【正文】 一絲一毫的身體細胞遺留物，如血液、皮屑、毛發(fā)等，技術(shù)人員就可以把犯罪嫌疑人的 DNA樣本和現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)的遺留物中提取的 DNA樣本通過 DNA雜交，比較它們是否相同，從而確定現(xiàn)場留下的痕跡是否為犯罪嫌疑人的。每個人多態(tài)性位點的差別就成為個人識別的標(biāo)志。 ? 研究 DNA分子中某一種基因的位置 ? 定兩種核酸分子間的序列相似性 ? 檢測某些專一序列在待檢樣品中存在與否 ? 是基因芯片技術(shù)的基礎(chǔ) 核酸分子雜交的應(yīng)用： ? 將不同種生物的 DNA分子進行雜交，可以說明生物之間親緣關(guān)系的遠近 把人、黑猩猩和長臂猿的某些 DNA進行雜交，發(fā)現(xiàn)人的 DNA和黑猩猩的 DNA雜交后形成的雜交DNA雜合雙鏈區(qū)多于人的 DNA與長臂猿雜交形成的雜合雙鏈區(qū)，即 人與黑猩猩的 DNA更相似 ，這就說明人與黑猩猩的親緣關(guān)系要近于人與長臂猿的親緣關(guān)系。 知識點 18 DNA復(fù)性 (renaturation) 復(fù)性的條件： ?只有溫度緩慢下降才可以復(fù)性 ?一般認(rèn)為，比 Tm低 25℃ 是復(fù)性的最佳條件。 DNA的解鏈曲線和 Tm值 DNA熱變性： ?增（高）色效應(yīng)： DNA變性時其溶液 OD260 增高的現(xiàn)象 知識點 17 變性引起紫外吸收值的改變 167。加熱變性氫鍵斷裂緩慢冷卻復(fù)性天然雙鏈 DNA 變性 DNADN A 的變性和復(fù)性DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間 氫鍵斷裂 ,變成單鏈。 4 8 12 16 消光系數(shù) 8 10－ 3 A G T C U 220 240 260 280 300 320nm 波長 各種堿基的紫外吸收光譜 167。 m7GpppNm 339。 3 RNA的空間結(jié)構(gòu)與分類 信使 RNA (mRNA) 轉(zhuǎn)運 RNA (tRNA) 核蛋白體 RNA (rRNA) RNA與 DNA分子組成及結(jié)構(gòu)差異 rRNA (核糖體 RNA) Ribosome RNA ? 約占全部 RNA的 80% ? 是核糖核蛋白體的主要組成部分 。 知識點 13 ? tRNA的二級結(jié)構(gòu)都呈” 三葉草” 形狀，在結(jié)構(gòu)上具有某些共同之處，一般可將其分為五臂四環(huán)：包括 氨基酸接受區(qū) 、 反密碼區(qū) 、 二氫尿嘧啶區(qū)、 T?C區(qū)和可變區(qū) 。 ? 是細胞里分子量較小的一類核酸 ， 鏈長一般在 7090個核苷酸之間 。 ? 它的功能是將 DNA的遺傳信息傳遞到蛋白質(zhì)合成基地 – 核糖核蛋白體 。帽子結(jié)構(gòu) 密碼子 3 180。 ? 半衰期最短 知識點 10 ? 結(jié)構(gòu)特點 ： ? 原核生物的 mRNA是多順反子 ， 真核生物的mRNA是單順反子 （ hnRNA mRNA） 真核細胞 mRNA的 3‘ 末端有一段長達 200個核苷酸左右的聚腺苷酸 (polyA)， 稱為 “尾結(jié)構(gòu)” ， 5’ 末端有一個甲基化的鳥苷酸，稱為 “ 帽結(jié)構(gòu) ” 。 RNA與 DNA分子組成及結(jié)構(gòu)差異 ? 基本成分的差異。這種結(jié)構(gòu)可以形象地稱為 “ 發(fā)夾型 ” 結(jié)構(gòu) 。 RNA分子中 ， 部分區(qū)域也能形成雙螺旋結(jié)構(gòu) ， 不能形成雙螺旋的部分 ， 則形成突環(huán) 。 ? 種類較多。 但是各種生物的 HH2A、 H2B的相似性很少 。 ?