[自然科學(xué)]干擾素的生產(chǎn)與行-全文預(yù)覽
【正文】 人們對(duì)干擾素的認(rèn)識(shí)已有了根本改觀，干擾素不僅是病毒間干擾現(xiàn)象的介質(zhì)，而且是調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的重要系統(tǒng)，現(xiàn)在已發(fā)展成為與病毒學(xué)、細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)以及腫瘤學(xué)有關(guān)的一個(gè)新興的研究領(lǐng)域，隨著生物工程技術(shù)的興起，目前已廣泛進(jìn)入臨床應(yīng)用時(shí)代。 存在的問(wèn)題： （ 1）同種產(chǎn)品生產(chǎn)廠家過(guò)多，造成市場(chǎng)惡性競(jìng)爭(zhēng)， 嚴(yán)重影響產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。 (5)凝膠過(guò)濾層析 ? 洗滌液： M NaCl的 （ ）清洗系統(tǒng)和樹(shù)脂 ? 上樣，相同緩沖液進(jìn)行洗脫。 （ 4）陽(yáng)離子交換層析與濃縮 ? 用 （ pH ）平衡樹(shù)脂。 ? 透析除鹽：調(diào)整溶液 pH ，電導(dǎo)值， 10 ku超濾膜， M緩沖液。 ? 檢查 : 緩沖液的 pH值和電導(dǎo)值。 （ 4）初級(jí)分離 ? 鹽析 : 4M硫酸銨， 2℃ ～ 10℃ ，攪勻 ,靜置過(guò)夜。 ? 破碎－ 20℃ 菌體： 2厘米以下的碎塊 ? 攪拌：加裂解緩沖液， 2℃ ～ 10℃ ， 2hr ? 凍融 : 細(xì)胞完全破裂，釋放干擾素。 ? 檢測(cè)：發(fā)酵液雜菌檢查 （ 4）菌體收集 ? 連續(xù)流離心機(jī)：冷卻的發(fā)酵液， 16000 r/min離心收集。 ? 前 4h： 30℃ ， ， DO為 30%。 ? 控制：級(jí)聯(lián)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速 DO為 30%， 3～ 4h， OD。 第二步：表達(dá)載體構(gòu)建 ? IFN基因與表達(dá)載體連接 ? 轉(zhuǎn)化大腸桿菌 ? 篩選陽(yáng)性克隆 ? 獲得序列正確表達(dá)載體 第三步：工程菌構(gòu)建 ? 轉(zhuǎn)化假單胞桿 ? 篩選高表達(dá)、穩(wěn)定遺傳的工程菌 ? 獲得原始菌種 干擾素 α2b的發(fā)酵工藝過(guò)程 （ 1） 搖瓶培養(yǎng) ? 取保存工作種子批菌種，室溫融化 ? 搖瓶培養(yǎng)： 30℃ ， ， 250 r/min， 18177。 ? 缺點(diǎn)： 活性低，退出臨床應(yīng)用。 ? 直接抗腫瘤活性（ rhuIFNα） 毛細(xì)胞和慢性髓樣白血病、 Kaposi肉瘤、非霍奇金淋巴瘤。 ? ③ 種屬特異性 ：一般在同種細(xì)胞中活性高，對(duì)異種細(xì)胞無(wú)活性。前者降解病毒 mRNA、后者抑制病毒多肽鏈的合成，使病毒復(fù)制終止。 ? 上市重組干擾素 : α2a、α2b、 α1b、 β1b， γ 1992年我國(guó)第一個(gè)基因工程藥物 IFNα1b 獲得國(guó)家一類(lèi)新藥證書(shū)。以后科學(xué)家們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，機(jī)體對(duì)入侵的異種核酸（包括病毒）都產(chǎn)生干擾素以進(jìn)行防御。干擾素的生產(chǎn)工藝 與市場(chǎng)分析 主要內(nèi)容 1 干擾素簡(jiǎn)介 2 干擾素生產(chǎn)工藝的發(fā)展 3 基因工程假單胞桿菌發(fā)酵生產(chǎn)工藝 4 國(guó)內(nèi)基因工程藥物產(chǎn)業(yè)發(fā)展?fàn)顩r 5 干擾素制品國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的現(xiàn)狀與發(fā)展分析 1 干擾素簡(jiǎn)介 1. 1 干擾素的定義 干擾素是一種細(xì)胞因子，它是機(jī)體感染病毒時(shí)，宿主細(xì)胞通過(guò)抗病毒應(yīng)答反應(yīng)，而產(chǎn)生的一組結(jié)構(gòu)類(lèi)似、功能相近的低分子糖蛋白。他們把滅活
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