【正文】 驗：在動物固定部位，切開一定長度及深度的傷口，或用一定溫度及接觸時間，造成一定面積及深度的燙傷，并接種一定數(shù)量的化膿菌，形成急性或慢性開放性的感染性瘡瘍，用以觀察藥物的治療作用，如瘡面的炎癥反應(yīng)、滲出物、病原菌、組織新生、傷口愈合、組織張力等?？蛇m當(dāng)選作一些與活血有關(guān)的試驗，如局部溫度，血液循環(huán)或微循環(huán)等試驗。因此，在選擇藥效學(xué)試驗方法時，也應(yīng)各有側(cè)重。 外用中藥在試驗時應(yīng)以外用給藥為主，必要時可皮下注射給藥，如有可能，應(yīng)增作透皮吸收試驗。 （一）主要藥效學(xué)試驗 損傷模型試驗：在動物固定部位造成損傷（如砸傷、壓傷、打擊傷），或用結(jié)扎、化學(xué)物質(zhì)損傷坐骨神經(jīng)，或進行皮下（或肌肉內(nèi)）血腫等試驗，可用以觀察藥物的消腫、止痛、恢復(fù)運動功能，血腫吸收及局部病變恢復(fù)等治療作用。因此，應(yīng)選作2種以上抗炎消腫試驗，如小鼠耳腫、大鼠足腫或自芽腫、或毛細血管通透性試驗等。 若為外用中藥，應(yīng)增作皮膚毒理試驗（包括皮膚刺激性及致敏性試驗）。 （一）主要藥效學(xué)研究 祛風(fēng)除濕作用 （1）對實驗性關(guān)節(jié)炎的治療 ①對佐劑性多發(fā)性關(guān)節(jié)炎的抑制作用 大鼠右后足墊皮內(nèi)注射弗氏完全佐劑致炎，使之出現(xiàn)原發(fā)病變和繼發(fā)病變。 觀察新藥對續(xù)發(fā)性病變的治療作用：在佐劑注射后15～19天繼發(fā)性病變?nèi)啃纬珊箝_始給藥，觀察佐劑注射對側(cè)的足爪腫脹度、體重變化、前肢和尾部病變的嚴重程度。 （2）對其他免疫、變態(tài)反應(yīng)的影響 如觀察新藥對特異性體液免疫功能、非特異性屏障功能、Arthus反應(yīng)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)等試驗，可酌情選做。 ②對皮膚毛細血管通透性的影響 靜脈注入染料后，以過敏介質(zhì)如二甲苯外涂或組胺、5羥色胺、PGE2皮內(nèi)注射引起急性炎癥反應(yīng)，測定致炎部應(yīng)的染料通透性。 ②對大白鼠巴豆油氣囊腫的影響。治療以補腎為主，補腎生髓、益氣生血。 （2）再障小鼠骨髓造血作用：可用慢性苯吸入或其他方法造成小鼠骨髓造血障礙，觀察新藥對動物的周圍血象及骨髓各種成分的影響，以及對骨髓造血干細胞培養(yǎng)的影響。 （二）注意事項 試驗方法的選擇，決定于新藥的功能、主治與特點。必要時應(yīng)增加一般狀況、免疫功能、止血凝血系統(tǒng)及有關(guān)造血的某些因素及原料（如蛋白質(zhì)及鐵等）的觀測。 （2）在體外對瘧原蟲的殺滅作用 選擇適當(dāng)瘧原蟲株，在體外通過半數(shù)抑制濃度（IC50）的測定，觀察藥物的殺滅作用強度。 （二）注意事項 抗瘧藥物的主要藥效學(xué)應(yīng)以截瘧作用為重點。 選做體外試驗時，應(yīng)考慮所試藥物在體內(nèi)轉(zhuǎn)運和發(fā)揮療效的情況是否同體外試驗的情況相吻合，以及血中可能達到的藥物濃度。因此，中醫(yī)治療惡性腫瘤的治則，有扶正培本法、活血化瘀法、軟堅散結(jié)法、化痰祛濕法、清熱解毒法、疏肝理氣法、通經(jīng)活絡(luò)法、以毒攻毒法等。