[農(nóng)林牧漁]第4章 固相析出分離技術(shù)-全文預(yù)覽
【正文】 稀釋至一定濃度（稍微過飽和），使懸浮液中具有很多小的晶核，然后倒進待結(jié)晶的溶液中，用玻璃棒輕輕攪拌，放置一段時間后即有結(jié)晶析出。167。晶核的形成167。四環(huán)素堿： 四環(huán)素酸性溶液，用氨水調(diào) pH至 ，冷卻至 10℃ ， 2 h后，四環(huán)素游離堿就可結(jié)晶析出。④ 解析法常用固體氯化鈉作為抗溶劑使溶液中的溶質(zhì)盡可能地結(jié)晶出來，這種結(jié)晶方法稱為 鹽析結(jié)晶法 。 過飽和溶液的形成① 將熱飽和溶液冷卻直接降低溶液的溫度，使之達到過飽和狀態(tài)，溶質(zhì)結(jié)晶析出，此法稱為冷卻結(jié)晶。溶液達到過飽和是結(jié)晶的前提，過飽和度是結(jié)晶的推動力。當(dāng)溶液濃度超過飽和濃度時，固體的溶解速度小于沉積速度，這時才可能有晶體析出。操作上注意 ① 要調(diào)整溶液，使之緩慢地趨向于 過飽和 點。晶態(tài)就是外觀形狀一定、內(nèi)部的分子（或原子、離子）在三維空間進行有規(guī)則的排列而產(chǎn)生的物質(zhì)存在狀態(tài)。幾種主要沉淀方法比較吸附法、乙醇沉淀法、鹽析法等影響 PEG沉淀效果的因素 :PEG的濃度和相對分子質(zhì)量 ， 離子強度、溶液 pH和溫度在一定的 pH下，鹽濃度越高，所需的 PEG濃度越低。常用的有機多聚物：不同分子量的聚乙二醇（ PEG）、聚乙烯吡咯烷酮和葡聚糖等，應(yīng)用較多的是相對分子質(zhì)量 6000～ 20② 利用對熱的穩(wěn)定性不同，加熱破壞某些組分，而保留另一些組分。沉淀目的產(chǎn)物。一般在有機溶劑沉淀時中性鹽濃度以～ ，常用的中性鹽為醋酸鈉、醋酸銨、氯化鈉等。 進行有機溶劑沉淀時，欲使原溶液達到一定的溶劑濃度，需加入有機溶劑的量可通過下式計算式中： 100％是指加入的有機溶劑濃度為100%，如所加入的有機溶劑的濃度為 95％，公式中的分母應(yīng)改為（ 95％－ S2）。 二、常用的有機溶劑常用于生物大分子沉淀的有機溶劑有 乙醇、丙酮、異丙酮和甲醇 等。有機溶劑的選擇主要考慮以下幾個方面的因素： ① 介電常數(shù)小，沉淀作用強。優(yōu)點 ： ① 分辨能力比鹽析法高。1）有機溶劑能降低水溶液的介電常數(shù)。(6)(3)操作方式（ 1）加硫酸銨的飽和溶液（ 2）直接加固體硫酸銨在工業(yè)生產(chǎn)溶液體積較大時，或需要達到較高的硫酸銨飽和度時，可采用這種方式。蛋白質(zhì)濃度的影響 ：一般常將蛋白質(zhì)濃度控制在 2～ 3％為宜。常用鹽析劑在水中的溶解度 鹽析沉淀的原理二、鹽析常用的鹽 優(yōu)點 ：經(jīng)濟、安全、操作簡便、應(yīng)用范圍廣通過加入某種試劑或改變?nèi)芤簵l件，使生化產(chǎn)物以固體形式（沉淀和晶體）從溶液中沉降析出的分離純化技術(shù)稱為固相析出技術(shù) 。沉淀法鹽析法有機溶劑沉淀法等電點沉淀法概念 結(jié)晶法 ：在固相析出過程中，析出物為晶體時稱為結(jié)晶法。 2）中性鹽離子中和蛋白質(zhì)表面電荷 。因為硫酸銨具有 :② 溶解度大且受溫度影響小。鹽 析 劑 溫度 /℃0 20 40 60 80 100(NH4)2SO4 103MgSO4 Na2SO4 NaH2PO4 101表 1單位： g/100mL三、影響鹽析的因素鹽飽和度的影響 ：不同的蛋白質(zhì)，其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同，鹽析時所需的飽和度也就不同。1.(2)分段鹽析時，要考慮到每次分段后蛋白質(zhì)濃度的變化。鹽析過程中，攪拌必須規(guī)則和溫和。鹽析后一般要放置 ～ 1h。一、基本原理概念
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