《蛋白質(zhì)分離純化》ppt課件-全文預覽
【正文】 研究酶的結(jié)構(gòu)與功能 + 待純化分子 配體 a. 待純化分子和配體間具有親和性 + 基質(zhì) b. 活性基質(zhì)與配體結(jié)合產(chǎn)生親和吸附劑 + + 雜質(zhì) c. 待純化分子與親和吸附劑結(jié)合，與雜質(zhì)分離 + d. 偶聯(lián)復合物經(jīng)解離后，得到純的待純化分子 原理： 基質(zhì) 纖維素、聚丙烯酰胺凝膠、 sepharose、 sephadex 蛋白質(zhì)的純化方法 ? 在外電場的作用下，帶電顆粒將向著與其電性相反的電極移動，這種現(xiàn)象稱為電泳。 ? 選擇與待純化蛋白質(zhì)具有特殊識別和結(jié)合作用的配基，然后應用化學方法將該配基與載體共價連接。凝膠過濾所用的介質(zhì)是由交聯(lián)葡萄糖、瓊脂糖或聚丙烯酰胺形成的凝膠珠。 ? 通透動力為半透膜兩側(cè)的物質(zhì)濃度差。 ? 該法適用于在等電點 pH穩(wěn)定的蛋白質(zhì)。 ? － 5℃ ， 25％乙醇沉淀卵清蛋白。不同的蛋白質(zhì)由于所帶的電荷和水化程度不同，鹽析時所需的鹽的濃度也不相同，因而可以將不同的蛋白質(zhì)加以分離。 蛋白質(zhì)的分離步驟 四、蛋白質(zhì)的純化方法 ? 根據(jù)蛋白質(zhì)的親水膠體性質(zhì)，當其環(huán)境發(fā)生改變時，蛋白質(zhì)會發(fā)生沉淀作用(Precipitation)。 ? 水溶性蛋白用中性緩沖溶液抽提，酸性蛋白用稀堿性溶液抽提，脂溶性蛋白用表面活性劑抽提等。 ? (3)分離和純化過程都必須在溫和的條件下進行。 ? (1)蛋白質(zhì)來源：微生物細胞、動物細胞和植物細胞； ? (2)隨時測定蛋白質(zhì)活性并檢測蛋白質(zhì)含量。 ? (2)根據(jù)蛋白質(zhì)的特性，選擇不同的溶劑進行抽提。 ? (5)成品加工：測定蛋白質(zhì)的性質(zhì)并干燥成成品。
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