wb03酶聯(lián)免疫法快速檢測牛乳中的三聚氰胺操作視頻配音稿概要(文件)
【正文】 、凍熟蝦、凍面包蝦、壽司蝦、凍魷魚、凍羅非魚等。主要儀器及設(shè)備MK3 型酶標(biāo)儀: Thermo 公司；Scientz10 型均質(zhì)機(jī)：寧波新芝生物科技股份有限公司； 電子天平:ACCULAB；DRP9082 型恒溫培養(yǎng)箱：上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；4K15 型高速冷凍離心機(jī)：Sigma公司；HHw600s 恒溫水箱：山東鄄城新科教學(xué)儀器廠；MS1 Minishaker:IKA；1 000、200、20 μL 微量移液器：GILSON。樣品制備1）稱取 1 g 已均質(zhì)的樣品于 50 mL 離心管中，依次加入 4 mL 超純水、 mL 1 mol/L HCl，100 μL 衍生試劑，漩渦振蕩 1 min。4）于此玻璃管加入正己烷 1 mL，先將殘留物完全溶解后（若未能完全溶解，可能會導(dǎo)致回收率降低），再加入 2 mL 原倍萃取/清洗液，振蕩 1 min。2）取出相應(yīng)數(shù)量的微孔，各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液和待測樣品各做 2 個(gè)平行樣，做好記錄。6）輕敲盤子四周，使其充分混合后于室溫（25 ℃）下避光靜置溫育 50 min。10）于室溫（25 ℃）下避光靜置溫育 30 min。用樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度值（B）除以零標(biāo)準(zhǔn)吸光度值（B0）再乘以 100。B恒溫孵育，避免光線照射。5)加入50ul抗體溶液（黑帽）到每一個(gè)微孔底部充分混合，在室溫孵育1小時(shí)，覆蓋上薄膜。8）加入100ul反應(yīng)終止液到每一微孔中，混合好在450nm處測量吸光值以空氣為空白，必須在加入停止液后60分鐘內(nèi)讀取吸光值。12）加樣和洗板過程中，要避免微孔間的相互污染。參考文獻(xiàn)：[1] 景立新,孫武平,楊欽德,[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2006(5)：547549[2] 周新,張欣祥,王磊,[J].分析測試學(xué)報(bào),2007,26(9):262263[3]許蓓,徐志祥,王鳳俠,[J].食品研究與開發(fā),2007,28(12):145148[4]羅杰, ELISA(ciELISA)檢測法的建立[J].中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2005,3,35(20):213218[5]許春蘭,院榕生,劉小根, AOZ 的檢測中的應(yīng)用[J].食品研究與開發(fā),2007,28(5):124126[6]吳富忠, 、呋喃西林藥物殘留的HPLC 法測定[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2006,16(7):812813[7]艾曉輝，劉長征，羅玉霜，[J].淡水漁業(yè)，2003，33(1)：810[8]于慧娟，蔡友窮，畢士川，[J].色譜，2005，23(1)：114[9] 沈美羅,宋紅波,耿雪冰， AOZ 的殘留[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2006，30(4)：520524[10] 焦更生，[J].分析試驗(yàn)室,2006,25(8):8890。結(jié)論本試驗(yàn)用酶聯(lián)免疫法檢測了海利水產(chǎn)有限公司中呋喃唑酮代謝物 AOZ 的殘留狀況，結(jié)果表明絕大多數(shù)的水產(chǎn)品符合規(guī)定，只有極少數(shù)部分有殘留。10）溫浴時(shí)若室溫太低或太高，請適當(dāng)延長或縮短溫浴時(shí)間，或直接在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。用250ul樣品洗滌緩沖液充入孔中，重復(fù)兩次。3）加入50ul標(biāo)準(zhǔn)或處理好的樣品液到各自的微孔中，每個(gè)孔加入樣品或標(biāo)準(zhǔn)時(shí)注意更換移液器的吸頭。3）根據(jù)每個(gè)樣品的 B/B0值就可以從曲線上讀出相對應(yīng)樣品的濃度2結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制AOZ 標(biāo)準(zhǔn)品的 ELISA 檢測結(jié)果見表 1。12）用酶標(biāo)儀于波長 450 nm 下判讀。8）最后一次甩掉后，在吸水紙上拍干。4）于另外微孔中加入 50 μL 已完成前處理的樣品溶液。6）離心 10 min（3 000 r/min），吸去上層液（正己烷），棄掉，再吸取下層液（水層）備用。2）加入 5 mL 原倍緩沖液， mL 1 mol/L NaOH，5 mL 乙酸乙酯，振蕩混合約 1 min。正己烷，乙酸乙脂，1 mol/L NaOH，1 mol/L HCl。公司自建成投產(chǎn)以來，企業(yè)迅速發(fā)展壯大。本試驗(yàn)主要
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