【正文】 ③將印跡分子從聚合物中去除。？ 由于原核生物缺少翻譯后的加工系統(tǒng)，所以在很多情況下，人們不得不采用真核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，最常用的真核表達(dá)宿主是酵母菌。2）DNA重組（改組）(DNA shuffling)重組可以在同一基因的不同突變體之間進(jìn)行，也可以在不同物種的同源基因間進(jìn)行。 2）提高酶的穩(wěn)定性酶作為生物催化劑，一個最典型的缺點是不穩(wěn)定，因此，提高酶的穩(wěn)定性是酶分子定向進(jìn)化改造的另個重要目標(biāo)。8. 什么是融合酶?融合酶又叫雜合酶（hybrid enzyme）。（1）二級結(jié)構(gòu)融合通過對酶的某些特定功能的二級結(jié)構(gòu)（如底物識別位點螺旋結(jié)構(gòu)）進(jìn)行替換可以明顯改變酶的某些特性。？ 融合酶是人們改進(jìn)現(xiàn)有酶的特性和創(chuàng)造新酶的最重要方法之一。（以下答案來自網(wǎng)上：打破了酶是蛋白質(zhì)的傳統(tǒng)觀念；在生命起源問題上，為先有核酸提供了依據(jù)；為治療破壞有害基因，腫瘤等疾病提供手段。9. SELEX法篩選核酶主要過程是什么？指數(shù)擴增法系統(tǒng)進(jìn)化配體（SELEX）篩選核酶首先要求構(gòu)建一個隨機的多核苷酸單鏈DNA庫，然后將單鏈庫轉(zhuǎn)變?yōu)殡p鏈庫，并引入RNA靶序列，再利用鏈親和素柱對雙鏈隨機庫核酸分子進(jìn)行洗脫，在一定溫度和pH的特定離子緩沖液洗脫柱子，若有切割反應(yīng)發(fā)生，被切割的分子就被洗脫下來，再經(jīng)過PCR放大和分離，可重新回到與起始庫類似的隨機庫，從而完成第一輪篩選。具多種催化功能的核酶的發(fā)現(xiàn)及人工篩選的成功，支持了在蛋白質(zhì)產(chǎn)生以前核酶可能參與催化最初的新陳代謝的設(shè)想。用具有相應(yīng)特異性的核酶來抑制馬鈴薯卷葉病毒、水稻矮縮病毒、條紋葉枯病毒、番木瓜環(huán)斑病毒等的復(fù)制都有一定的效果。③影響酶的立體選擇性和催化反應(yīng)的平衡點。（4）可改變反應(yīng)平衡移動方向。（7）可擴大反應(yīng)pH值的適應(yīng)性。舉例說明如何選擇酶催化有機體中的有機溶劑選擇有機溶劑的標(biāo)準(zhǔn)主要是有機溶劑的極性（親水性）強弱。主要原因是：底物和產(chǎn)物的擴散出現(xiàn)障礙有機溶劑會使酶催化反應(yīng)的活化能增加底物的溶劑化程度越低，基態(tài)越穩(wěn)定，所以活化能就會增加。*什么是酶的分子印記？其在改變酶的催化活性上有什么應(yīng)用價值。3）超臨界流體可以與其他氣體混溶，得到任意濃度，使得反應(yīng)易于控制；4）很多超臨界流體溫度小于100℃，不會使產(chǎn)物熱分解，溫和的溫度適合酶反應(yīng)；5）因為超臨界流體在常壓下是氣體，所以不存在反應(yīng)產(chǎn)物中溶劑殘留的問題第九章 酶反應(yīng)器和酶傳感器酶反應(yīng)器與化學(xué)反應(yīng)器和發(fā)酵罐有何區(qū)別？酶反應(yīng)器是以酶或固定化酶為生物催化劑，進(jìn)行酶促反應(yīng)的裝置。如有氣體參與反應(yīng)，可選用鼓泡式反應(yīng)器。4) 根據(jù)反應(yīng)操作要求選擇反應(yīng)器5) 根據(jù)酶的穩(wěn)定性選擇反應(yīng)器簡述酶反應(yīng)器設(shè)計的一般步驟1) 確定酶反應(yīng)器的類型2) 確定酶反應(yīng)器的制造材料3) 進(jìn)行熱量衡算4) 進(jìn)行物料衡算簡述傳感器，生物傳感器的酶傳感器的基本概念傳感器是指能感受規(guī)定的被測量并按照一定的規(guī)律轉(zhuǎn)換成可用輸出信號的器件或裝置生物傳感器是一類特殊的傳感器，是指以生物材料為敏感元件的傳感器酶傳感器是以酶為感受元件的傳感器酶傳感器有哪些類型1) 酶電極2) 離子敏場效應(yīng)晶體管酶傳感器3) 熱敏電阻酶傳感器4) 光纖酶傳感器5) 聲波酶傳感器電流型酶電極與電位型酶電極有那些不同？