植物細(xì)胞工程課件 第一章 實(shí)驗(yàn)室基本技術(shù)-全文預(yù)覽
【正文】 NaCl KCl CaCl2 O KH2PO4 NaHCO3 葡萄糖 酚紅 表 1 幾種常用的 BSS （ g/L） 天然培養(yǎng)液 ? 血漿 ? 血清 ? 胚胎浸出液 ? 鼠尾膠原 合成培養(yǎng)液 ? 人工方法模擬合成 如 TC19 MEM、 RPM16DMEM、 Ham’s F12等。HEPEs現(xiàn)被廣泛使用，常用濃度為 25mmol/L。大量元素包括 C、 H、 O、 N、P, K、 Ca、 Mg、 S。 玻璃器皿 濕熱滅菌或干熱滅菌，即在烘箱中加熱至 150℃40min ，或 120℃2h 。 玻璃器皿洗滌 新的玻璃器皿、已使用過(guò)的試管、燒杯、三角瓶 、吸管、滴管等內(nèi)徑狹小的玻璃制品。 攝影室及暗室 其功能是進(jìn)行培養(yǎng)材料的攝影記錄和膠片沖印 。 為了保持清潔 ， 接種室應(yīng)防止空氣對(duì)流 。 培養(yǎng)室 培養(yǎng)室的功能是對(duì)離體材料進(jìn)行控制培養(yǎng) 。 要求寬敞明亮 ， 通風(fēng)條件好 。要求封閉性好 ， 干燥清潔 ， 能較長(zhǎng)時(shí)間保持無(wú)菌 。 生化分析室 在以培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室中，應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，以便于對(duì)培養(yǎng)物的有效成分隨時(shí)進(jìn)行取樣檢查。 重鉻酸鉀加蒸餾水后加熱溶化 ， 冷卻后再緩慢加入濃硫酸 。 培養(yǎng)基 濕熱滅菌，即高壓高溫蒸汽滅菌。 培養(yǎng)基體積與滅菌時(shí)間的關(guān)系 培養(yǎng)基體積 （ ml） 滅菌溫度 （ ℃ ） 滅菌時(shí)間（ min.） 20－ 50 121 20 50－ 500 121 25 500－ 5000 125 35 培養(yǎng)基及其配制 ※ 植物細(xì)胞培養(yǎng)基及其配制 ※ 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基及其配制 植物細(xì)胞培養(yǎng)基及配制 培養(yǎng)基基本成分 培養(yǎng)基配方 培養(yǎng)基配制 無(wú) 機(jī) 鹽 類 大量元素 培養(yǎng)基的大量元素使用量一般在每升幾十至幾千毫克。 有 機(jī) 成 分 糖 維生素 肌醇 氨基酸 其它 植 物 激 素 生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素 其它 其它附加成分 瓊脂 活性炭 附加復(fù)合成分 常用培養(yǎng)基配方 常用培養(yǎng)基配方： MS（ Murashing and Skoog, 1962） White（ White, 1934） B5 (Gambor et al, 1968) N6 (朱至青， 1974)
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