菌種的生產(chǎn)與保藏培訓(xùn)課程(文件)
【正文】 疏單菌落 → 邊緣取菌 → 接種試管斜面 （ 3~5支 ） → 培養(yǎng) → 純菌種 。 質(zhì)量檢驗 對分離 、 引進或轉(zhuǎn)管擴大的菌種 ， 應(yīng)經(jīng)過質(zhì)量鑒定 ， 選優(yōu)去劣 ， 方可使用 。 (二 ) 母種生產(chǎn)技術(shù) ② 顯微鏡檢驗 挑取少許菌絲于載玻片上 ， 加蒸餾水 1滴 ，蓋上蓋玻片 ， 觀察菌絲形態(tài)是否為培育的菌種 。 經(jīng)以上檢驗 ， 通過綜合評比 ， 選出菌絲生長速度較快 ， 子實體生長健壯 、 品質(zhì)好 、 產(chǎn)量高的母種 ， 即可供生產(chǎn)上使用 。 （ 母種 → 原種 ） 2） 栽培種：由原種作種源擴大而成 ， 只能用于生產(chǎn) 。 ⑷ 木屑 、 麩皮 、 黃豆粉培養(yǎng)基 （ 銀耳 ） 木屑 50kg、 麩皮 15kg、 黃豆粉 1kg、 蔗糖、 MgSO4 、 水 70~75kg。 培養(yǎng)基 （ 料 ） 配制原則 ⑵ 選好培養(yǎng)材料 ① 首先選不含殺菌物質(zhì)的木屑 杉 、 松 、 樟等樹種 ， 含酚 、 酯 、 精油等殺菌物質(zhì) ， 會抑制食用菌生長 。 ⑷ 調(diào)節(jié)酸堿度 各種食用菌需要的 pH值不同 ， 配制培養(yǎng)料時 ， 應(yīng)選用 NaOH、 石灰 、 鹽酸或過磷酸鈣等物質(zhì)調(diào)節(jié) pH值 。 原料選擇的注意事項 （ 幾點說明 ） ⑴ 木屑： 選擇： 根據(jù)食用菌分解能力選擇 ， 分解能力較強的食用菌采用硬質(zhì)闊葉樹木屑 ， 反之采用軟質(zhì)樹種木屑 。 如：木屑含氮量 %以下 。 原料選擇的注意事項（幾點說明） ⑶ 加糖的作用 ① 初期補充碳源 ， 用量 1%~5%。 原料選擇的注意事項（幾點說明） ⑷ Ca2＋ 作用 ① 提供食用菌鈣離子：原料中加石膏 、CaCO3或過磷酸鈣 、 骨粉提供食用菌鈣離子； ② 鈣不斷中和食用菌產(chǎn)生的有機酸； ③ 鈣還能中和單寧； ④ 減少過量 K、 Mg對菌絲中毒 ， 促進菌絲生長 。 正常：菌絲白色 雜菌：黃 、 紅 、 綠 、 黑 死菌：補種 二 、 菌種保藏 菌種是食用菌栽培成敗的關(guān)鍵 。 變異性 ：使高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的菌種 ， 逐漸衰退 ， 給菌種保藏帶來了困難 。 降低代謝活動方法： （ 創(chuàng)造各種條件 ） 低溫 干燥 缺氧等 在這些條件下 ， 食用菌可處于 “ 休眠 ”狀態(tài)或處于微弱的代謝活動 。 保存期： 3~6月 適用范圍： 多數(shù)食用菌 注：不適于草菇 。 （ 菌絲體與空氣隔絕 ， 降低其代謝活動 ， 防止培養(yǎng)基干燥 ） 保存期： 6年 適用范圍： 可用于保藏所有不宜用冷凍或干燥保藏的真菌 。 （ 四 ） 冷凍 、 真空 、 干燥保藏法 這種方法是利用低溫 、 干燥 、 缺氧等條件保存菌種 ， 一般可保存 10年左右 。 三 、 制種 、 保藏中易碰到的問題及處理方法 母種污染處理 原種 、 栽培種被雜菌污染的原因有哪些 ？怎樣鑒別 ？ 