【正文】 僅適用于本項目轉(zhuǎn)化中的牦牛骨，而且還適用于豬骨、禽骨及魚骨的綜合加工利用。 “品質(zhì)決定價值”，牦牛骨蛋白骨素營養(yǎng)豐富、口感純正、質(zhì)量上乘，隨著消費者對天然食品需求量不斷上升，借著阿壩州“風情特色旅游”的東風，牦牛骨蛋白骨素食品的面市，必然會喚起人們對天然綠色食品的購買熱潮，成為當?shù)匦碌慕?jīng)濟增長點。 22 隨著我國 肉類深加工業(yè)的發(fā)展、酶生物工程 技術(shù)的日趨成熟和消費者對天然食品 要求的不斷增加， 骨素 作為 21世紀具有前瞻性的生物工程制品 ，其 潛在市場極大， 在全世界崇尚天然 食品 的今天， 發(fā)展前景不可限量。 據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)，歐洲骨素產(chǎn)品 20xx 年總銷售額高達 億美元，預(yù)計 20xx年的銷售額還將超過這一數(shù)字。豐富的營養(yǎng)、天然的香氣及醇厚的口感，賦予了骨素產(chǎn)品“天然、健康、安全”的特點 ， 在世界范圍內(nèi)廣受消費者喜愛和推崇，近年來作為食品基料，在 肉制品加工、方便面（調(diào)味包） 及速凍食品的加工 生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用 。骨類食品作為天然食品， 被譽為“ 食品 之精華” 。 項目領(lǐng)導(dǎo)小組： 組長： 李 湧 副組長：徐學(xué)民 成員：許永書、張慶英、趙 宏 、徐玉成 項目技術(shù)小組： 組長：徐玉成 副組長：曹定知 成員：楊士明、羅霞、費小凡 、葉利明、 （三）項目產(chǎn)品市場調(diào)查與競爭力預(yù)測 技術(shù)成果轉(zhuǎn)化后在農(nóng)產(chǎn)品加工業(yè)中的主要用途 本項目是通過復(fù)合多功能蛋白酶酶解技術(shù)從牦牛骨中提取制備牦牛骨蛋白骨素食品 ,所以本項技術(shù)成果轉(zhuǎn)化后的主要用途有以下方面：（請見附件彩圖） ①提高了牦牛骨的附加值。 明確總體目標、分解階段目標、分步實施。 b）廢渣治理 本項目廢渣為生產(chǎn)及廢水處理廢渣，外運作衛(wèi)生填埋，鍋爐房排放的灰渣可用于鋪路或制磚。 b）排放標準 廢氣排放執(zhí)行《大氣污染物綜合排放標準》（ GB162971996）中二級標準； 廢水排放執(zhí)行《污水綜合排放標準》（ GB8978— 1996）中一級標準； 噪聲控制執(zhí)行《工業(yè)企業(yè)廠界噪聲標準》（ GB3096— 93）中的二級標準； 廢塵排放執(zhí)行《鍋爐大氣污染物排放標準》 （ GB13271— 20xx）中的相關(guān)標準。水、電、汽擴建投資約在 6 萬元人民幣左右。 （ 2）設(shè)備的改進、完善，中試穩(wěn)定性試驗，使得加工處理后 牦牛骨蛋白溶出率≥ 90%，牦牛骨蛋白水解度≥ 60%，牦牛骨蛋白骨素中總蛋白質(zhì)含量≥ 70%，氨基氮≥ %。 （三）項目的技術(shù)來源、知識產(chǎn)權(quán)情 況 本項目核心技術(shù)源于 四川省中醫(yī)藥研究院 獨家主持、自主開發(fā)的技術(shù)成果 ——《牦牛骨髓蛋白多肽骨素生物轉(zhuǎn)化提取技術(shù)的研究與應(yīng)用》 。 