離 ,改變緩沖液中陰離子類型來改變?nèi)苜|(zhì)的保留行為 。 但酸溶液和氧化劑會使交聯(lián)的糖苷鍵水解斷裂，所以要避免 Sephadex 與強(qiáng)酸和氧化劑接觸。數(shù)字越大的，排阻極限越大，分離范圍也越大。 葡聚糖凝膠中最常見的是 Sephadex 系列，它是葡聚糖與 3－氯－ 1， 2環(huán)氧丙烷 (交聯(lián)劑 )相互交聯(lián)而成，交聯(lián)度由環(huán)氧氯丙烷的百分比控制。 因此，近期的報(bào)道中主要采用葡聚糖凝膠SephadexG－ 10 填料 ,其分子排阻量為 700 道爾頓 (葡聚糖 ) 。分子量大， Ve值小， Kav值也小。 色譜柱 在早期的報(bào)道中 ,運(yùn)用凝膠色譜分離高聚物的色譜柱填料主要采用葡聚糖凝 Sephadex G－ 25。 對于某種型號的凝膠，一些大分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部而完全被排阻在外，只能沿著顆粒間的縫隙流出柱外；而一些小分子不被排阻，可自由擴(kuò)散，滲透進(jìn)入凝膠內(nèi)部的篩孔，爾后又被流出的洗脫液帶走。 它廣泛地應(yīng)用于分離、提純、濃縮生物大分子及脫鹽、去熱源等，而測定蛋白質(zhì)的分子量也是它的重要應(yīng)用之一。 一 .凝膠過濾色譜法 凝膠過濾色譜法主要利用分子排阻的原理 ,即分子量差異進(jìn)行分離的色譜模式。因此需要控制其含量。它可能是聚合度不同的多組分混合體。在臨床上最常見的不良反應(yīng)是速發(fā)型過敏反應(yīng)。同時(shí)也是較易發(fā)生不良反應(yīng)的藥物之一。經(jīng)近幾十年的研究也證明抗生素所致的過敏反應(yīng)抗生素是由其中存在的高分子聚合物產(chǎn)生
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