根據(jù)雜菌開始發(fā)生的部位 ， 大致有以下幾種污染原因： ⑴ 若雜菌同時在培養(yǎng)基的 上 、 中 、 下 部位發(fā)生 ， 主要是由于 培養(yǎng)基滅菌不徹底 造成的 。 引起的原因是 培養(yǎng)室濕度過大 、 棉塞受潮 ， 造成霉菌滋生所致 。 這些共同的質(zhì)量標準主要是 純 、 壯 兩條 。 （ 其它菌株 ） ⑵ 壯： 菌種長相正常 、 長勢旺 、 再生能力強 。 一、簡答題 組織分離 接種 → 母種 （ 一級 ） 接種 → → 原種 （ 二級 ） 接種 →→ 栽培種 （ 三級 ） 種菇 孢子分離 經(jīng)過這樣三級培養(yǎng) ， 食用菌菌絲數(shù)量大大增加 。 這些共同的質(zhì)量標準主要是純 、 壯兩條 。 （ 其它菌株 ） ⑵ 壯： 菌種長相正常 、 長勢旺 、 再生能力強 。食用菌優(yōu)良菌種的標準主要是純和（ 9）兩條。 （ 10）雜菌污染，（ 11）培養(yǎng)料滅菌不徹底，（ 12）、（ 13） 15%的石灰水， %多菌靈 二、填空題 演講完畢，謝謝觀看！ 。 二、填空題 菌種袋內(nèi)出現(xiàn)了綠色、黑色、黃色、紅色等顏色，原因是（ 10 ），若此現(xiàn)象同時發(fā)生在菌種袋的上、中、下部位，其原因可能是（ 11 ）。 （ 1）母種，（ 2）原種，（ 3）栽培種 母種分離常用的方法有：（ 4 ）、（ 5 ）和（ 6 ）三種 。 例如：香菇 7925菌種 ， 只能是 7925菌株菌絲體的純培養(yǎng) 。 培養(yǎng) 培養(yǎng) 寫出食用菌的制種程序 ⑴ 70%酒精： 一般用于手 、 種菇表面消毒； ⑵ %升汞： 常用于玻璃器皿 、 非金屬器械及種菇表面消毒； ⑶ %KMnO4： 一般 用于 用具 、 器皿消毒； ⑷ 5%石炭酸： 噴灑墻壁、地面及擦洗桌面等，也可用來蘇爾代替； ⑸ 2%來蘇爾、新潔爾滅： 用法同上； ⑹甲醛（福爾馬林）： 用于菇房和接種箱等空氣消毒； 方法：關(guān)閉門窗消毒，自行氣化； 用量： 10ml甲醛＋ 5g KMnO4／立方米。 一、簡答題 寫出 PDA培養(yǎng)基的配方和配制方法 。 例如：香菇 7925菌種 ， 只能是 7925菌株菌絲體的純培養(yǎng) 。 因此母種培育可以一次多培育幾支試管 ， 不要反復(fù)多次分離轉(zhuǎn)管 ，以確保菌絲旺盛的生活力 。 原種 、 栽培種被雜菌污染的原因有哪些 ？ 怎樣鑒別 ？ ⑶ 若雜菌先在 培養(yǎng)基表面 發(fā)生 ， 這是由于接種過程中 無菌操作不嚴 而引起的 。 二 、 菌種保藏 三 、 制種 、 保藏中易碰到的問題及處理方法 母種污染處理 ⑴ 細菌污染 底部取菌 覆蓋培養(yǎng)： 將熔化培養(yǎng)基冷卻到 40℃ ， 倒在已污染細菌的斜面上 ， 使之形成厚約 20 cm的覆蓋層 ， 當(dāng)食用菌菌絲透過培養(yǎng)基形成新的菌落時 ， 即可挑取轉(zhuǎn)管純化 。 濾紙片保藏法 將食用菌的孢子吸附在無菌的濾紙條上 ，干燥后進行保存 ， 一般可保存 3~5年 。 二 、 菌種保藏 （ 二 ） 石蠟封藏法 （ 隔絕空氣法 ） 方法： 用注射器注入滅菌的石蠟 。
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