【正文】 KrKrKCrCrKrCKCrCKCKCrrSE IkkIESPEkESkkSE?????????????????? ?????????????1/C s1 /K m1/ r I max1/ r SI圖2 . 1 0 非競爭抑制參數(shù)n1 /K m 1/C s1/ K 39。為肼對芳香基硫酸酯酶的抑制。 …… I在酶的非活性部位與 E結(jié)合， I亦可與 [ES]結(jié)合為無活性或低活性的中間化合 物。 （ 2）不可逆抑制： E與 I的基團(tuán)成共價結(jié)合而使酶永遠(yuǎn)失活，如重金屬離子 Hg2+， Pb2+對木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶的抑制。 mp Kr ,max,ssp Crr ~)(? mp Kr ,max,spmpp CrKrr111m a x,m a x,???sp Cr1~1spmpp CrKrr ??m a x,m a x,m a x, pspmps r CrKrC ??ss rdtdC ??1/r S1/r max1/C s圖2. 2 L B曲線圖 HW曲線 K m /r max Cs /rs S C s 來自 庫下載 (5)積分法： （圖 ） mssomssossoKCCtKrCCCC1.lnm a x ????（ ） [例 ]有一均相酶反應(yīng)，其 Km=2 103mol/l,當(dāng) Cso= 1 105mol/l 時反應(yīng) 1min有 %的底物（單底物）轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物，求 (1)t=3min底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的百分?jǐn)?shù)為多少？ Cs=？， Cp=? (2)當(dāng) Cso= 1 106mol/l 時 t=3min時的 Cs=？， Cp=? (3)rp,max=? kkrXCCXCtKlm olXCCKttKrCCmssopsssosmsso????????????????????m a x7616m a x?)3?()2(106%,6,:m i n3m i )1(m i n1|ln:)()1( 積分解 因底物或產(chǎn)物濃度過高或其他外源化合物（抑制劑）影響而降低 。當(dāng)反應(yīng)速率 rP=（ 1/2） rP， max時的 Cs值即為 Km。 ⑵同功酶、多功酶 來自 庫下載 （水溶液）酶反應(yīng)的缺點 ⑴分離難、費用高、影響質(zhì)量 ⑵難以重復(fù)使用 ⑶酶易變性失活 ⑴優(yōu)點：穩(wěn)定性好，反復(fù)使用，連續(xù)操作，高純度的產(chǎn)品，環(huán)境友好 ⑵缺點：酶損失，增加費用，非均相反應(yīng)的內(nèi)擴(kuò)散影響 ⑶方法：載體結(jié)合，交聯(lián)，包埋，混合法 ⑷再生：載體結(jié)合法中用離子鍵、物理吸附及疏水鍵法制備時，其失活的酶可在新鮮酶溶液中進(jìn)行酶“置換”并重新固定化。 （ 3）合理藥物設(shè)計（ CAMD）、蛋白質(zhì)工程（ CAPD） （ 4）深入研究基因工程菌、哺乳動物、植物細(xì)胞的生長動力學(xué)，產(chǎn)物生成動力學(xué)等。蒸汽機(jī)（ 1712 ）；第一次工業(yè)革命。Gene engineering。（ the ） Fermentation。包括 ….. (2)biotechnology:應(yīng)用自然科學(xué)、工程學(xué)原理，依靠生物催化劑的作用，提供產(chǎn)品或為社會服務(wù)的技術(shù)。cell engineering。 —21世紀(jì)帶頭學(xué)科 高新技術(shù) —信息（龍頭） ； 生物技術(shù)（基礎(chǔ)），生物學(xué)（帶頭學(xué)科）； NM（活力） 產(chǎn)業(yè)產(chǎn)值排序（ US） —化工，食品，電器，汽車，礦產(chǎn)， ….. 投資的產(chǎn)業(yè)取向 —85%投資取向在信息、生物技術(shù)及納米材料產(chǎn)業(yè) (1)1718世紀(jì) —力學(xué) :Newtonian laws。 （ 2）計算生化工程：與基礎(chǔ)學(xué)科（計算技術(shù)）構(gòu)建，交叉新學(xué)科如多相流系統(tǒng)復(fù)雜流場、傳遞等的計算分析等。其 rCs為 S型曲線。