結(jié)構(gòu)相似但使用的基礎(chǔ)電極不同；電流型酶電極是指通過酶促反應(yīng)底物或產(chǎn)物在電極上發(fā)生氧化還原或還原電解反應(yīng)所產(chǎn)生的電流信號，從而檢測物質(zhì)濃度，在一定條件下，測得的電流信號與被測物濃度呈線性關(guān)系；電位型酶電極是將酶促反應(yīng)所引起的物質(zhì)量的變化轉(zhuǎn)化為電位信號輸出，從而測定物質(zhì)濃度的一種酶電極傳感器，電位輸出信號的強弱與酶催化反應(yīng)底物濃度的對數(shù)呈線性關(guān)系。熱敏電阻值的變化大小與底物濃度具有一定量的關(guān)系，只要測定熱敏電阻阻值的變化即可測定底物的濃度。 第十章 酶抑制劑？凡可以減弱、抑制甚至破壞酶活性，但不引起酶蛋白變性的物質(zhì)都可以稱為酶的抑制劑。能夠?qū)е虏豢赡嬉种频奈镔|(zhì)就叫不可逆抑制劑。Ks型不可逆抑制劑是根據(jù)底物的結(jié)構(gòu)而設(shè)計的，具有和底物相似的結(jié)構(gòu)，可以和相應(yīng)的酶結(jié)合，并與酶的必需基團(tuán)起反應(yīng)而抑制酶的活性?？赡嬉种仆ǔＳ挚煞譃槿?。如重金屬離子與酶分子中的－SH絡(luò)合。所以這些農(nóng)藥的毒性極高。（1）基于競爭性抑制的底物類似物來設(shè)計酶抑制劑主要是通過競爭性抑制來適當(dāng)控制反應(yīng)的速度，而不是全面關(guān)閉整個反應(yīng)。多數(shù)過渡態(tài)類似物對酶的抑制作用都很強烈。(3)基于自殺性底物來設(shè)計酶抑制劑自殺性底物或者叫Kcat型不可逆抑制劑。 第十一章 酶的應(yīng)用？(1)酶在疾病診斷方面的應(yīng)用以酶活性的變化作為疾病診斷的指標(biāo)直接檢測人體某種酶活性的變化以代謝物的含量變化作為疾病診斷指標(biāo)利用特定的酶來檢測人體內(nèi)某種代謝物的變化(2)酶在疾病治療方面的應(yīng)用(3)酶在藥物生產(chǎn)方面的應(yīng)用青霉素酰化酶半合成抗生素的生產(chǎn)。？（1）在輕化原料處理方面的應(yīng)用發(fā)酵原料的處理紡織原料的處理及加工生絲的脫膠處理及加工羊毛的除垢處理及加工制革原料的處理及加工造紙原料的處理及制漿（2）在輕化工產(chǎn)品生產(chǎn)方面的應(yīng)用L氨基酸、核苷酸、有機酸、化工原料、功能性高分子材料、木材生物質(zhì)材料、生物表面活性劑、油脂產(chǎn)品的酶法生產(chǎn)（3）在加酶日用工業(yè)產(chǎn)品方面的應(yīng)用加酶洗滌劑、加酶工業(yè)清潔劑、加酶牙膏、牙粉或漱口水、加酶護(hù)膚品？（1）細(xì)菌、霉菌、酵母、植物細(xì)胞壁的去除（2）大分子切割方面的應(yīng)用，包括咸志喜核酸內(nèi)切酶、DNA外切核酸酶、堿性磷酸酶、核酸酶S自我剪切酶、RNA剪切酶（3）分子拼接方面的應(yīng)用，DNA連接酶、DNA聚合酶、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶、反轉(zhuǎn)錄酶、自我剪接酶。？用葡萄糖氧化酶可以去除果蔬表面的氧和糖分，防止貯藏過程中發(fā)生褐變，以提高保鮮效果。這類抑制劑必須在被酶催化反應(yīng)之后才能對酶產(chǎn)生抑制作用，因此專一性更高。目前糖苷酶和相當(dāng)一部分蛋白酶的抑制劑是過渡態(tài)的結(jié)構(gòu)類似物。阿糖胞苷抑制DNA聚合酶活性。因此，這樣設(shè)計出來的農(nóng)藥就具備高效、低毒的特性。如L－Phe和L－同型Arg對堿性磷酸酶的抑制作用；肼類化合物對胃蛋白酶的抑制。如底物類似物。非專一性不可逆抑制劑也能與酶分子活性部位以外的基團(tuán)反應(yīng)。不可逆抑制的類型不可逆抑制劑又可分為專一性不可逆抑制劑和非專一性不可逆抑制劑。？它在藥物研制中有何作用？專一性不可逆抑制劑僅與酶分子活性部位的基團(tuán)反應(yīng)，又分為Ks型不可逆抑制劑和Kcat型不可逆抑制劑（自殺性底物）。聲波酶傳感器。電位型酶電極是將酶促反應(yīng)所引起的物質(zhì)量的變化轉(zhuǎn)化為電位信號輸出，從而測定物質(zhì)濃度離子敏場效應(yīng)晶體管酶傳感器將酶膜固定在離子敏場效應(yīng)晶體管柵極的離子敏感膜上，測量時，由于酶的催化作用，使待測物反應(yīng)生成相應(yīng)的產(chǎn)物。如有抑制可采用流加式反應(yīng)器。試比較各類型酶反應(yīng)器的優(yōu)缺點。 