實(shí)驗(yàn)植物基因工程簡(jiǎn)介(文件)
【正文】 CR擴(kuò) 增目的基因 DNA測(cè) 序驗(yàn)證酶 切連 接表達(dá)載 體轉(zhuǎn) 化植物抗生素 篩選轉(zhuǎn) 基因植物引物設(shè)計(jì)根據(jù) 表達(dá)載體的多克隆位點(diǎn)來設(shè)計(jì) 引物，酶切位點(diǎn)外加保護(hù)堿基a) 引物 長(zhǎng)度 大于 16bp,一般為 2024個(gè)核苷酸 b) 引物 與靶序列間的 Tm值 不應(yīng)過低 c) 引物 不應(yīng)有 發(fā)夾結(jié)構(gòu) 。u對(duì)于較大片段的 DNA，則要用低濃度的瓊脂糖凝膠。Marker 2022酶切體系Enzyme1： 1 181。LddH2O: 補(bǔ)齊至 20 181。LBuffer： 2 181。u在一定的電場(chǎng)強(qiáng)度下， DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應(yīng)，即 DNA分子本身的大小和構(gòu)型。不同酶的識(shí)別位點(diǎn)不同酶 切 位點(diǎn) ： DNA上一段堿基的特定序列，限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別出這個(gè)序列并在此將 DNA序列切成兩段 ?？寺≥d 體復(fù)制基因選擇 性標(biāo)記多克隆位點(diǎn) TA克隆載體表達(dá)載體表達(dá)載體 是可攜帶外源 DNA片段進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制并轉(zhuǎn)錄、翻譯的載體。植物基因工程實(shí)驗(yàn)課程安排 植物基
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