觀察瘤重抑制率，要求對照組瘤重均值在小鼠不得低于1克；實驗治療組動物平均體重下降（給藥前后自身比較）不得超過15％；動物死亡數(shù)不得超過20％；瘤重抑制率在30％以上，與對照組有顯著性差異。 （2）對腫瘤細胞體外生長的抑制作用 選擇二種以上腫瘤細胞株作體外培養(yǎng)，用五個或五個以上不同濃度，觀察藥物對細胞形態(tài)、細胞膜功能、集落形成能力、瘤細胞代謝或核酸蛋白質(zhì)前體摻入的影響。 扶正作用 （1）對荷瘤動物免疫功能的影響 根據(jù)腫瘤生長過程中機體免疫功能受損的情況，選擇其細胞免疫或體液免疫的二種或二種以上指標(biāo)，觀察藥物對荷瘤動物的保護作用。 （4）對荷瘤動物的抗癌作用 選擇一種或一種以上的實體型或腹水型移植性動物腫瘤，觀察藥物對瘤重或荷瘤生存時間的影響，經(jīng)重復(fù)試驗，取得可信的結(jié)果。 （2）對荷瘤動物化療的增效作用 選用烷化劑、代謝拮抗劑或抗癌抗菌素等三類有代表性的抗癌藥，與中藥合用，觀察有無協(xié)同增效作用，試驗時，空白對照、化療藥及化療藥加中藥二個以上劑量組，進行對比觀察。要求如上。 鑒于實驗性腫瘤雖有不同的組織學(xué)類型，但在生物學(xué)行為上尚缺乏顯著的組織特異性，因此在選擇研制治療肺、肝、胃等腫瘤的藥物時，除注意挑選相應(yīng)組織學(xué)類型的實驗性腫瘤模型外，也可用其他組織學(xué)類型的實驗?zāi)[瘤模型。 各類抗癌新藥和抗癌輔助新藥的藥效學(xué)具體要求是；（1）抗癌藥：一二類新藥可在所列祛邪作用中進行對動物移植性腫瘤的抑制作用研究，并在其它三項試驗中選做一項；三、四、五類新藥可在祛邪作用的四項試驗之一中得到確認。 2治療視網(wǎng)膜靜脈阻塞中藥的藥效學(xué)研究視網(wǎng)膜靜脈阻塞是一種嚴重影響視力的常見病，可分為肝膽火熾型、氣滯血瘀型、陰虛火旺型及氣血兩虛型等。 （一）主要藥效學(xué)研究 活血化瘀試驗 （1）抗血小板聚集試驗：以整體試驗為主，體內(nèi)給藥、體外測試為宜。除觀察微血管本身變化外，尚應(yīng)注意微血流和血管周圍的出血等情況。 （3）小鼠耳腫脹試驗：觀察新藥有關(guān)抗炎消腫作用。 視網(wǎng)膜靜脈阻塞可為局部疾患，更常見的是全身性疾患的局部表現(xiàn)。治療以回陽救逆、養(yǎng)心復(fù)脈為主，急則治其標(biāo)，緩則治其本，并根據(jù)其病因、病機、病情，辨證施治，以達標(biāo)本兼治之目的。 （3）創(chuàng)傷性休克：可用肢體缺血法，轉(zhuǎn)鼓法或打擊法誘發(fā)休克，動物可選用犬、貓或兔。若新藥為標(biāo)本兼治者，應(yīng)根據(jù)功用主治，有針對性的選作至少兩種試驗，例如主治邪毒內(nèi)陷之脫證，應(yīng)選作感染性休克；主治失血亡陽之脫證，應(yīng)選作失血性休克及有關(guān)試驗。 ②扶正試驗：如應(yīng)激試驗、免疫試驗等。 輔助試驗 為了較充分的證實新藥治療厥脫證的藥效，除進行上述主要藥效學(xué)研究外，必要時還應(yīng)適當(dāng)選作一些輔助試驗。 （4）其他。 （2）重要內(nèi)臟血流量如腦、腎及冠狀動脈血流量。 （3）主治過敏性休克者：應(yīng)增作抗過敏等有關(guān)試驗。 