【正文】 胞膜的影響。因此本研究擬探究多粘菌素 B 和質(zhì)膜外側(cè)的重要組分 —— 磷脂酰膽堿 之間的相互作用來考察多粘菌素 B 對(duì)正常細(xì)胞的細(xì)胞膜的影響。主要用于綠膿桿菌及其他假單胞菌引起的感染，也可用于 治療敗血癥 、腹膜炎、腦膜炎等。 結(jié)論 由以上實(shí)驗(yàn)可以說明 DMPC 能夠在玻碳電極 表面 上 形 成 磷脂 雙 層膜， 形成條件為先將成膜液滴在 拋光極化好的玻碳電極表面 ， 氮?dú)?吹干 后 ，放置 空氣中 半小時(shí) ， 再 放入 ， DMPC 會(huì)在玻碳電極上生成 雙層膜 。 0 .2 0 .0 0 .2 0 .4 0 .60 .0 0 0 0 30 .0 0 0 0 20 .0 0 0 0 10 .0 0 0 0 00 .0 0 0 0 10 .0 0 0 0 20 .0 0 0 0 3Y I(A)X E(V)玻碳磷脂膜玻碳成膜電極在乙醇20min金電極硫醇膜在乙醇中20min金電極硫醇膜裸金電極 圖 玻碳電極支撐的磷脂雙層膜和金電極支撐的硫醇單層膜分別在乙醇中浸泡 20min 的 CV 曲鄭州 大 學(xué) 化學(xué)系 本科 畢業(yè)論 文 15 線 電解液為 mol/L KCl 配制的 1 mmol/L K3Fe(CN)6/K4Fe(CN)6(掃速： 50 mV/s) 由圖可知， 玻碳電極支撐的磷脂雙層膜浸泡在 乙醇 中 20min 后其循環(huán)伏安曲線的峰電流明顯增大 。 多粘菌素 B 和玻碳電極支撐的磷脂雙層膜相互作用 以與 相同的方法制備多粘菌素 B各個(gè)濃度的水溶液 。取出 1mL 配置好的 *104mol/L 的喜樹堿甲醇溶液于 10mL 容量瓶中，倒入甲醇至刻度，得到 *105mol/L 的喜樹堿甲醇溶液 .以此方法得到以后各濃度溶液。 將破壞了的 磷脂雙層膜重新浸入 mol/L KCl 溶液中修復(fù) 不同時(shí)間，幾乎看不出有修復(fù)作用。我們采用 玻碳電極支撐的磷脂雙層膜 分別和乙醇 ，甲醇，水， 多粘菌素 B 水溶液 相互作用，并且觀察膜的穩(wěn)定性及自我修復(fù)功能。 電解液為 1 mol/L KCl 配制的 5 mmol/L K3Fe(CN)6(掃速： 50 mV/s) 由圖可知， 隨著 滴過成膜液的 電極在空氣中放的時(shí)間越長(zhǎng)， 玻碳電極支撐的磷脂雙層膜 CV 曲線峰電流逐漸變小，但是 電極在空氣中放置不同時(shí)間 峰電流變化很小，因此 采用 30min 作為電極在空氣中的放置時(shí)間 。 修飾 后的 膜電極 在不同探針溶液中進(jìn)行掃描 ，得到 成膜后 電極的循環(huán) 伏安 曲線。 金 電極支撐的 硫醇單層 膜 的制備 金電極用三氧化二鋁拋光粉拋光，然后依次在 1:1 的硝酸、無水乙醇、亞沸水中超聲清洗。 PHS25B 型數(shù)字酸度計(jì)（上海大普儀器有限公司）； KQ100E 型超聲波清洗器（昆山市超 聲儀器有限公司） ， 電子分析天平（京制 00000249 號(hào)， e=10d 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）。 實(shí)驗(yàn)部分 主要實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 1,2二肉豆蔻?；?磷脂酰膽 堿 (1,2dimyristoylsnglycero3phosphocho line， DMPC ) 購于 Avanti Polar Lipids, Inc。細(xì)胞膜主要由類脂組成，包括中性的或者帶負(fù)電或者帶正電的頭部和極性的磷脂基，因此細(xì)胞膜中的脂質(zhì)具有多樣 性。在玻碳電極上制備 DMPC 膜，并用循環(huán)伏安法 考察其與幾種溶劑和藥品的相互作用 。當(dāng)藥物 進(jìn)入人體內(nèi)，生物膜是藥物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的一道屏障，因此研究藥物和生物膜的相互作用有利于了解藥物在體內(nèi)的吸收、 利用 等情況。在本論文試驗(yàn)中，我們根據(jù)交流阻抗譜的擬合電路來計(jì)算模擬生物膜的厚度，以此來判斷是否在電極表面已形成雙層膜。當(dāng)用循環(huán)伏安法檢測(cè)自組裝膜的狀態(tài)時(shí)，通常是通過考察溶液中可逆氧化還原電對(duì)的循環(huán)伏安行為的變化來對(duì)此檢測(cè)，另外，也可由界面雙電容來判斷膜的介電性質(zhì)以及膜的厚度。該方 法是以控制電極電勢(shì)按恒定速率從起始電位φ a變化到另一電位φ b，并隨時(shí)間以三角波形式進(jìn)行一次或多次反復(fù)掃描，電勢(shì)的不斷變化使電極表面可以交替發(fā)生氧化與還原反應(yīng)，同時(shí)連接工作站的計(jì)算機(jī)將記錄 電流隨電位的響應(yīng)曲線，然后根據(jù)峰電位、電流、峰間距以及與掃描速度的關(guān)系等來定性、定量研究電極反規(guī)律 。以下就以電化學(xué)循環(huán)伏安法（ CV）、交流阻抗譜技術(shù)（ EIS）、熒光脂質(zhì)體技術(shù)以及 LB 技術(shù)做一簡(jiǎn)要的介紹。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，目前已有通過 LB法、刷涂 冷凍法、刷涂自組裝法及泡囊融合法等在自組裝單層膜上構(gòu)造雙層膜。