【正文】 防性治療 – 免疫接種 活動性 TB – 每年 900萬新發(fā)病例 僅為冰山一角 Latent TB “hidden epidemic” 2 billion people infected 48 Wenen LIU 結(jié)核感染 T細(xì)胞檢測 49 Wenen LIU ? γ 干擾素釋放實(shí)驗(yàn) （ IGRA， interferon gamma release assay） ? 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù) （ ELISPOT， EnzymeLinked ImmunoSpot assay） ? 結(jié)核桿菌特異抗原 早期抗原靶 6（ ESAT6） early secreted antigenic target 6 培養(yǎng)濾液蛋白 10（ CFP 10） culture filtrate protein 10 ） 技 術(shù) 背 景 50 Wenen LIU ? 結(jié)核感染者體內(nèi)存在特異的效應(yīng) T淋巴細(xì)胞，效應(yīng) T淋巴細(xì)胞再次受到結(jié)核抗原刺激時(shí)會分泌多種細(xì)胞因子（ IFNγ ）。 ? 其技術(shù)原理，可一句話概括為：用抗體捕獲培養(yǎng)中細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子，并以酶聯(lián)斑點(diǎn)顯色方式將其表現(xiàn)出來（ Sedgwick JD 2023）。 ： 65KD熱休克蛋白基因 (hsp65)、 32KD蛋白基因、 DnaJ蛋白基因、 RNA聚合酶B(rpoB) 和 MPB64蛋白基因 (mpb64）等。 ? 藥敏試驗(yàn)周期長，因此檢測耐藥基因成為近年來的研究熱點(diǎn)。 65 Wenen LIU 臨床常見真菌的快速診斷 G試驗(yàn) GM試驗(yàn) 分子生物學(xué)技術(shù) 66 Wenen LIU ,3β D葡聚糖 G試驗(yàn) ? 1， 3β D葡聚糖是酵母和絲狀真菌細(xì)胞壁的多聚糖成分，以假絲酵母菌屬含量最高，而其他微生物動物及人的細(xì)胞成分和細(xì)胞外液都不含這種成分。 67 Wenen LIU 標(biāo)本要求 ? 采樣過程要求無菌操作 ? 常規(guī)病人早上用藥治療前空腹采血取樣（血透患者透析前采血） ? 標(biāo)本類型：抗凝靜脈血，使用無熱原真空采血管 ? 采血量： 23ml，立即混勻 ? 半小時(shí)內(nèi)送檢。血清標(biāo)本最多可凍融四次。 ? 原理：是一種微孔板雙抗體夾心法，采用小鼠單克隆抗體 EBA2，檢測人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。打開后標(biāo)本需在 48小時(shí)內(nèi)完成檢測。但不能區(qū)分曲霉菌種。 ? 實(shí)時(shí) PCR檢測：使用物種特異性探針或?qū)χ苯觼碓从陉栃匝囵B(yǎng)基的物種基因擴(kuò)增后的解鏈溫度進(jìn)行分析。 多種方法聯(lián)合可提高感染性疾病 病原學(xué)診斷！ 79 Wenen LIU 謝 謝 80 Wenen LIU 靜夜四無鄰，荒居舊業(yè)貧。 10:31:2810:31:2810:31Saturday, January 21, 2023 1乍見翻疑夢，相悲各問年。 2023年 1月 21日星期六 10時(shí) 31分 28秒 10:31:2821 January 2023 1做前，能夠環(huán)視四周；做時(shí)，你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線向前。 :31:2810:31Jan2321Jan23 1世間成事，不求其絕對圓滿，留一份不足，可得無限完美。 2023年 1月 上午 10時(shí) 31分 :31January 21, 2023 1少年十五二十時(shí)，步行奪得胡馬騎。 10:31:2810:31:2810:311/21/2023 10:31:28 AM 1越是沒有本領(lǐng)的就越加自命不凡。 :31:2810:31:28January 21, 2023 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 上午 10時(shí) 31分 28秒 上午 10時(shí) 31分 10:31: MOMODA POWERPOINT Lorem ipsum dolor sit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blanditut cursus. 感謝您的下載觀看 專家告訴 。 2023年 1月 上午 10時(shí) 31分 :31January 21, 2023 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 10:31:2810:31:2810:31Saturday, January 21, 2023 1知人者智，自知者明。 上午 10時(shí) 31分 28秒 上午 10時(shí) 31分 10:31: 楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 :31:2810:31:28January 21, 2023 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 , January 21, 2023 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒有。 2023年 1月 21日星期六 上午 10時(shí) 31分 28秒 10:31: 1比不了得就不比，得不到的就不要。 10:31:2810:31:2810:311/21/2023 10:31:28 AM 1以我獨(dú)沈久，愧君相見頻。 ? 免疫學(xué)方法和 分 子生物學(xué)方法 ： 早期、快速特異地進(jìn)行診斷。 陽性預(yù)測值可達(dá) 100%。血清標(biāo)本最多可凍融四次。 ? 檢測標(biāo)本：血清標(biāo)本，密封，無菌操作。 ? 對真菌感染癥狀進(jìn)行診斷，陽性結(jié)果代表存在侵襲性真菌感染 69 Wenen LIU (GM) ? 半乳甘露聚糖 (GM) 是一種對熱穩(wěn)定的水溶性的物質(zhì)，是廣泛存在于曲霉和青霉細(xì)胞壁中的一類多糖。打開后標(biāo)本需在 48小時(shí)內(nèi)完成檢測。 ? 目前的檢測方法為 G試驗(yàn)，其 原 理 是 1， 3β D葡聚糖有特異性激活鱟變形細(xì)胞裂解物中的 G因子引 起裂解物凝固，故稱為 G試驗(yàn)。結(jié)核分支桿菌耐藥性的基因檢測技術(shù)分為雜交系統(tǒng)和放大系統(tǒng)兩大部分。 63 Wenen LIU TB分子分型技術(shù) ? IS6110RFLP（ 插入序列 6110限制性片段長度多態(tài)性分析）方法目前依然被認(rèn)為是結(jié)核分枝桿菌基因分型的 “ 金標(biāo)準(zhǔn) ” 。 其中最為常用的是 16SrRNA基因 。 ? 由于效應(yīng) T細(xì)胞存活時(shí)間很短，而且具有特異性，因此可以作為機(jī)體是否正處于被感染的指標(biāo)，無論是否有臨床癥狀。 45 Wenen LIU 原 理 ? 結(jié)核感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)以細(xì)胞免疫為主，作為免疫應(yīng)答的一部分， T細(xì)胞受結(jié)核抗原刺激致敏，