【正文】 16 大多數(shù)植物原生質(zhì)體通常在 12 周內(nèi)發(fā)生第一次分裂。 16 脫壁酶液采用 0． 45um 微孔濾膜過(guò)濾除菌。 160、 植物原生質(zhì)體制備時(shí)的脛壁酶有纖維素酶，果膠酶，半纖維素酶，蝸牛酶及崩潰酶。 15 深凍細(xì)胞活力及存活率測(cè)定的方法有再培養(yǎng)法、二醋酸熒光素染色法及氯化三苯四氮唑還原法。 15 為提高存活力，凍存材料應(yīng)選用抗寒力強(qiáng)的幼齡培養(yǎng)細(xì)胞。 14 植物細(xì)胞培養(yǎng)物處于無(wú)組織及無(wú)器官分化的分散狀態(tài)時(shí)許多重要基因并不表達(dá)。 14 人工誘發(fā)植物細(xì)胞突變的化學(xué)因素主要有堿基類似物、烷化劑、抗生素等。 1 植物細(xì)胞單細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)有平板培養(yǎng)法，微室培養(yǎng)法、看護(hù)培養(yǎng)法等。 13 植物細(xì)胞生長(zhǎng)的最適 pH通常為 5． 86． 0。 13 7， 8— 二甲基— 10— (D— 11— 核糖基 )異咯嗪即維生素 B2。 12 影響原生質(zhì)體再生的因素主要有菌種的特性，原生質(zhì)體制備條件，再生培養(yǎng)基成份，再生培養(yǎng)條件等。12 細(xì)菌和放線菌主要采用溶菌酶制備原生質(zhì)體。 1 微生物培養(yǎng)的溫度應(yīng)略低于微生物生長(zhǎng)的最適溫度。 11 一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)放線菌孢子形成。 11 深 層通氣培養(yǎng)是在純種條件下，強(qiáng)制通人無(wú)菌空氣到密閉發(fā)酵罐中進(jìn)行培養(yǎng)的方式。 10 工業(yè)微生物細(xì)菌的培養(yǎng)方法有表面培養(yǎng)法、深層培養(yǎng)法、透析法和萃取培養(yǎng)法。 10 液體石蠟封存法保存菌種不適用于能利用石蠟的微生物。100、 誘變育種的誘變因素主要分物理、化學(xué)和生物學(xué)三類。 9 干熱滅菌主要用于器械、容器的滅菌。9 培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因素的主要功能是作為酶的重要組成成分。 8 氮源的生理功能主要是作為合成細(xì)胞原生質(zhì)、生理活性物質(zhì)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)和某些代謝產(chǎn)物的原料。8 病毒的復(fù) 制包括吸附、侵入、脫殼、生物合成、裝配與釋放五個(gè)階段。 80、 放線菌菌絲分為基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲。 7 常用工業(yè)微生物主要有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、大型真菌和病毒。 7 hGH 是指任生長(zhǎng)激素。 70、 對(duì)未知目的基因功能的表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)方法是在攜帶有重組體分子的細(xì)胞中尋找新合成的蛋白質(zhì)。 6 基因的表達(dá)受到啟動(dòng)子等調(diào) 控元件的控制。6 大腸桿菌，酵母與哺乳動(dòng)物細(xì)胞三大基因表達(dá)體系已成為當(dāng)前基因工程工業(yè)性生產(chǎn) 的核心。 5 原核生物細(xì)胞沒(méi)有核膜，因此表達(dá)過(guò)程中的轉(zhuǎn)錄與翻譯往往同時(shí)進(jìn)行。 5 B— 半乳糖基因插入失活法的重組質(zhì)粒產(chǎn)生白色菌落 .5 不帶 B— 半乳糖音酶活性蛋白的菌落中央也可出現(xiàn)淡藍(lán)色斑點(diǎn)。 4 關(guān)于感受態(tài)本質(zhì)的假說(shuō)包括局部原生質(zhì)體化假說(shuō)及酶受體假說(shuō)。 4 大腸桿菌 DNA 連接酶只能催化 DNA 雙鏈的單鏈缺口和帶粘性末端的雙鏈 、 TDT 即末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶。 DNA 連接酶可催化 DNA 鏈的 5’ 磷酸基與另一條 DNA 鏈的 3’ 羥基生成磷酸二酯鍵。 3 構(gòu)建基因文庫(kù)法主要應(yīng)用于原核生物。 3 M13 噬菌體只能感染雄性大腸肝菌。 2 入噬菌體既可溶菌生長(zhǎng)，又可溶源生長(zhǎng)。 