原核生物 DNA的超螺旋結(jié)構(gòu) ? DNA在真核生物細胞核內(nèi)的組裝 二、 DNA的三級結(jié)構(gòu) DNA在真核生物細胞核內(nèi)的組裝 真核生物染色體由 DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成 ， 其基本單位是 核小體 (nucleosome)。直徑 2 . 4 n m 、 3 . 5 4 n m 螺距B DNA 結(jié)構(gòu)要點：2 . 主、側(cè)鏈 ：主鏈 — 磷酸戊糖、螺旋外側(cè) 、戊糖平面平行假想軸。 James Watson amp。 A G P 5? P T P G P C P T P OH 3? 書寫方法 5? pApCpTpGpCpTOH 3? 5? A C T G C T 3? 167。端到3180。5 39。 1 核酸的組成單位 ?核酸的基本組成單位 —— 核苷酸 ? 核酸的一級結(jié)構(gòu) 核酸的一級結(jié)構(gòu) 1. 定義： 鹼基的排列順序 ⑴ 骨架鏈：糖 磷酸鏈 （ RP) ⑵ 連接鍵： 3’,5’—磷酸二酯鍵 ⑶ 側(cè)鏈：堿基 ⑷ 方向： 5’P末端 → 3’OH末端 2. 核苷酸的連接 3. 核酸分子結(jié)構(gòu)表示法 知識點 5 單核苷酸的連接 5 180。ATP水解時 , 可以釋放出大量自由能。 4180。 核酸的化學(xué)組成 1. 元素組成 C、 H、 O、 N、 P（ 9~10%） 2. 分子組成 —— 堿基 (base)：嘌呤堿，嘧啶堿 —— 戊糖 (ribose)：核糖，脫氧核糖 —— 磷酸 (phosphate) 167。 分布于胞核、胞液。 Science187。 4月 5日以中國梯田為封面的 171。 ? 1868年 Fridrich Miescher從膿細胞中提取“核素” ? 1944年 Avery等人證實 DNA是遺傳物質(zhì) ? 1953年 Watson和 Crick發(fā)現(xiàn) DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu) ? 1968年 Nirenberg發(fā)現(xiàn)遺傳密碼 ? 1975年 Temin和 Baltimore發(fā) 現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄酶 ? 1981年 Gilbert和 Sanger建 立 DNA 測序方法 ? 1985年 Mullis發(fā)明 PCR 技術(shù) ? 1990年 美國啟動人類基因組計劃 (HGP) ? 1994年 中國人類基因組計劃啟動 ? 2022年 美、英等國完成人類基因組計劃基本框架 核酸的發(fā)現(xiàn)和研究工作進展 核酸的分類及分布 90%以上分布于細胞核 ， 其余分布于核外 如線粒體 ， 葉綠體 ， 質(zhì)粒等 。某些病毒 RNA也可作為遺傳信息的載體。 3180。 1 ? 戊糖 ? 堿基 ? 核苷：核糖或脫氧核糖與堿基生成的糖苷 ? 核苷酸：核苷與磷酸形成的磷酸酯 核酸的基本組成單位 —— 核苷酸 POOO HOHOCH2O HO HNNN H2O核苷酸： AMP, GMP, UMP, CMP 脫氧核苷酸： dAMP, dGMP, dTMP, dCMP 核苷酸：核苷與磷酸形成的磷酸酯 知識點 4 體內(nèi)重要的游離核苷酸及其衍生物 ? 多磷酸核苷酸： NMP、 NDP、 NTP NOC H2OO HO HNNNN H2POO HOHAMP NOC H2OO HO HNNNN H2POO HOPOO HOHADP NOC H2OO HO HNNNN H2POO HOPOO HOPOO HOHATP ATP的性質(zhì) ? ATP 分子的最顯著特點是含有兩個高能磷酸鍵。 體內(nèi)重要的游離核苷酸及其衍生物 ? 含核苷酸的生物活性物質(zhì)： NAD+、 NADP+、 CoASH、 FAD 等都含有 AMP ? 多磷酸核苷酸： NMP， NDP， NTP ? 環(huán)化核苷酸 : cAMP， cGMP NOC H2OO HONN