響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工藝畢業(yè)論文(文件)
【正文】 喜樹的開發(fā)利用僅限于提取抗癌藥物喜樹堿，其資源沒(méi)有得到充分利用，特別對(duì)葉子的開發(fā)利用相對(duì)較少[7]。楊國(guó)恩等得到超聲微波協(xié)同輔助溶劑法提取喜樹果總黃酮提取的優(yōu)化工藝：提取時(shí)間48 min，提取溶劑中乙醇體積分?jǐn)?shù)70％，料液比1g:6mL，%[6]。 響應(yīng)面設(shè)計(jì)分析方法響應(yīng)面分析法( Response Surface Methodology, RSM) , 將數(shù)學(xué)與統(tǒng)計(jì)學(xué)相結(jié)合, 采用多元二次回歸方法作為函數(shù)估計(jì)的工具來(lái)擬合因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系, 依此可對(duì)函數(shù)的響應(yīng)面和等高線進(jìn)行分析來(lái)尋求最佳工藝參數(shù)。響應(yīng)面法的基本思想是通過(guò)近似構(gòu)造一個(gè)具有明確表達(dá)形式的多項(xiàng)式來(lái)表達(dá)隱式功能函數(shù)。 建模最常用和最有效的方法之一就是多元線性回歸方法[12]。 實(shí)驗(yàn)研究方法本論文首創(chuàng)性地對(duì)喜樹葉進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化黃酮提取工藝，對(duì)開發(fā)喜樹葉資源具有一定的研究?jī)r(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。在波長(zhǎng)510 nm附近有吸收，可用分光光度法進(jìn)行測(cè)定[5]。藥品試劑均達(dá)分析純。取出樣品，先置通風(fēng)處晾干，再將濾紙包置烘箱中130 ℃烘干，放入干燥器中冷卻備用。70%乙醇溶液： mL 95%乙醇稀釋到500 mL。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制[5]：、 mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液于6個(gè)25 mL容量瓶中， mL 5%亞硝酸鈉，放置6 min， mL 10%三氯化鋁后放置6 min， mol/L NaOH mL，加70%乙醇定容至刻度，搖勻，放置12 min得測(cè)定液。 mL，置于25 mL 容量瓶中待測(cè)定。 黃酮提取單因素試驗(yàn) 料液比的影響取樣品1 g，乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，料液比分別為1:1:1:1:1:50萃取，恒溫70℃，回流提取兩次，每次120 min，測(cè)定提取液黃酮含量，并計(jì)算得率。 提取時(shí)間的影響取樣品1 g，乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，料液比1：40，恒溫70℃，回流提取兩次，每次回流提取60 min、90 min、120 min、150 min，測(cè)定提取液黃酮含量，并計(jì)算得率。回歸方程為：A = ，R2 =?？紤]到生產(chǎn)成本，宜選取料液比1:40。實(shí)際上可以看出，提取3次時(shí)喜樹葉總黃酮已基本溶出完全，為了節(jié)省時(shí)間和節(jié)約溶劑，從工業(yè)成本和提取周期角度來(lái)看，宜選取提取3次。圖 提取溫度對(duì)提取率的影響 提取時(shí)間對(duì)提取率的影響取樣品1 g，乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，料液比1：40，恒溫70℃，回流提取兩次，分別每次回流提取60 min、90 min、120 min、150 min的條件提取測(cè)定喜樹葉總黃酮含量，考察提取時(shí)間對(duì)喜樹葉總黃酮提取率的影響。由喜樹葉黃酮提取率(Y)對(duì)乙醇濃度（A）、料液比（B）、提取溫度（C）各試驗(yàn)因素所構(gòu)成的響應(yīng)曲面圖可以直觀地看出的交互作用對(duì)喜樹葉黃酮提取率的影響比較顯著。3個(gè)因素的二次項(xiàng)都具有顯著影響；而其他交互項(xiàng)、料液比及缺失項(xiàng)顯著性較差，也說(shuō)明料液比與另外兩個(gè)因素的交互作用不大。各因素對(duì)喜樹葉黃酮提取率的影響不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多元回歸分析，得到各因素對(duì)喜樹葉黃酮提取率(Y)影響的二次多項(xiàng)回歸模型方程: Y = ++++。然后通過(guò)響應(yīng)曲面綜合分析各工藝條件因素對(duì)喜樹葉總黃酮提取率的影響力，再結(jié)合單因素試驗(yàn)分析結(jié)果，得出了乙醇回流提取喜樹葉黃酮的最佳工藝條件為：乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%，料液比1:40，提取溫度為80℃，提取時(shí)間為90 min，提取次數(shù)為3次。其次，還要感謝生化系所有老師的關(guān)心和指正，你們都是我最好的老師，在你們的課堂上我學(xué)到了很多。最后寫在論文期間，還有多少同學(xué)、朋友以及父母親在背后給了我無(wú)形的幫助，在這里請(qǐng)接受我最誠(chéng)摯的謝意。另外，還要謝謝制藥1101班的王多等幾個(gè)學(xué)弟，謝謝你們?cè)谖沂置β档臅r(shí)候做我實(shí)驗(yàn)的幫手，辛苦了一整天。附錄實(shí)驗(yàn)相關(guān)照片附圖 1 乙醇回流提取喜樹葉黃酮基本裝置附圖 2 測(cè)定前實(shí)驗(yàn)臺(tái)操作概況附圖 3 實(shí)驗(yàn)顯色對(duì)比附圖 4 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收乙醇參考文獻(xiàn)[1] 曾淑燕，李映珍．喜樹生物學(xué)特性與栽培技術(shù)[J]．廣東林業(yè)科技，2007,23(1):118120．[2] 楊學(xué)義，朱立，孫超．喜樹資源及其開發(fā)利用[J]．資源開發(fā)與市場(chǎng)，2007, 23(7):618619．[3] 王曉梅，曹穩(wěn)根．黃酮類化合物藥理作用的研究進(jìn)展[J]．宿州學(xué)院學(xué)報(bào)， 2007,22(1):105107．[4] 王學(xué)利，喜樹葉總黃酮優(yōu)化提取方案的研究[J]，浙江林學(xué)院學(xué)報(bào)，2001,18(1):5052．[5] 黃瓚，李振申，王宗成．楮樹葉總黃酮提取工藝優(yōu)化[J]．湖南科技學(xué)院學(xué)報(bào)，2012,33(8):3134．[6] 范樹國(guó)，張萍萍，邱璐等．喜樹總黃酮提取方法比較[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011,39(6):462464．[7] 朱冬雪，顧采琴，柯德森．喜樹葉黃酮的微波輔助提取分離純化及抗氧化活性研究[J]．廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011(24):87．[8] 賈元慎，劃志坤，傅一窮．竹葉中黃酮類化合物的研究[J]．竹子研究匯刊，1995,4(2):3845．[9] 畢麗君，李慧．水芹中總黃酮類化合物最佳提取工藝的研究[J]．食品科學(xué)，1999,1(12):3537．[10] 楊國(guó)恩，麗婷，陳福．超聲微波協(xié)同輔助溶劑法提取喜樹果中黃酮化合物的研究[J]．光譜實(shí)驗(yàn)室，2010,27(1):2731．[11] 楊小紅，陳文姜，曼花等．白術(shù)總黃酮鑒別及含量測(cè)定[J]．湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2008,5(1):1619．[12] 王永菲，王成國(guó)．響應(yīng)面法的理論與應(yīng)用[J]．中央民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2005,14(3):236237．[13] , , Abdul Hamid et of enzymatic clarification of sapodilla juiceusing response surface methodolo
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