2 細(xì)菌收獲可通過(guò)離心進(jìn)行 。 分子量較大，自身傳遞是嚴(yán)緊型質(zhì)粒的特點(diǎn)。 1 質(zhì)?？煞譃樽陨韨鬟f性質(zhì)粒和非自身傳遞性質(zhì)粒。目的基因與 載體的重組，重組體的轉(zhuǎn)化、重組克隆的篩選、基因表達(dá)與產(chǎn)物純化。 基因工程最大特點(diǎn)是打破生物種屬界限，進(jìn)行種屬內(nèi)外基因重組，遺傳信息交換和轉(zhuǎn)移。 原始生物工程以非純種微生物自然發(fā)酵工藝為標(biāo)志。 知識(shí)點(diǎn) 發(fā)現(xiàn)發(fā)酵過(guò)程是微生物作用的結(jié)果的人巴斯德。 8 干擾素： 是一類在同種細(xì)胞上具有廣譜抗病毒活性的蛋白質(zhì)，其活性的發(fā)揮又受細(xì)胞基因組的調(diào)節(jié)與控制，涉及 RNA 和蛋白質(zhì)的合成。 8 IL3：即白細(xì)胞介素 3，有激活的 T 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，能刺激多能造血干細(xì)胞和各系細(xì)胞的分化和增值，促進(jìn)和維持肥大細(xì)胞的增值，增值中性粒細(xì)胞、酸性粒細(xì)胞的活性，促進(jìn) NK 細(xì)胞殺傷實(shí)體瘤的活性。 7 固定化反應(yīng)的酶活力回收率： 固定酶所顯示的活力與加入偶聯(lián)液中酶總活力的比值稱為固定化反應(yīng)的酶活力回收率。 7 包 埋法： 將細(xì)胞定位于凝膠網(wǎng)格內(nèi)的技術(shù)稱為包埋法。 70、 酶： 生物體內(nèi)具有特殊催化功能的蛋白質(zhì)稱為酶。 6 雜交瘤技術(shù)： 骨髓瘤細(xì)胞與免疫淋 巴細(xì)胞融合制備雜種細(xì)胞的方法為雜交瘤技術(shù)。6 微核雜種細(xì)胞： 按完整細(xì)胞之間的融合方式，將微核與另一完整細(xì)胞融合，使后者獲得另一種細(xì)胞中的若于個(gè)染色體，所獲融合子稱為微核雜種細(xì)胞。 5確立細(xì)胞株： 正常細(xì)胞在移植繼代過(guò)程中，有些細(xì)胞增殖力突然增強(qiáng)，在特定條件下可無(wú)限繁殖，與初代細(xì)胞相比，其形態(tài)、生理生化特性，病毒敏感性，抗原性及染色體結(jié)構(gòu)均發(fā)生變化，具有致癌性，這些細(xì)胞稱為確立細(xì)胞株。 5動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)： 在一定條件下，通過(guò)人工供給營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生長(zhǎng)因子，使離體動(dòng)物細(xì)胞或組織生長(zhǎng)繁殖的方法，稱為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。 50、利用生長(zhǎng)特性篩選法： 利用原生質(zhì)體對(duì)培養(yǎng)基成分要求與反應(yīng)的差異選擇雜種細(xì)胞的方法稱為利用生長(zhǎng)特性篩選法。 4植物細(xì)胞融合： 在外界因素作用下，令兩個(gè)或兩個(gè)以上植物細(xì)胞合并成一個(gè)多核細(xì)胞的過(guò)程。 4 細(xì)胞突變： 指遺傳物質(zhì)在一級(jí)結(jié)構(gòu)上發(fā)生永久而能遺傳的變化。 3植物細(xì)胞工程： 根據(jù)生物學(xué)原理及工程學(xué)原理定向改造植物細(xì)胞遺傳性，利用植物細(xì)胞為人類生產(chǎn)名貴藥品提供服務(wù)的技術(shù)。 3 原生質(zhì)體融合育種： 指用人工方法強(qiáng)制兩個(gè)親本細(xì)胞發(fā)生融合，從而可能導(dǎo)致遺傳重組，產(chǎn)生新型的遺傳后代的技術(shù)。 死亡： 對(duì)微生物而言，不可逆地喪失了生長(zhǎng)繁殖的能力，即使再放到合適的環(huán)境中也不再繁殖。 2 生長(zhǎng)因素： 指某些微生物在生命活動(dòng)過(guò)程中必須從外界環(huán)境中攝取的某些微量有機(jī)化合物。 2 病毒 ：一類比細(xì)菌還小，沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，不能營(yíng)獨(dú)立生活的微生物。 1 HBsAg：即乙肝表面抗原；是乙型肝炎病毒表面包被的抗原 。 