血流動力學(xué)及重要內(nèi)臟（特別是腎）血流量的影響：藥物對心腦腎等重要內(nèi)臟血流量的影響，以及對整體的血流動力學(xué)影響，與治療作用有密切關(guān)系，應(yīng)進行有關(guān)試驗。 （5）其他類型休克：如燒傷、疼痛、過敏、腸道缺血、胰島素休克，以及微循環(huán)障礙、彌漫性血管內(nèi)凝血等動物模型，亦可適當(dāng)選用。 （一）主要藥效學(xué)試驗 回陽救逆試驗 參照抗休克藥效學(xué)研究，可供選擇的試驗如下： （1）失血性休克；可用犬、貓進行試驗，大鼠及兔較差。 本類新藥尚缺乏理想動物模型，如有條件，可進行兔眼底觀察，并利用激光或前述各項試驗方法造成免眼底視網(wǎng)膜靜脈阻塞或微循環(huán)障礙，以進行藥效學(xué)研究。第三、五類新藥，可作1之（l）（2）（4）項及2之（1）（2）項試驗，其他試驗酌情選作。 止血消腫試驗 （1）止血試驗：包括止血、凝血等有關(guān)試驗。 （3）血液流變性試驗：可用正?；蜓瞿Ｐ蛣游镉^察新藥對血液流變學(xué)的各種指標(biāo)，如血粘度、紅細胞聚集性及血小板功能等指標(biāo)的影響。治療以活血化瘀為主，佐以清肝膽郁熱、滋陰泄火、益氣養(yǎng)血等藥。對荷瘤動物生物調(diào)節(jié)因子的影響，對于本類藥物更為重要，選擇指標(biāo)時一般宜優(yōu)先考慮。有的中藥針對腫瘤患者的某個中醫(yī)證型進行治療的，除對腫瘤的作用外，應(yīng)另行設(shè)計合適的指標(biāo)。 減毒的抗癌輔助藥，應(yīng)是：（1）對腫瘤生長無明顯影響或有一定抗癌作用；（2）能對特定的化、放療的毒副作用有肯定的防治作用；（3）不影響化、放療的療效；（4）對荷瘤機體的正常功能無明顯損傷作用。試驗時，所用放、化療的劑量應(yīng)出現(xiàn)恒定的毒副反應(yīng)，加用中藥后觀察藥物對特定毒副反應(yīng)的作用。 增效作用 （1）對荷瘤動物放療的增效作用 選用臨床使用的放療原如Co60或X光，與中藥合用，以觀察有無協(xié)同增效作用。在荷瘤動物中觀察藥物對它們的影響。 （3）人體腫瘤的裸鼠移植試驗 （4）對動物自發(fā)性腫瘤或誘發(fā)性腫瘤的抑制試驗。 癌株選擇應(yīng)盡量考慮與臨床擬治腫瘤的性質(zhì)、部位等相近似，如擬治肝癌，可首選用肝癌瘤株等，給藥途徑應(yīng)與臨床一致，并設(shè)二個或二個以上劑量組。 （一）主要藥效學(xué)研究 祛邪作用 （1）對動物移植性腫瘤的抑制作用 選擇二種或二種以上的小鼠、大鼠或兔的移植性腫瘤，作實驗治療。 2治療惡性腫瘤中藥的藥效學(xué)研究惡性腫瘤屬中醫(yī)癌、巖、惡腫、積聚等范疇，系正氣虛弱、留滯客邪、氣滯血瘀、邪毒積聚、蘊郁成塊所致。第三、五類新藥也應(yīng)有顯著的截瘧作用，或有一定的截瘧作用而同時兼有顯著的消痞或補虛作用，因此，或在二種動物模型、一種體外實驗上證實，或在猴上證實截瘧作用并在消痞和補虛作用各選一項指標(biāo)，證明其功效。 補虛作用 （1）觀察藥物對感染動物紅細胞、網(wǎng)織紅細胞、血紅蛋白量的影響。 2抗瘧中藥的藥效學(xué)研究瘧疾由瘧原蟲引起，臨床以發(fā)熱、貧血、腹部痞塊為特征，抗瘧中藥應(yīng)具有截瘧、消痞、補虛之功能。