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如何得到染料法熒光pcr的可靠數(shù)據(jù)(文件)

2025-08-22 15:27 上一頁面

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【正文】 細看每個孔,選取其中正確的熔解曲線 pcr從樣本的角度,即采用了什么樣得樣本,孔位置的角度(這幾個結(jié)果好的樣本孔是否相連,是否位于擴增儀的同排或者同列的位置),復(fù)孔的情況是否相似;操作的角度來進行分析和判斷; 正確的熔解曲線的數(shù)據(jù),它的CT值是可以用的,可以進行成對的數(shù)據(jù)分析,如進行Δct分析。分析所有復(fù)孔情況,看結(jié)果是否吻合。 好的熔解曲線和差的熔解曲線放在一起分析,轉(zhuǎn)過來看擴增曲線 pcr 再來看熔解曲線pcr 結(jié)論:基本得到目的產(chǎn)物,下一步工作是優(yōu)化反應(yīng)程序,提示:提高退火溫度,縮短延伸時間。經(jīng)常要對應(yīng)二者來看的。上圖中有一對復(fù)孔熔解曲線比較好,基本可以認為是單峰;一對復(fù)孔熔解曲線出現(xiàn)了雙峰;其實仔細看,好的熔解曲線前面也有一個很小很小的峰,位置和不好的雙峰是相同的。而熔解曲線結(jié)果比較好的時候,復(fù)孔的結(jié)果也是不錯的。 選擇熔解曲線結(jié)果
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