hplc常見(jiàn)故障排除及維護(hù)(文件)
【正文】 座 寶石活塞桿 密封圈 排出閥關(guān)閉 液流方向 泵的工作原理： ① 吸液過(guò)程 泵 頭 泵腔體 吸入閥關(guān)閉 活塞向前運(yùn)動(dòng) 泵 座 寶石活塞桿 密封圈 排出閥導(dǎo)通 液流方向 泵的工作原理： ② 排液過(guò)程 HPLC 常見(jiàn)故障因素（泵頭） 柱塞桿 密封圈 HPLC 常見(jiàn)故障因素（泵頭） 出口單向閥 進(jìn)口單向閥 泵頭 泵 頭 吸入閥寶石球與球坐粘連，吸入閥不能導(dǎo)通 活塞向后運(yùn)動(dòng) 泵 座 排出閥關(guān)閉 液流方向 泵吸液過(guò)程有故障情況： 吸入閥寶石球粘連 泵腔體內(nèi)沒(méi)有液體流入 寶石活塞桿 密封圈 排出閥導(dǎo)通 泵 座 寶石活塞桿 密封圈 吸入閥寶石球與球座之間有雜質(zhì)，液體反向泄漏 液流方向 泵排液過(guò)程有故障情況： 寶石球與球座之間有雜質(zhì) 反向泄漏液流方向 反向漏液方向 活塞向前運(yùn)動(dòng) HPLC 常見(jiàn)故障因素（單向閥） 出口閥 進(jìn)口閥 寶石球不能向上運(yùn)動(dòng) 液流方向（正向） 無(wú)液流流出 ? 寶石球與球座粘連 不能向上運(yùn)動(dòng) ? 使正向流動(dòng)的液流 ① 寶石球與球坐粘連 單向閥有故障情況： 不能通過(guò) 接觸面處有雜質(zhì) ? 寶石球與球座之間 ? 寶石球與球座不能 ? 形成了液體的反向 ② 寶石球與球座之間有雜質(zhì) 單向閥有故障情況： 液流方向（反向） 緊密接觸 有雜質(zhì) 泄漏 如何減少單向閥的故障 ? 流動(dòng)相一定要用 m的濾膜過(guò)濾。 ? 定期對(duì)流動(dòng)相過(guò)濾頭進(jìn)行清洗。 ? 色譜柱的壓力不要太高。 ? 避免在沒(méi)有流動(dòng)相時(shí)運(yùn)行泵（建議：在泵進(jìn)行檢測(cè)工作時(shí)設(shè)定最小壓力）。 ?XDB, 有機(jī)聚合物等填料可使用高 pH 水溶液 /有機(jī)溶液，如： NaOH 50% 異丙醇 /水溶液，硅膠基質(zhì)應(yīng)盡量減少接觸時(shí)間 (1530 min)。 Hold 100% B for 30 min., Return to 100% A in 5 min. Repeat 3 times. 總 結(jié) 如果使用時(shí)加以注意，大部分的液相色譜柱的問(wèn)題是可以預(yù)防的 流動(dòng)相必須是互溶的，無(wú)顆粒 使用保護(hù)柱和在線過(guò)濾器，并定期更換 使用恰當(dāng)?shù)臉悠分苽浞椒? 使用恰當(dāng)?shù)纳V柱清洗程序 不同類(lèi)型的色譜柱，請(qǐng)選擇不同的操作條件 (如： SB: pH 16, XDB: pH 311) 保存柱反壓及重要的色譜參數(shù)的記錄 (如： R, N, As, k39。 ? 保留時(shí)間的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留時(shí)間的無(wú)規(guī)律波動(dòng)。 ? 流動(dòng)相污染也可能是原因之一。例：硅膠基質(zhì)在 pH4時(shí)水解穩(wěn)定性最好。其他硅膠基質(zhì)鍵合相在水溶液環(huán)境中也可以發(fā)生水解，如氨基鍵合相等。通常通過(guò)實(shí)驗(yàn)可判斷污染的來(lái)源。 保留時(shí)間不重現(xiàn)的因素與排除 ? 通常樣品中的強(qiáng)保留組分具有較高的分子量，在此情況下，保留時(shí)間漂移的同時(shí)或其后會(huì)有反壓的增加。通常使用在給定色譜條件下的強(qiáng)溶劑，但并非所有污染物都可以在流動(dòng)相中溶解。 反沖色譜柱僅是不得已時(shí)采用的辦法。此現(xiàn)象是由流動(dòng)相不浸潤(rùn)固定相表面而致。 謝謝觀看！ 第八版 第七版 第六版 第五版 第四版 第三版 第二版 第一版 版 本 改 編 者 日 期 備 注 。 保留時(shí)間不重現(xiàn)的因素與排除 ? 色譜柱長(zhǎng)期儲(chǔ)存也會(huì)發(fā)生此現(xiàn)象。如流動(dòng)相中易揮發(fā)組分的揮發(fā)及循環(huán)使用流動(dòng)相等。 DMSO常常用于去除反相色譜柱中的蛋白。 ? 避免色譜柱污染最簡(jiǎn)單的方法是防患于未然。這些根源通常是樣品基質(zhì)。 ? HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過(guò)濾器，它可以過(guò)濾并吸附流動(dòng)相攜帶的任何物質(zhì)。雙官能團(tuán)配體和三官能團(tuán)配體比單官能團(tuán)配體的鍵合相要穩(wěn)定；長(zhǎng)鏈鍵合相要比短鏈鍵合相穩(wěn)定；烷基鍵合相比氰基鍵合相穩(wěn)定的多。 應(yīng)注意：水是很容易污染的流動(dòng)相成分。 保留時(shí)間不重現(xiàn)的因素 ? 保留時(shí)間漂移的幾種最常見(jiàn)的原因如下： ? 一 、色譜柱的平衡 ? 二 、固定相穩(wěn)定性 ? 三 、色譜柱污染 ? 四 、流動(dòng)相的組成
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