三五類新藥可在兩者中各選一項試驗，必要時可適當(dāng)增選其他試驗、四類新藥可選作1－2項試驗。 （2）放射性損傷的血虛證：用鈷60或X線照射小鼠或大鼠，可產(chǎn)生不同程度的血虛證，用以證實新藥的藥效。血虛證尚包括其他原發(fā)性及繼發(fā)性貧血，可參照本節(jié)進行藥效學(xué)研究。 一、二類新藥可做對佐劑性關(guān)節(jié)炎及其他實驗性關(guān)節(jié)腫脹的藥效作用，以及根據(jù)新藥作用特點，在免疫調(diào)節(jié)、溫經(jīng)止痛、活血通絡(luò)作用中選做1項指標(biāo)；三、五類新藥應(yīng)做對佐劑性關(guān)節(jié)炎的作用，并從祛風(fēng)除濕的其他指標(biāo)中、以及溫經(jīng)止痛或活血通絡(luò)的指標(biāo)中各選做1項；四類新藥應(yīng)做對佐劑性關(guān)節(jié)炎的作用外，并根據(jù)原劑型的藥效特點，從其它指標(biāo)中再選做1項指標(biāo)，與原劑型作對比試驗。 （2）對白細胞游走的影響 用致炎物給大鼠或小鼠腹腔或胸腔注射引起炎癥，使腹、胸腔內(nèi)嗜中性白細胞數(shù)量增加，觀察給藥對胸腹腔滲出液中白細胞數(shù)量的影響。 4．活血通絡(luò)作用 根據(jù)新藥的作用特點選用抗炎性滲出、炎癥細胞游走、結(jié)統(tǒng)組織增生等炎癥過程三個階段模型，觀察新藥的清熱通絡(luò)作用。 免疫調(diào)節(jié)作用：風(fēng)濕痹證常與自身免疫有關(guān)，治療痹證的藥物應(yīng)作免疫調(diào)節(jié)試驗。 觀察新藥對原發(fā)病變的影響：在足墊內(nèi)注射弗氏佐劑致炎前給藥，主要觀察致炎后18小時或不同間隔時間，佐劑注射側(cè)足爪腫脹度。 2治療痹證中藥的藥效學(xué)研究痹證是人體營衛(wèi)氣血失調(diào)，肌表、經(jīng)絡(luò)遭受風(fēng)寒濕熱侵襲，氣血經(jīng)絡(luò)為病邪閉阻而引起經(jīng)脈、肌膚、關(guān)節(jié)、筋骨疼痛、酸楚麻木、著重、屈伸不利或關(guān)節(jié)腫大、僵直、畸形、肌肉萎縮，活動障礙，嚴重者影響臟腑，相似于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)自身免疫性疾病的風(fēng)濕病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。 （二）注意事項 一二類新藥可進行上列各項試驗（每項選作1一2種試驗）；三五類新藥可選作3項試驗；四類新藥則應(yīng)選作2項試驗，并與原劑型對照觀察。因此，止痛作用是本類藥物的主要藥效，可選用2種以上止痛試驗觀察藥物的作用強度、起效及持續(xù)時間。 2治療腰腿痛中藥的藥效學(xué)研究外感、內(nèi)傷及損傷均可引起腰腿痛，包括感染、腫瘤、風(fēng)濕、勞損、畸形、退變、骨折、脫位、代謝、內(nèi)分泌及多種疾患所引起的脊椎、關(guān)節(jié)、韌帶、椎間盤、肌肉、筋膜等損傷或病變。三五類新藥，可選作2項清熱解毒及1項化腐生肌試驗，并選作其他試驗l－2項。 （4）其他：某些周圍血管病、血栓性疾患，如靜脈曲張、動脈血栓或糖尿病等，可并發(fā)瘡瘍，除進行上述試驗外，應(yīng)增作藥物對血小板、血栓、及血管等有關(guān)試驗，以及對原發(fā)病的有關(guān)試驗。 