改善粗品吸濕性及口感 。 14 因此將牦牛骨素提取液噴霧干燥后的粉末與銀耳超微粉充分混合，制粒（將小粉末以藥物顆粒劑制粒工藝制成有一定粒徑的顆粒劑），所得的顆粒劑進行密封袋包裝，在密封包裝袋中，每一粒顆粒是由牦牛骨素粉末與銀耳超微粉混合粘合組成的。 牦牛骨髓多肽骨素雖經(jīng)噴霧干燥形成小顆粒，由于其水溶性極強（同時吸濕性也強），在放置過程中很容易形成無定形塊狀物，不利于產(chǎn)品制粒、包裝，影響產(chǎn)品外觀。所以沒有不良副反應(yīng)，其鹽含量：小于 1% 。 由于真菌內(nèi)切蛋白酶和真菌外切肽酶的結(jié)合效果，使復(fù)合蛋白酶比傳統(tǒng)的酶解13 液有更好的風味和口感，無傳統(tǒng)的酶解液的苦澀味和異味，具有良好的口感。 本項目采用高 效復(fù)合多功能蛋白酶水解牦牛骨不僅能夠提高骨蛋白水解度，定向水解牦牛骨中穩(wěn)定的 I 型 膠原蛋白，使蛋白質(zhì)迅速水解為分子量較小的多肽、小肽及游離氨基酸， 而且能使肉類蛋白產(chǎn)生更好的溶解性并提高產(chǎn)率。 牦牛骨中最主要的蛋白質(zhì)是膠原蛋白，骨基質(zhì)有機成分中 的 95％是膠原纖維（骨膠纖維），主要由 I 型膠原蛋白構(gòu)成，還有少量 V 型膠原蛋白。將苦味肽和蛋白質(zhì)混合，能有效降低苦味，這是因為蛋白質(zhì)和氨基酸及多肽之間有親合力。其它疏水吸附劑還有瓊脂疏水色譜、雙氧樹脂纖維素、酚醛樹脂和免疫專一吸附劑等。水解物的苦味是由含 一個疏水區(qū)和一個親水區(qū)，二者相距 3A 的肽產(chǎn)生，其中氨基與親核接受器的相互作用和疏水相互作用而引起苦味。本項目使用真菌蛋白酶為復(fù)合微生物分泌的蛋白酶，蛋白酶將蛋白質(zhì)分解， 蛋白質(zhì)在一系列肽鏈內(nèi)切酶的作用下生成 分子量不等的小肽和 氨基酸 ，蛋白質(zhì)被水解成單個氨基酸是在肽鏈內(nèi)切酶和肽鏈端解酶 的共同作用下完成的，肽鏈內(nèi)切酶即為蛋白酶，作用的特點是從蛋白質(zhì)肽鏈的中間切斷，作用的產(chǎn)物是肽鏈，而肽鏈端解酶作用的底物是肽鏈，從肽鏈的 N端或 C端作用于肽鍵，其產(chǎn)物是二肽或單個 AA。 采用 具有自主創(chuàng)新的、 先進 的、高效的生物復(fù)合多功能蛋白酶 酶解技術(shù) 處理牦牛骨 ，與 現(xiàn)有的化學(xué) 水解等工藝比較， 復(fù)合多功能蛋白酶 酶解 工藝 具 有11 酶活高， 水解 效 率 高，條件溫和， 所得產(chǎn)品 具有 營養(yǎng)成 份 破壞少，風味 較 好的特點 。 因此 ，用生物酶 法提取制備牦牛骨蛋白骨素， 同時通過添加天然的銀耳超微細粉來改善提取粉的吸濕性，并對其進行矯味，不需添加化學(xué)添加劑。 如果用酶法，則設(shè)備簡單，工藝條件也較溫和， 其產(chǎn)物含有豐富的多肽、小肽及游離氨基酸，產(chǎn)品口感 遠遠優(yōu)于前者。 利用 高效生物酶解 技術(shù) 處理 肉類副產(chǎn) 物，提取高附加值的骨素產(chǎn)品，同時通過天然添加物改善此類產(chǎn)品的吸濕性強、風味較差的現(xiàn)狀 ， 生產(chǎn) “ 綠色、 高品質(zhì) ” 的現(xiàn)代新型食品基料，以形成肉類加工的循環(huán)經(jīng)濟， 提高 肉類加工 副產(chǎn) 物 的附加值，是當今世界 肉制品深加工業(yè) 的發(fā)展 趨勢 。 