1 轉(zhuǎn)化： 就是柵某種遺傳信息的 DNA 分子 引入宿主細(xì)胞；通過(guò) DNA 之間同源 重組作用，獲得具有新遺傳信息并傳遞到另一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 1 酶促合成法： 以某一目的基因的 mRNA39。 載體： 攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞的工具即載體。 第二代生物工程： 以純種微生物發(fā)酵工藝為標(biāo)志的生物技術(shù)。 第一代生物工程 ： 已非純種微生物自然發(fā)酵工藝為標(biāo)志的生物技術(shù)。 分子克?。?在分子水平上按照人們?cè)O(shè)計(jì)的藍(lán)圖對(duì)基因進(jìn)行人工操作的技術(shù)。 基因文庫(kù)：利用基因工程方法將某生物的全部基因幾乎都制備成克隆細(xì)胞系，這一 組克隆的總體 (無(wú)性繁殖系 )叫該生物的基因文庫(kù)。 1感受態(tài)： 就是細(xì)菌吸收轉(zhuǎn)化因子 (周圍環(huán)境中的 DNA 分子 )的生理狀態(tài)。 1 微細(xì)胞： 是某些細(xì)菌的突變株在生長(zhǎng)期間產(chǎn)生的一類微笑的圓形的無(wú)核細(xì)胞，它具細(xì)胞壁及細(xì)胞膜、核糖體及能量產(chǎn)生系統(tǒng)，但不含有染色體 DNA。2 微生物： 指一切形體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單齡低等生物的總稱。 2 氮源： 是指構(gòu)成微生物細(xì)胞 和代謝產(chǎn)物中的氮素營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 2 滅菌： 用物理或化學(xué)因子，使存在于物體內(nèi)外的所有生活微生物，永久性地喪失其 生活力，包括最耐熱的芽孢。 3誘變育種： 指用物理、化學(xué)因素處理微生物細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)在結(jié)構(gòu)上發(fā)生變化，從而導(dǎo)致微生物遺傳性狀的改變，根據(jù)育種的目的要求，挑選出有價(jià)值的變異菌株的技術(shù)。 3 種子制備： 指將固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)的孢子或菌體轉(zhuǎn)到液體陪養(yǎng)基中培養(yǎng)，使其大量繁殖成菌絲或菌體的過(guò)程。 4 平板培養(yǎng)法： 分散的植物細(xì)胞接種于含薄層固體培養(yǎng)基器皿內(nèi)培養(yǎng)的方法。4 植物原生質(zhì)體： 除去纖維素外壁且具有生活力的裸體植物細(xì)胞。 4 抗性互補(bǔ)篩選法： 利用親本原生質(zhì)體對(duì)抗生素、除草劑及其它有毒物質(zhì)抗性差異選擇雜種細(xì)胞的方法。 5 動(dòng)物細(xì)胞工程：根據(jù)細(xì)胞生物學(xué)及工程學(xué)原理定向改造動(dòng)物細(xì)胞遺傳性、創(chuàng)造新物種，通過(guò)工程化為人類提供名貴藥品服務(wù)的技術(shù)，稱為動(dòng)物細(xì)胞工程。 5單細(xì)胞分離培養(yǎng)： 動(dòng)物組織分散后，將其單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)成純系細(xì)胞集群的技術(shù)，稱之為單細(xì)胞分離培養(yǎng)。 6 胞質(zhì)體： 不具有細(xì)胞核的細(xì)胞稱為胞質(zhì)體。 6 營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)選擇法： 利用兩種親本細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)作用原理篩選雜種細(xì)胞的方法稱為營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)選擇法。 6 酶工程： 應(yīng)用酶的特異性催化功能并通過(guò)工程化為人類生產(chǎn)有用產(chǎn)品及提供有益服務(wù)的技術(shù)為酶工程。 7 載體結(jié)合法： 將細(xì)胞懸浮液直接與水不溶性載體相結(jié)合的固定化方法。 7 酶比活： 指每毫克酶蛋白所表現(xiàn)的活力。 8 白介素細(xì)胞： 郵包細(xì)胞或其它體細(xì)胞產(chǎn)生的又在細(xì)胞間起調(diào)節(jié)作用和介導(dǎo)作用的因子。 8 腫瘤壞死因子： 是一種由巨噬細(xì)胞分泌能產(chǎn)生細(xì)胞毒，使腫瘤細(xì)胞溶解的因子。 8生物反