失活后難以再生、復(fù)性 ⑶只限一、二步反應(yīng)，酶昂貴，較脆弱易變性，失活 —系統(tǒng)可成為均相；預(yù)混合 rM 》 r（隱蔽的放大效應(yīng)） —“活性中間復(fù)合物”學(xué)說 ⑴反應(yīng)機(jī)理（ ）： （ ） （ ） ⑵“平衡”假設(shè)理論（ L Michaelis和 M L Menten（ 1913））： （ a） CS 》 CE （ b）不考慮 k2 （ c）基元反應(yīng) [ES] E+P為控制步驟 （ Ks—解離或平衡或飽和常數(shù)） （ ） 而 （ ） S E P? ? SESPP rCkdtdnVr ??? ? ][2CsCKsCCkkC ESSESE][][11 ?????EESEO CCC ?? ][ KsCsCCC SEOES ??? ][E + P[ E S ]S + E1?k2?k1?k來自 庫下載 由式（ ）得 MM eq： （ ） ⑶“擬穩(wěn)態(tài)”理論（ G E Briggs和 J B S Haldane， 1925） （ ） 由式（ ）描繪得 rS（ rP） —Cs曲線為圖 （ a） Km—最重要的動力學(xué)常數(shù)，表達(dá)了反應(yīng)性質(zhì)、反應(yīng)條件對 rP的影響。 （ ） 為避免上述微分求 ，有以下的從式（ ）的積分。按抑制的機(jī)理，又分為競爭性、非競爭性、反競爭性及混合型抑制等。 其機(jī)理： k+1 k+2 k+3 E+S [ES] E+P； E+I [EI] k1 k3 r33???kkKI? ? ? ?~)(~)()()()/()()(:)()/1(:0,0:1m a x1m a x1m a x2][2][][的相應(yīng)曲線分別如圖式參數(shù)求取而酶物料衡算由擬穩(wěn)態(tài)假定IImmmISmISISmISSIImSEOESSIEIESEEOEIESCKKKKCrKrrCKCrCKCKCCkCkrCCCCdtdCdtdC??????????????????????cr sr maxr max /2K mIK m r s0競爭性抑制圖2. 6 競爭性抑制酶反應(yīng)圖2. 8線 性競爭抑制參數(shù)K mK mIC IK Itg α = K m/K ILCα1/r max1/C s1/r s 競爭性 抑制反應(yīng)參數(shù)1Km1KmIc來自 庫下載 當(dāng)酶的活性部位與一個抑制劑分子結(jié)合時 KmI與 CI為線形關(guān)系 (見式 (),圖 )稱 為線形競爭抑制。 m Ir I ma xr I ma x/ 2)(:)(1:0:][][],[][],[,][11m a x,1m a x,m a x,1m a x][2][][][][][][554433211???????????????????????????????????????? ???SImISISmSISmSIIESSIS EIEIESEEOS EIEIESkCrKrrCKCrCKCKCrCkrCCCCCdtdCdtdCdtdCS E IkkSEIS E IkkIESEIkkIEPEESkkSE參數(shù)求取酶衡算擬穩(wěn)態(tài)假定來自 庫下載 I只能與活性復(fù)合物 [ES]結(jié)合。m a x,1m a x11m a x139。 m I1/ r SI圖 可逆抑制動力學(xué)參數(shù)比較unCr ssC s,op t圖2. 14 底 物抑制動力學(xué)r s,ma x來自 庫下載 制相似該動力學(xué)性質(zhì)與競爭機(jī)與正常比千不變）（導(dǎo)得： )())1(/(],[][m a xm a x,3333211msPPmspsPkKrCKCKCrrkkKEPkkPEESkkSE??????? ??????????[習(xí)題 ]在有相同濃度的五個反應(yīng)物系中加入不同濃度的底物測其初始反應(yīng)速率（ rS0） 再在上述相同的五個反應(yīng)物系中分別加入 CI= 101mmoL/L的抑制劑，亦測定其初 始反應(yīng)速率（ rSI），測定其值如下：試問其抑制類型并求其動力學(xué)參數(shù)（作圖 rS（ rS0 ， rSI ） 1~CS1） 63513024187463433628)./ ( m i nsIsosorLm m o LrLm m o LC來自 庫下載 復(fù)雜的酶催化反應(yīng)動力學(xué) 某木糖催化葡萄糖為果糖的反應(yīng)至一定程度即達(dá)到平衡 ,其機(jī)理可認(rèn)為是 : ? ? PEKK