金屬支撐的自組裝類脂雙層膜較傳統(tǒng)的 BLM 有很大的改善：①各相異性高度有序，但仍具液相特征；②兩界面不對(duì)稱；③具有良好的穩(wěn)定性，可耐受攪拌或沖洗，且膜的擊穿電壓是傳統(tǒng) BLM 的幾個(gè)數(shù)量級(jí)以上。 60 年代初，Muller,，并以此為神經(jīng)膜的模擬系統(tǒng)。 鄭州 大 學(xué) 化學(xué)系 本科 畢業(yè)論 文 5 圖 生物膜流體鑲嵌模型 模擬生物膜模型 生物膜結(jié)構(gòu)復(fù)雜，功能強(qiáng)大。 生物膜的分子結(jié)構(gòu)模型 生物膜在形態(tài)上均呈雙分子層的片層結(jié)構(gòu)。 蛋白質(zhì) 生物膜的各種功能都和膜中蛋白質(zhì)緊密相關(guān)。 O HC H 3 HC H 3C H 3HH 3 CC H 3H H 圖 膽固醇分子結(jié)構(gòu) 3．糖脂 糖脂即糖和脂質(zhì)結(jié)合所形成的物質(zhì)的總稱。如在生理 pH 值時(shí)， PC 與 PE 兩類磷脂呈電中性，而 PS 與 PG兩類磷脂則呈電負(fù)性。磷脂酰乙醇胺也是細(xì)菌細(xì)胞膜中的主要磷脂，其中在大腸桿菌中，它約占總磷脂的 80%。生物膜中脂肪酸烴鏈的碳原子數(shù)一般為 14～ 24個(gè)，其中碳原子個(gè)數(shù)為奇數(shù)的小于 2%。 在水相中具有兩條疏水性尾巴的磷脂分子 可以 彼此形成穩(wěn)定的雙分子層 。 鄭州 大 學(xué) 化學(xué)系 本科 畢業(yè)論 文 2 圖 生物膜模式圖 脂類 生物膜中的脂質(zhì)主要是以極性脂質(zhì)為主，它主要 包括：磷脂（ phospholipid）、膽固醇（ sterol）以及糖脂（ glycolipid）三大類 [3]。這種特點(diǎn)使其在生物膜中起到了基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)的作用。自上世紀(jì)60 年代以來，關(guān)于生物膜的結(jié)構(gòu)，生物膜與物質(zhì)運(yùn)送、能量轉(zhuǎn)換、信息識(shí)別與傳遞，以及生物膜與疾病等方面的研究都已取得了很大的進(jìn)展。大多數(shù)細(xì)胞中還有許多內(nèi)膜系統(tǒng)，組成具有各種功能的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器，細(xì)胞的細(xì)胞膜和內(nèi)膜系統(tǒng)統(tǒng)稱為生物膜。 Subsequently,the electrode wasi mmersed in a solution,and the potential was held at1500mV for 3min to polarize the the GCE was polarized,it was driedunderapuri a 5μ m aliquo to was dropped on the surface of the Electrode using a microsyringe and the electrode was trans Ferred into solution immediately， nitrogen blow dry after ， place the air half 鄭州 大 學(xué) 化學(xué)系 本科 畢業(yè)論 文 an hour， double membrane formation。 secondarily, the selfrepaired experiment shows that the defective mixed bilayers after interaction can be reselfassembly in the KCl solution, and the extent of this selfrepair and repair time relate to the concentration of polymyxin B sulfate which interact with mixed bilayers。實(shí)驗(yàn)方法是先配置 1mg/ml的 DMPC 三氯甲烷溶液， 將玻碳電極在紗布上打磨，然后在拋光布上用 m的氧化鋁進(jìn)行拋光，然后在 ，然后分別在蒸餾水和乙醇中超聲 1min，用氮?dú)獯蹈珊罅⒓吹?5μ L 成膜液， 放置空氣半小時(shí)后，浸入 ， 就可以得到玻碳電極支撐的磷脂雙層膜。 電化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，硫酸多粘菌素 B能夠破壞磷脂分子的有序排列，誘發(fā)混合雙層膜產(chǎn)生孔洞或缺陷，導(dǎo)致混合雙層膜的膜電阻降低，從而增加了探針分子Fe(CN)63/4與電極間的傳遞。 當(dāng)藥物進(jìn)入人體內(nèi)，生物膜是藥物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的一道屏障，因此研究藥物和生物膜的相互作用有利于了解藥物在體內(nèi)的吸收、分布以及生物利用度等情況。 作者簽名： 日期： 年 月 日 學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書 本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和 電子版，允許論文被查閱和借閱。 