其他試驗： （1）扶正試驗：扶正祛邪對慢性瘡瘍正虛邪實者十分重要，應(yīng)選作1－2項細胞或體液免疫試驗。 （2）抗炎試驗：根據(jù)中藥主治急性或慢性瘡瘍，選作小鼠耳腫、大鼠足跖腫或肉芽腫，白細胞游走或毛細血管通透性等試驗。 一、二類新藥可做對大鼠血紅蛋白尿性和變性血紅蛋白尿性急性腎衰的治療作用，并在其它急性腎衰、急性腎小管壞死實驗中或在能反映解除主癥有作用的輔助實驗中選做1項；三、五類新藥可做對大鼠血紅蛋白尿性急性腎衰的治療作用，并在其它急性腎衰、急性腎小管壞死或輔助實驗中選做1項；四類新藥應(yīng)根據(jù)原劑型的藥效特點，選做1～2項指標(biāo)，并同原劑型進行比較。 （5）其他動物實驗性腎小管壞死：如幼年小鼠氯仿吸入、大量硝酸鈾腹腔注射、家兔重鉻酸鉀皮下注射等引起急性腎小管壞死。 （1）大鼠血紅蛋白尿急性腎衰：以甘油肌肉注射，24小時后即有尿素氮升高，少尿或無尿，類似人的急性腎衰癥狀。 一、二類新藥宜做對實驗性急性腎炎的治療作用、抗病原體作用、利尿作用，并針對新藥的功能，選做其它作用中的1項指標(biāo)；三、五類新藥宜在l至3項中選做2項，在第4項中選做1項指標(biāo)；四類新藥應(yīng)根據(jù)原劑型的藥效特點，選做2項指標(biāo)，并同原劑型比較。 利尿作用 在水負荷動物（如大鼠或兔等）中，觀察新藥對排出尿量的影響。陽水宜宣、宜通，陰水宜溫、宜補。 中藥若為外用（洗劑，栓劑或陰道內(nèi)給藥），則應(yīng)增作局部毒理學(xué)研究，如皮膚毒理或陰道毒理等有關(guān)試驗。 一二類新藥可根據(jù)上述原則，選作上列各項有關(guān)的試驗。因此，應(yīng)根據(jù)中藥的功能特點及主治范圍，合理選擇試驗方法及觀測指標(biāo)。 治標(biāo)作用 （1）女性生殖系統(tǒng)炎癥常有陰癢、疼痛、發(fā)熱等癥候，必要時可增作止癢、止痛、解熱等有關(guān)試驗。 （2）抗炎試驗：由于女性生殖系統(tǒng)炎癥可為急性、慢性或增殖性炎癥，抗炎試驗可選擇小鼠耳腫，大鼠足跖腫及肉芽腫試驗，以觀察藥物對不同類型炎癥的治療作用。 上列試驗項目中2為基本試驗，其他試驗應(yīng)根據(jù)新藥特點酌情選作，一二類新藥可完成1至4試驗；三及五類新藥可完成上列1及2項試驗，其他試驗可根據(jù)新藥特點酌情選作；四類新藥應(yīng)與原劑型對比，完成上列1及有關(guān)的一項試驗，其他試驗酌情選作。 新藥對雌性幼鼠生殖器官發(fā)育的影響：如子宮、卵巢及雌激素等。 （一）主要藥效學(xué) 新藥對子宮的影響 （1）對未孕子宮（在體或離休）的影響。③圍產(chǎn)期毒性試驗可免做）。 主治陽萎證及男性不育證的補腎壯陽藥：一二類新藥，可做上列試驗1－4項；三四五類做兩項試驗（試驗2中任選一項，及4各一項），其他試驗酌情選做。 對正?；虿B(tài)成年雄性動物生育能力的影響：觀察新藥對睪丸、精子（數(shù)量、質(zhì)量、活動能力）及雄性激素的影響，亦可觀察對幼年雄鼠睪丸等生殖器官發(fā)育的影響。一般可分為兩類：一類為功能性疾患，僅有性交功能障礙，不伴有內(nèi)分泌、性腺、生殖細胞等器質(zhì)性疾患，治療陽痿后可有正常生育能力；另一類則為器