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《生物化學(xué)核酸》ppt課件 (2)(文件)

 

【正文】 真核 雙鏈線性 DNA( dsDNA) 第四節(jié) RNA的結(jié)構(gòu)與功能 一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 1. 堿基組成 A、 G、 C、 U ( A= U/G≡C) 稀有堿基較多,穩(wěn)定性較差,易水解 2. 多為單鏈結(jié)構(gòu),少數(shù)局部形成螺旋 3. 分子較小 4. 分類 ? mRNA( hnRNA 核不均一 RNA) ? tRNA ? rRNA ( snRNA/asRNA) ? 少數(shù) RNA病毒 二、 tRNA 占 RNA總量的 15% 一種氨基酸對(duì)應(yīng)最少一種 RNA ?分子量 25000左右,大約由 70- 90個(gè)核苷酸組成,沉降系數(shù)為 4S左右。 tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu) 三、 rRNA 占 RNA總量的 80% 原核生物 真核生物 核糖體 rRNA 核糖體 rRNA 30s 70s 50s 16s 5s 、 23s 40s 80s 50s 18s 5s、 、 28s 四、 mRNA和 hnRNA 占細(xì)胞總 RNA的 3%~ 5% ? 真核細(xì)胞 mRNA的 3‘ 末端有一段長(zhǎng)達(dá) 200個(gè)核苷酸左右的聚腺苷酸 (polyA), 稱為 “ 尾結(jié)構(gòu) ” , 5’ 末端有一個(gè)甲基化的鳥(niǎo)苷酸,稱為 ” 帽結(jié)構(gòu) “ 。核酸的的一級(jí)結(jié)構(gòu) (堿基順序 )保持不變。 DNA的 Tm值與分子中的 G和 C的含量有關(guān)。 ? 將熱變性的 DNA驟然冷卻至低溫時(shí), DNA不可能復(fù)性。 ? 核酸的雜交在分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的研究中具有重要意義。 退火溫度= Tm- 25℃ ? 復(fù)性影響因素 片段濃度 /片段大小 /片段復(fù)雜性(重復(fù)序列數(shù)目) / 溶液離子強(qiáng)度 ? DNA單鏈與在某些區(qū)域有互補(bǔ)序列的異源 DNA單鏈或 RNA鏈形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過(guò)程。因而測(cè)定 Tm值,可反映 DNA分子中 G, C含量,可通過(guò)經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算:( G+C)%=() 2. 熱變性和 Tm 3. 核酸的復(fù)性 ? 變性核酸的互補(bǔ)鏈在適當(dāng)?shù)臈l件下,重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)的過(guò)程稱為 復(fù)性 。因此,通常將紫外吸收的增加量達(dá)最大量一半時(shí)的溫度稱熔解溫度,用 Tm表示??辜羟辛Σ睿? ?可用電泳或離子交換(色譜)進(jìn)行分離 ?室溫條件下, DNA在堿中變性,但不水解, RNA水解 ?加熱條件下, D-核糖+濃鹽酸+苔黑酚 綠色 D- 2-脫氧核糖+酸+二苯胺 藍(lán)紫色 二、核酸的紫外吸收特性 ? 在核酸分子中,由于嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵體系,因而具有獨(dú)特的紫外線吸收光譜,一般在 260nm左右有最大吸收峰,可以作為核酸及其組份定性和定量測(cè)定的依據(jù)。 ?339。 0186。 ? 在 DNA分子中 , 嘌呤堿基的總數(shù)與嘧啶堿基的總數(shù)相等 。生物界物種的多樣性即寓于 DNA分子中四種核苷酸千變?nèi)f化的不同排列組合之中。稀有堿基的種類很多,大部分是上述堿基的甲基化產(chǎn)物。核酸的各
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