在本項目中，以具有地域和生態(tài)特色的牦牛加工副產(chǎn)物牦牛骨為原料，采用現(xiàn)代生物酶解工藝制備提取牦牛骨素， 其酶解條件溫和，不僅能夠降低鮮骨中營養(yǎng)成份的損失，而且有效避免了 化學(xué)法 中 產(chǎn)生 的 有害副產(chǎn)物， 為生產(chǎn)出安全的水解骨蛋白產(chǎn)品 提供 了更清潔、更環(huán)保的 解決 措施，并通過天然銀耳超微細粉改善牦牛骨蛋白骨素的吸濕性及風味，為牦牛骨素的規(guī)?；a(chǎn)創(chuàng)造了條件。崔鐵軍（ 1987）對黑線鱈魚骨架進行水解，研究了無鹽魚蛋白水解物，產(chǎn)品得率為%，蛋白質(zhì)含量為 %；王朝旭等人（ 20xx）年進行了酶法水解骨蛋白最佳工藝條件的研究。 Fic 和 Surwka 于 1987 年利用酶制劑從雞骨中制取了一種蛋白濃縮物， 1994年又進行了酶水解雞骨蛋白的研究；丹麥從 1992 年起也已開始用酶處理骨骼生產(chǎn)食用蛋白粉，并探討了將酶生物工程應(yīng)用于骨蛋白食品中的可行性；將小牛骨骼進行酶水解，確定了最佳水解條件，從而成功進行了酶解回收小牛骨蛋白的研究。經(jīng)過二十多年的快速發(fā)展，鮮骨及其加工制品現(xiàn)在已逐步 成為一種獨特的食品源及營養(yǎng)源，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等行業(yè)。 6 這一階段計劃落實資金 40萬元。 這一階段計劃落實資金 45萬元。 階段目標 本轉(zhuǎn)化項目執(zhí)行期計劃 24 個月，分四個階段完成：（ 分為投資指標、進度指標、經(jīng)濟指標 ） 第一階段（ 20xx年 6 月 —— 20xx年 8 月）： 這一階段首先完成進行轉(zhuǎn)化所需的車間廠房 及 水、電、汽改造工作，改造 的 同時經(jīng)生產(chǎn)試驗而最后確定 牦牛 骨蛋白骨素 的 最佳 制作工藝，使 牦牛骨蛋白溶出率≥90%，牦牛骨蛋白水解度≥ 60%，牦牛骨蛋白骨素中總蛋白質(zhì)含量≥ 70%，氨基氮≥%。開展本項目符合國家產(chǎn)業(yè)政策，有利于促進科技成果轉(zhuǎn)化 ，加快技術(shù)創(chuàng)新，有利于合理開發(fā)和綜合利用優(yōu)勢資源，在加速區(qū)域經(jīng)濟發(fā)展、解決大量當?shù)剞r(nóng)牧民就業(yè)、增收、繁榮藏區(qū)經(jīng)濟、鞏固藏區(qū)社會穩(wěn)定 等方面起到重要作用。目前，全國牦牛存欄 1362萬頭，阿壩州牦牛存欄欄 (牛存欄 )，加上周邊輻射地區(qū)存欄牦牛 660 萬頭，約占全國牦?？偭康?11％和 48％，在四川乃至全國牦牛產(chǎn)品中都占有重要地位。 （ 4）產(chǎn)品的執(zhí)行標準 目前國內(nèi)未見工業(yè)化酶法生產(chǎn) 蛋白骨素的報道 ，迄今為止尚無國家或行業(yè)標準。項 目完成時，技術(shù)成果進行工業(yè)化生產(chǎn)所需的技術(shù)條件和技術(shù)參數(shù)已成熟并可付諸實施。 在全世界崇尚天然的今天， 發(fā)展前景不可限量。 