專題1基因工程12基因工程的基本操作程序修改(文件)
【正文】 不同點(diǎn) 編碼區(qū)是 _____的 編碼區(qū)是間隔的、 _____的 相同點(diǎn) 都由能夠編碼蛋白質(zhì)的 ______和具有調(diào)控作用的 ______區(qū)組成的 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較 思考 編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質(zhì)，原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)一樣長(zhǎng)嗎？ 連續(xù) 不連續(xù) 編碼區(qū) 非編碼 ① 概念 ： PCR全稱為 _______________，是一項(xiàng) 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù) ③條件： _______________________、 _______________、 ___________ 、 ___________ 、 ___________. 等 ② 原理： __________ ④ 方式：以 _____方式擴(kuò)增，即 ____（ n為擴(kuò)增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤ 結(jié)果： 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 雙鏈 DNA復(fù)制 四種脫氧核苷酸 一對(duì)引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增 要有一段已知目的基因的核苷酸序列（前提條件） 溫度 ⑥ 過(guò)程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板 在熱作用下， _____斷裂，形成 ___________ b、退火 （ 復(fù)性 55℃ 60℃ ）：系統(tǒng)溫度降低，引 物與 DNA模板結(jié)合，形成局部 ________。 (基因工程的核心 ) ③ 將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 _____處，再加入適量 __________，形成了一個(gè)重組 DNA分子 (重組質(zhì)粒 )。 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。 （ 2）將重組 DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和 法。 在基因操作的基本步驟中 ， 不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是 （ ） A、 人工合成目的基因 B、 目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 C、 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 D、 目的基因的檢測(cè)和表達(dá) C 練習(xí) (四 )目的基因的檢測(cè)與鑒定 —— 檢查是否成功 檢測(cè) — 鑒定 —— ① 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA 上是否插入了目的基因 ② 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ③ 檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 方法 —— 方法 —— 方法 —— DNA分子雜交 分子雜交 （注意與上不同之處） 抗原抗體雜交 常用的受體細(xì)胞： 動(dòng)植物細(xì)胞、大腸桿菌、土壤農(nóng)桿菌、枯草桿菌等。 Ti質(zhì)粒的TDNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體上 農(nóng)桿菌特點(diǎn)： 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ： 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 ： 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)少 處理細(xì)胞 → 細(xì)胞 → 表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 → ___
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