12基因工程的基本操作程序z4班l(xiāng)(文件)
【正文】 獲取目的基因的最方便方法 在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是 A、化學(xué)合成法 B、基因組文庫法 C、 cDNA文庫法 D、多聚酶鏈式反應(yīng) 下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是 ①從基因文庫中獲取目的基因 ②利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 ③反轉(zhuǎn)錄法 ④通過 DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．②③ A D 的內(nèi)容，正確的組合是 C 在基因工程中，把選出的目的基因（共 1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是 460個）放入 DNA擴增儀中擴增 4代，那么，在擴增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是 B 目的基因主要是指 _______________的結(jié)構(gòu)基因。 編碼蛋白質(zhì) 核苷酸 染色體 轉(zhuǎn)錄 表達 體外 核苷酸 引物 人工合成 二、基因表達載體的構(gòu)建 （核心） (1)用一定的 _________切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切 口，露出 ____________。 質(zhì)是什么？ ？ ，應(yīng)如何操作？ ，有哪幾個步驟涉及到堿基 互補配對？ 小結(jié) : 基因工程的基本操作程序 1. 獲取目的基因 ? 從基因文庫 ? 利用 PCR ? 化學(xué)方法人工合成 2. 構(gòu)建基因表達載體 ? 目的基因、啟動子、終止子、標記基因 3. 將目的基因?qū)胧荏w細胞 ? 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法、顯微注射技術(shù)、感受態(tài)細胞 4. 目的基因的檢測與鑒定 ? 檢測：是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯 ? 鑒定 ，該抗性基因在基因工程中的主要作用是 A．提高受體細胞在自然環(huán)境中的耐藥性 B．有利于對目的基因是否導(dǎo)入進行檢測 C．增加質(zhì)粒分子的分子量 D．便于與外源基因連接 2. 有關(guān)基因工程的敘述正確的是 A．限制酶只在獲得目的基因時才用 B．重組質(zhì)粒的形成是在細胞內(nèi)完成的 C．質(zhì)粒都可作為運載體 D．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料 B D A．基因槍法 B．顯微注射法 D．花粉管通道法 B B 有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是 A、 DNA連接酶將黏性末端的堿基對連接起來 B、限制性內(nèi)切酶用于目的基因的獲得 C、目的基因須由運載體導(dǎo)入受體細胞 D、人工合成目的基因不用限制性內(nèi)切酶 A ada(腺苷酸脫氨酶基因 )通過質(zhì)粒 pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。 (2)根據(jù) TDNA這一轉(zhuǎn)移特點，猜測該 DNA片段上可能含有控制 _____________________ (酶 )合成的基因。 ，聯(lián)系前面有關(guān)細胞器功能的知識，結(jié)合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生產(chǎn)人的糖蛋白，可以用大腸桿菌嗎？ 有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價結(jié)合的糖鏈，這些糖鏈是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體上加工完成的，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在于真核細胞中，大腸桿菌不存在這兩種細胞器，因此，在大腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。 （ 2）將 cDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動子，另外加上抗四環(huán)素的基因，構(gòu)建成一個表達載體。
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