09-9-24工業(yè)微生物--課件1(文件)
【正文】 量不多的 秋初為好 。? 離地面 520cm處的土壤通氣良好、不受陽光直射，含菌量最高。? 富集培養(yǎng)的一般方法：采用有利于目的菌種而不利于無關(guān)微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)條件，以達(dá)到使目的菌種在群體中比例上升的目的。這樣對(duì)下階段的純種分離就會(huì)順利得多。純種分離的方法有 劃線分離法、稀釋分離法 。通過不斷的稀釋手段使被分離的樣品分散到最低限度，然后吸取一定量加入平板涂布均勻，分散的細(xì)菌就在原處繁殖最終形成菌落。② 這樣就使第 1只試管細(xì)菌濃度為原菌懸液的 l/lO，也就是 101。用同樣方法，制成 104～ 108的菌懸液。連續(xù)劃線分離法 分區(qū)劃線分離法這一步是采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件， 通過三角瓶的容量進(jìn)行小型發(fā)酵試驗(yàn) ， 以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。如 壤 得 微 純 先 分 選 的 ? 若 真 用 加 擇 要 菌 牛 白 基；? 若 放 選 培 樣 后，用 十 分 行 離，? 若 菌，一 108,放 稀 離 稀 最 稀 平 單 ? 將 出 菌 斜 時(shí) 體 不 養(yǎng) 落 次 稀 ? 倒 得 接 養(yǎng)，同 菌 度。次 到 一 菌 認(rèn) 一 的 體 。? 透明圈法 ：混濁底物被分解后形成透明圈。抑制圈法： 瓊脂塊培養(yǎng)法。用 測 的 比 定 的 要 業(yè) 采 的 快 定 必 出 數(shù) 關(guān) 度 比 定，菌 稀 法 用 測 線 在 只 色 出 任 后 從 查 的 除嗜溫性放線菌外，其他放線菌一般在培養(yǎng) 420天內(nèi)在分離平板 上緩慢形成菌落。放線菌的分離土樣中放線菌的非選擇性分離： 土樣 風(fēng)干 ，磨碎，無菌海綿壓印土樣后壓印平板后培養(yǎng)。為使所要分離的放線菌的數(shù)量種類增多，一般將水樣離心或?yàn)V紙過濾，取 離心沉積或?yàn)V紙表面沉積 進(jìn)行系列稀釋和涂布。? 將分離平板上所形成的 菌落用經(jīng)火焰灼燒滅菌的鉤形針或無菌牙簽挑取 ，點(diǎn)接到 瓊脂平板上進(jìn)行影印培養(yǎng)，以進(jìn)一步篩選和分離。? 通過 高倍放大進(jìn)行鏡檢 ，可了解氣生和營養(yǎng) 孢子 形成情況。也可 洗下微生物后振蕩培養(yǎng)。? 選擇性地添加抗生素。數(shù) 相 線 可 濁 液 計(jì) 用 產(chǎn) 好 數(shù) 定 平 靠 計(jì) 光 線， 的 度 繪 首 ? 在 點(diǎn) 產(chǎn) 在 量 生 法 量 生 濁 羧甲基纖維素鈉作培養(yǎng)物抗生素篩選檢定菌培養(yǎng)，加上發(fā)酵液如 變色圈法 ：直接用顯色劑或指示劑。采用簡便迅速，有一定準(zhǔn)確性的檢出方法，提高篩選效率。培 生 是 方 的 體 到 復(fù) 的 鏡 面 菌 板 分 進(jìn) 面 單 將 純 檢 培 轉(zhuǎn) 的 板 菌 獲 度 三 104。菌，一 106；? 若 菌 ,一 分 稀 離 釋 法 稀 規(guī) 回 基。高 菌 分 培 膏 選 離 養(yǎng) 紅 丁 應(yīng) 分 養(yǎng) 適 對(duì) 根 養(yǎng) 物 一 分 從 自然界的一些 微生物是在一定條件下產(chǎn)毒的，將其作為生產(chǎn)菌種應(yīng)當(dāng)十分當(dāng)心 ，尤其與食品工業(yè)有關(guān)的菌種，更應(yīng)慎重。從第 1只試管內(nèi) (101)吸取 lml注入第 2只含有無菌水的試管內(nèi)，這樣勇試管內(nèi)的細(xì)菌濃度為原菌懸液的 1/100，也就是 102。③ ① 稀釋涂布分離過程示意圖釋1/100 1/1000 1081071061051041ml 1ml 1ml 1ml 1ml(1)稀 因此還必須 分離，純化 。為了容易分離到所需的菌種，讓無關(guān)的微生物至少是在數(shù)量上不要增加，可以通過 配制選擇性培養(yǎng)基 ，選擇一定的培養(yǎng)條件來控制。從自然界篩選? 采土方法：選擇適當(dāng)?shù)攸c(diǎn)、鏟除表土、取土樣數(shù)十克，盛入事先準(zhǔn)備的無菌防水紙袋中，其上記錄采土?xí)r間、地點(diǎn)、植被情況等。為了使土樣中微生物的數(shù)量和類型盡少變化，宜將樣品逐步分批寄回，以便及時(shí)分離。一般 園田土 和耕作過的 沼澤土 中，以 細(xì)菌和放線菌 為主；富含 碳水化合物的土壤和沼澤地 中， 酵母和霉菌 較多，如一些野果生長區(qū)和果園內(nèi)?！鹾Y（ 1株 1瓶）↓↓確定特定的 增殖條件采樣? 增殖 ： 人為地通過控制養(yǎng)分或培養(yǎng)條件，使所需菌種增殖 培養(yǎng)后，在 數(shù)量上占優(yōu)勢 。? 有了優(yōu)良的菌種，還要有合適的工藝條件和合理先進(jìn)的設(shè)備與之配合。培養(yǎng)分離、菌種分離的一般過程土樣的采取 → 預(yù)處理 → 培養(yǎng) → 菌落的選擇→ 產(chǎn)品的鑒定如何使樣品中所含微生物的可能性大如何在后續(xù)的操作中使這種可能性實(shí)現(xiàn)目的：高效地獲取一株高產(chǎn)目的產(chǎn)物的微生物問題 ：? 菌種資源的開發(fā)? 工業(yè)發(fā)酵產(chǎn)物的性質(zhì)：– 菌體物質(zhì)– 生產(chǎn)分解酶類– 生產(chǎn)主流代謝產(chǎn)物、次生代謝產(chǎn)物或生物合成產(chǎn)物? 菌種篩選的一般原則和基本步驟：– 采集菌樣：了解目標(biāo)菌分布情況、首選樣品是土壤– 富集培養(yǎng)：利用選擇性培養(yǎng)基的原理，向所采土樣中加入某些特殊營養(yǎng)物，并創(chuàng)造一些有利于待分離對(duì)象生長的條件，使樣品中少量的能分解利用該營養(yǎng)物的微生物大量繁殖，以提高其在群體中的比例
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