因此， 本項目 工藝技術(shù) 符合綠色 產(chǎn)業(yè) 的要求 ，實現(xiàn)了牦牛骨蛋白骨素的清潔生產(chǎn)及循環(huán)經(jīng)濟， 在國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域具有一定的領(lǐng)先性和創(chuàng)新性。在本項目中， 首次 將具有自主創(chuàng)新的、 先進 的、高效的 胰肽鏈內(nèi)切酶和真菌外切肽酶復(fù)合后應(yīng)用于牦牛骨生物轉(zhuǎn)化制取牦牛骨蛋白骨素，同時 添加銀耳超微細粉改善產(chǎn)品吸濕性及對產(chǎn) 品進行矯味，不添加化學(xué)添加劑， 減少了資源浪費，減輕了環(huán)境的壓力 ， 在屬國內(nèi)首創(chuàng)。1 一、總 論 （一）申請項目概述 本項目是關(guān)于牦牛骨 蛋白骨素 生物轉(zhuǎn)化提取技術(shù) 的開發(fā) 。 經(jīng)查新，目前國內(nèi)關(guān)于采用以復(fù)合蛋白酶酶解牦牛骨的生物轉(zhuǎn)化提取技術(shù)報道較少。 在酶 解 催化過程中，廢水、廢渣都變成了肥料 、 植物生長素等。 2 隨著我國 肉類深加工業(yè)的發(fā)展、酶生物工程 技術(shù)的日趨成熟 和消費者對天然 食品 要求的不斷增加， 骨素 作為 21 世紀具有前瞻性的 新型天然食品，其 潛在市場極大。 （這句建議放到后面“ 存在的主要問題和近期發(fā)展趨勢”中，此處不妥） 本項目計劃總投資 260 萬 元，前期已投資 60 萬元 ， 需新增加的投資額為 200萬元，申請 80萬本單位自籌新增投資 100萬元，阿壩州配套資金 20萬元。 （建議保持原有敘述，是講項目申請以前的成果熟化程度，而不是講申請以后） （ 3）具體將達到以下主要技術(shù)與性能指標 ① 中試規(guī)模 （刪）生產(chǎn)牦牛骨蛋白骨素 100t/a； ②牦牛骨蛋白溶出率≥ 90%，牦牛骨蛋白水解度≥ 60%，牦牛骨蛋白骨素中總蛋白質(zhì)含量≥ 70%，氨基氮≥ %。 稅前財務(wù)內(nèi)部收益率： % 稅后靜態(tài)投資回收期： 財務(wù)凈現(xiàn)值（ i=10%）： 4 投資利潤率： % 投資利稅率： 47% ②社會效益 牦牛是我國的特有物種，四川省 阿壩州是我國重點牧區(qū)之一的川西北牧區(qū)的重要組成部分，是四川省發(fā)展草食牲畜的主要基地之一。本項工藝的研發(fā)成功和產(chǎn)業(yè)化推廣將有助于以畜牧產(chǎn)品為主要原料，研制開發(fā)具有創(chuàng)新性的食品、藥品和生物制品，提高傳統(tǒng)畜牧產(chǎn)品的現(xiàn)代科技含量和市場競爭能力，使其成為新的經(jīng)濟增長點，推動畜牧現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)的建設(shè)； 能夠促進青藏高原乃至全國畜牧業(yè)的全面提升，增加畜牧產(chǎn)品的科技含量，提高畜牧產(chǎn)品的附加值，增加畜牧業(yè)產(chǎn)值，為畜牧業(yè)的可持續(xù)和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供堅實的理論基礎(chǔ)；同時還能在食品、生物制品、藥物開發(fā)等方面產(chǎn)生積極影響。