物理圖譜的構(gòu)建策略研究(ppt39)-經(jīng)營管理-全文預(yù)覽
【正文】 中國最龐大的下載資料庫 ? 低分辨率的物理圖譜多數(shù)是采用 YAC克隆將STSs或限制性酶切位點(diǎn)作為界標(biāo)定位在染色體上 繪制的圖譜 (見圖 45)。這種不同克隆片段的 DNA特征就如同給出的DNA指紋，故 此法又稱 DNA指紋法。 ? ② RH法與脈沖電場凝膠電泳法 (pulsedfield gel electrophoretic,PFGE)聯(lián)合使用使兩方 法具有互補(bǔ)性。含選擇性標(biāo)記單一染色體的體細(xì)胞作為供體，利用高劑量的 X射線將候選染色體打斷成若干片段，這種染色體結(jié)構(gòu)被破壞的細(xì)胞與倉鼠細(xì)胞形成雜交克隆。因 cDNA與 mRNA嚴(yán)格互補(bǔ)， cDNA直接反映了基因 中編碼區(qū)域的相關(guān)序列，并確定其轉(zhuǎn)譯cDNA圖譜可作為表達(dá)序列尤其是致病基因表達(dá)區(qū)域的識別工具。 中國最龐大的下載資料庫 cDNA圖譜 ? ? cDNA圖譜也是一種細(xì)胞學(xué)圖譜，但構(gòu)成圖譜的界標(biāo)是 cDNA或 EST，即表達(dá)序列定位的細(xì)胞學(xué) 圖。因此， BAC克隆庫適于創(chuàng)建 DNA資源受限制 的特異性文庫； BAC克隆的DNA只存在于單拷貝 pBAC質(zhì)粒內(nèi)，但適于傳統(tǒng)的菌落培養(yǎng) 和雜交的 BAC克隆 DNA文庫的篩選；c. BAC克隆含有插入 DNA片段的 F因子，它以超螺旋化狀態(tài) 存在于大腸桿菌質(zhì)粒內(nèi)，較易完整分離帶有較少切點(diǎn)的大區(qū)段 DNA；而 YACs克隆以線性狀態(tài) 存在，對剪切較敏感，不易分離為完整的大 DNA片段； 中國最龐大的下載資料庫 ? DNA樣品容易通過相同的 電泳過程再渡轉(zhuǎn)入細(xì)菌細(xì)胞； e. BAC ? F因子中的一系列基因能使外源 DNA保留在 BAC系統(tǒng)內(nèi)； S中低頻率出現(xiàn)的共克隆 (cocloning)在 bottomup構(gòu)圖方法 (小于 2Mb克隆 DNA重疊 克隆群相對于長片段限制酶切位點(diǎn)的圖譜 )中有 中國最龐大的下載資料庫 ? ? ? 1 ? 細(xì)胞染色體圖譜是最早、最經(jīng)典的物理圖譜。 (3)在基因功能研究中，基因嵌入及轉(zhuǎn)基因技術(shù)都采用了 YAC克隆系統(tǒng)。 中國最龐大的下載資料庫 中國最龐大的下載資料庫 中國最龐大的下載資料庫 YAC ? （ 1 ） YAC克隆結(jié)構(gòu) ? 復(fù)制起始點(diǎn) ori； Amp R為抗性標(biāo)記基因； CEN(centromere)為著絲?；? ；ARS為自由復(fù)制序列； TEL(telomere)為端粒，位于染色體每條臂的末端，參與染色體末端 復(fù)制以及防止核酸外切酶切斷染色體臂。另外，載體可將外源 DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞內(nèi)準(zhǔn)確復(fù)制、大 量擴(kuò)增和明確表達(dá)。物理圖譜的終極圖譜是 DNA序列圖譜。 中國最龐大的下載資料庫 ? 第三章 中國最龐大的下載資料庫 ? 物理圖譜 (physical map)是在 DNA分子水平上描述染色體中
黨政相關(guān)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1