說明如何對酶在有機溶劑中的酶催化活性進(jìn)行調(diào)節(jié)和控制（百度的）1）酶的選擇2）底物的選擇和酶的控制3）有機溶劑的選擇4）含水量的選擇5）溫度的控制6）PH的控制什么是超臨界流體？超臨界流體中酶催化有哪些特點？溫度及壓力均處于臨界點以上的液體叫超臨界流體(supercritical fluid，簡稱SCF)特點：1）有似液體的高密度、似氣體的高擴散系數(shù)、低粘度和低表面張力，因此顯示出較大的溶解能力和較高傳遞特性，從而大大降低酶反應(yīng)的傳質(zhì)阻力，提高酶反應(yīng)速率。3）有機介質(zhì)中酶分子對pH記憶與分子印記4）有機介質(zhì)對酶專一性的改變5）有機介質(zhì)對酶促反應(yīng)平衡的影響6）有機介質(zhì)酶催化反應(yīng)的應(yīng)用酶在非水介質(zhì)中，可以大大提高其對一些水不溶底物的催化能力，同時也可以改變酶的底物特異性。P代表某有機溶劑在正辛醇/水體系中的分配系數(shù)。（9）酶和產(chǎn)物易于分離和回收。（5）可控制底物專一性。（2）可提高酶的熱穩(wěn)定性。②影響酶催化反應(yīng)的速度。基因治療設(shè)計能夠識別和切割某些致病基因的核酶。HDV核酶的三維結(jié)構(gòu)是一個呈雙假結(jié)樣、巢狀折疊的立體構(gòu)型，對其催化活性必不可少的C75深深地埋在由內(nèi)部兩個螺旋形成的一個活性中心裂口，即核酶的核心內(nèi)部。II型內(nèi)含子一級結(jié)構(gòu)間的差異比較大，二級結(jié)構(gòu)基本相似。*？作用底物是什么？根據(jù)催化反應(yīng)的種類分為剪接型核酶（包括I型內(nèi)含子和II型內(nèi)含子）和剪切型核酶（包括自身剪切型和異體剪切型），作用底物為RNA。（1）基礎(chǔ)理論研究方面的應(yīng)用 確定酶的結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系 研究蛋白質(zhì)之間的相互作用 研究酶及其它蛋白在細(xì)胞或生物體內(nèi)的定位（2）實際應(yīng)用 酶的非催化特性的優(yōu)化（如穩(wěn)定性） 創(chuàng)造新催化活性的酶 構(gòu)建具雙功能或多功能的酶 在酶內(nèi)部創(chuàng)建別構(gòu)作用第七章 核酶？為揭開生命起源的奧秘提供了有利的證據(jù)。如將一個限制酶的催化中心與一個特異DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域融合在一起可構(gòu)建具有新的特異性的限制性酶。？產(chǎn)生融合酶的方法有兩種：一種是通過隨機重組的方法，即把來自不同酶的基因片段進(jìn)行隨機組合，從這些隨機組合中篩選出具有明顯優(yōu)良特性的酶雜合體。腺苷環(huán)化酶，經(jīng)突變后使酶對鳥苷酸和腺苷酸的相對親和力發(fā)生了明顯的變化。3）隨機引物體外重組4）交錯延伸法（Staggered extension process）？ 1）提高酶分子的催化活力提高酶分子的催化能力是對酶分子進(jìn)行定向進(jìn)化的最重要目標(biāo)之一。 目前酶的異源表達(dá)已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，已經(jīng)應(yīng)用到工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)境和能源等各個領(lǐng)域。第六章 生物酶工程1. 什么是酶基因的克隆，其基本步驟有哪些？ 指在體外將各種來源的目的酶基因與載體連接形成具有自我復(fù)制能力的DNA分子，即重組載體，然后通過轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染將重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞并培養(yǎng)，篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞，再進(jìn)行擴增、提取，從而獲得大量所需酶基因。印跡技術(shù)包括下列內(nèi)容： ①選定印跡分子和功能單體，使兩者發(fā)生互補反應(yīng)。and 酶催化機制是“鎖鑰學(xué)說”（Lock③催化作用機制不同②有更強的專一性和穩(wěn)定性6. 抗體