此外，由于本項目 從綠色、健康的理念出發(fā)， 不添加任何化學(xué)試 劑及防腐劑， 避免了長期以來骨 素 生產(chǎn)普遍采用的酸堿工藝造成的環(huán)境污染 ， 對環(huán)境友好，生態(tài)效益明顯。 第二階段（ 20xx年 1 月 —— 20xx年 3 月）： 生產(chǎn)設(shè)備的配套選型和確定設(shè)備生產(chǎn)廠家，完成生產(chǎn)工藝流程設(shè)計。 第四階段 (20xx 年 6 月 —— 20xx年 6 月 ): 合格的 牦牛骨蛋白骨素產(chǎn)品 投放市場，生產(chǎn)出 牦牛骨蛋白骨素 100t。 20世紀 70 年代，食用鮮骨泥產(chǎn)品最先由肉制品發(fā)達的丹麥和瑞典研制生產(chǎn)，這一研究成果很快就被推廣到日本、美國和英國，尤其以日本推廣最快最廣。 在 20 世紀 60 年代之前關(guān)于食用蛋白酶法水解的報道極少，直到 70 年代才出現(xiàn)了大量有關(guān)酶法水解食用蛋白質(zhì)的報道，并同時作為一門相對獨立的研究領(lǐng)域建立起來。酶解加工骨蛋白的報道不多，且多針對魚骨進行研究。8 幅員遼闊的青藏高原地區(qū)是我國主要的畜牧生產(chǎn)基地，牦牛資源豐富，牦牛加工業(yè)在當?shù)?經(jīng)濟結(jié)構(gòu)中占有相當重要的地位。通過中試驗證可以確定開發(fā)規(guī)模及在該規(guī)模下的工藝參數(shù)， （不寫中試，直接講規(guī)?；囼炤^好） 通過本項目的轉(zhuǎn)化，可解決這一難題。 生產(chǎn) 骨素 ，若用固相合成法、液相合成法、酸解、堿解、電解、氫解、微生物發(fā)酵法生產(chǎn)，需要龐大的設(shè)備和高溫、高壓、高腐蝕性的工藝操作 ，獲得的產(chǎn)品仍處于大分子狀態(tài)，且分子量不均，不能直接食用。 在酶 解 催化過程中，廢水、廢渣都變成了肥料 、 植物生長素等。 （ 1）本項目制品與國內(nèi)外相關(guān)制品理化指標的比較如下 (見表 2— 1) 本項目制品與國內(nèi)外相關(guān)制品理化指 標的比較（ 為何沒有本產(chǎn)品的指標 ） 表 2— 1 研究單位 產(chǎn)品名稱 總固形物（ %） 水份含量（ %） 總蛋白質(zhì)含量（ %） 氨基氮（ %） 雙匯集團 豬骨味素（粉狀） 88 12 70 10 金鑼公司 豬骨蛋白多肽骨素（液態(tài)） 50 50 38 日本增幸株式會社 雞骨泥 37 63 85 （ 2）本項目技術(shù)實施前后主要技術(shù)經(jīng)濟指標對比如下 ： 項目實施前后的主要技術(shù)經(jīng)濟指標對比表 表 2— 2 內(nèi) 容 項 目 實 施 前 項 目 實 施 后 牦牛骨蛋白的溶出率（ %） ≥ 80 ≥ 90 牦牛骨蛋白水解度（ %） ≥ 50 ≥ 60 牦牛蛋白骨素總蛋白質(zhì)含量（ %） ≥ 60 ≥ 70 游離氨基酸含量（ %） ≥ ≥ 可溶性固形物 （ %） ≥ 80 ≥ 90 外觀 黃色粉末狀 淺黃色粉末狀 累計工業(yè)總產(chǎn)值（萬元） 60 550 累計工業(yè)增加值（萬元） 30 200 累計產(chǎn)品銷售額（萬元） 60 550 累計凈利潤（萬元） 6 累計繳稅總額（萬元） 2 （二）、項目的技術(shù)