作者簽名： 日 期： 學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明 本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。 鄭州大學(xué)畢業(yè) 論文 藥物和生物膜的相互作用研究 畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）原創(chuàng)性聲明和使用授權(quán)說明 原創(chuàng)性聲明 本人鄭重承諾：所呈交的畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文），是我個(gè)人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的成果。 作 者 簽 名： 日 期： 指導(dǎo)教師簽名： 日 期： 使用授權(quán)說明 本人完全了解 大學(xué)關(guān)于收集、保存、使用畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的規(guī)定，即：按照學(xué)校要求提交畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的印刷本和電子版，并提供目錄檢索與閱覽服務(wù)；學(xué)?？梢圆捎糜坝?、縮印、數(shù)字化或其它復(fù)制手段保存論文；在不以贏利為目的前提下，學(xué)?？梢怨颊撐牡牟糠只蛉?jī)?nèi)容。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。 作者簽名： 日期： 年 月 日 導(dǎo)師簽名： 日期： 年 月 日 指導(dǎo)教師評(píng)閱書 指導(dǎo)教師評(píng)價(jià)： 一、撰寫（設(shè)計(jì)）過程 學(xué)生在論文（設(shè)計(jì)）過程中的治學(xué)態(tài)度、工作精神 □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不 及格 學(xué)生掌握專業(yè)知識(shí)、技能的扎實(shí)程度 □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 學(xué)生綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)和專業(yè)技能分析和解決問題的能力 □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 研究方法的科學(xué)性；技術(shù)線路的可行性；設(shè)計(jì)方案的合理性 □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 完成畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）期間的出勤情況 □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 二 、論文（設(shè)計(jì)）質(zhì)量 論文（設(shè)計(jì)）的整體結(jié)構(gòu)是否符合撰寫規(guī)范？ □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 是否完成指定的論文（設(shè)計(jì)）任務(wù)（包括裝訂及附件）？ □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 三、論文（設(shè)計(jì)）水平 論文（設(shè)計(jì)）的理論意義或?qū)鉀Q實(shí)際問題的指導(dǎo)意義 □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 論文的觀念是否有新意？設(shè)計(jì)是否有創(chuàng)意？ □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 論文（設(shè)計(jì)說明書）所體現(xiàn)的整體水平 □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 建議成績(jī)： □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 （在所選等級(jí)前的□內(nèi)畫“√”） 指導(dǎo)教師： （簽名） 單位： （蓋章） 年 月 日 評(píng)閱教師評(píng)閱書 評(píng)閱教師評(píng)價(jià)： 一、論文（設(shè)計(jì)）質(zhì)量 論文（設(shè)計(jì)）的整體結(jié)構(gòu)是否符合撰寫規(guī)范？ □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 是否完成指定的論文（設(shè)計(jì)）任務(wù)（包括裝訂及附件）？ □ 優(yōu) □ 良 □ 中 □ 及格 □ 不及格 二、論文（設(shè)計(jì)）水平 論文（設(shè)計(jì)）的理論意義或?qū)鉀Q實(shí)際問題的指導(dǎo)意義 □ 優(yōu)